张瑞玲
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河南工业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 热带念珠菌β-葡聚糖合成酶KRE9基因原核表达及其比活力测定被引量：1
- 2018年
- 【目的】原核表达热带念珠菌(Candida tropicalis MYA-3404)β-葡聚糖合成酶(KRE9),并进行酶比活力测定,为研究其结构和生物学功能提供参考。【方法】提取热带念珠菌DNA,PCR扩增KRE9基因,构建其原核表达载体pET28a-KRE9后转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞,通过IPTG诱导表达及组氨酸(His)标签纯化树脂亲和柱纯化获得融合蛋白KRE9,并利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)显色法测定其比活力。【结果】克隆获得的KRE9基因全长816 bp,编码271个氨基酸,与参考基因序列(GenBank登录号XM_002547984)的相似性高达99.75%。将其原核表达载体pET28a-KRE9转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,通过诱导表达及纯化获得重组蛋白KRE9,经SDS-PAGE检测,发现其纯度较高,大小约35 k D。Western blotting鉴定结果显示,重组蛋白KRE9能与抗His抗体发生特异性结合。重组蛋白KRE9比活力为9.169×10~4U/mg。【结论】重组蛋白KRE9具有良好的特异性和较高β-葡聚糖合成酶活性,可用于其结构和生物学功能研究。
- 刘政伟李瑞芳张瑞玲
- 关键词：热带念珠菌原核表达纯化比活力
- 抗菌肽CGA-N12抗念珠菌作用机制研究
- 李瑞芳张瑞玲刘政伟陈晨常俊朋李超楠
- 抗菌肽CGA-N12对腹腔注射热带念珠菌小鼠的治疗作用被引量：3
- 2017年
- CGA-N12为嗜铬粒蛋白A的N端65-76位氨基酸组成的衍生肽,前期研究表明,CGA-N12具有特异性抗念珠菌活性,尤其对临床病原真菌热带念珠菌拮抗活性最强。为研究CGA-N12体内抗真菌活性,建立了热带念珠菌深部感染小鼠模型,分别用每日15mg/kg和30mg/kg的CGA-N12对小鼠进行治疗,并设每日15mg/kg伊曲康唑治疗对照组和感染对照组。通过测定治疗后小鼠存活率、体重变化、肾脏载菌量,以及组织器官病理变化,判断CGA-N12对小鼠的治疗效果。结果表明,每日15 mg/kg和30mg/kg的CGA-N12治疗14d后与感染对照组相比,小鼠肾脏载菌量分别降低97.6%和99.1%,小鼠存活率分别提高40%和45%,体重分别增加1.3g和5.9g,免疫器官指数均显著增加,而与治疗对照组差异不显著。病理切片观察,每日15mg/kg和30mg/kg的CGA-N12对组织器官的病变均有明显改善,并且没有出现伊曲康唑治疗后产生的肝小叶血管内皮细胞增生和肾出血现象。结果表明,CGA-N12对热带念珠菌深部感染小鼠具有治疗作用。
- 李瑞芳李超楠陆志方张慧茹张瑞玲刘政伟
- 关键词：抗菌肽热带念珠菌
