刘栋
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酵母双杂交系统筛选IRE1相互作用的蛋白质被引量：1
- 2009年
- 目的：寻找与需肌醇酶1（IRE1）相互作用的蛋白质,研究该基因的功能及其在肝细胞凋亡中的作用.方法：采用酵母双杂交方法,分别以hIRE1α（人IRE1α）N端段1-465位氨基酸及C端段468-977位氨基酸为诱饵,与人睾丸cDNA文库质粒先后转化AH109酵母菌株,经三重/四重营养缺陷培养基及X-α-GAL半乳糖苷酶试验筛选,将PCR鉴定为阳性的酵母质粒转入大肠杆菌,提取质粒并测序,进行生物信息学分析.最后通过酵母回转杂交实验对获得的相互作用加以验证.结果：成功构建诱饵质粒pGBKT7-IRE1N及pGBKT7-IRE1C,并在酵母中正确表达融合蛋白,自激活检测及毒性检测均为阴性.分别筛选出8个及15个与IRE1相互作用的蛋白质;通过回转实验验证,确定了能与IRE1C端段相互作用的基因SHISA5,其编码产物为SCOTIN,是P53相关定位于内质网的凋亡诱导蛋白.结论：SCOTIN与IRE1的相互作用提示内质网应激诱导的凋亡与P53通路有关.
- 刘栋陈勇
- 关键词：应激P53肝细胞
- 内质网应激预处理条件下大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型的建立被引量：3
- 2010年
- 目的:通过建立了内质网应激预处理条件下的大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,探讨内质网应激预处理在体内的应用。方法:以衣霉素为内质网应激诱导剂,采用大鼠肝脏70%缺血再灌注损伤模型。按照不同给药剂量分为50μg/kg组、100μg/kg组、200μg/kg组、对照组,观察不同给药剂量条件下,血清转氨酶水平的变化。结果:给药100μg/kg体重、诱导5天条件下大鼠术后转氨酶水平显著低于对照组。其它组与对照组无统计学差异。肝组织病理切片证实该预处理条件对肝脏缺血再灌注损伤有显著保护作用。结论:在特定的给药剂量条件下,衣霉素诱导的内质网应激预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有显著的保护作用。
- 姜巍刘栋杨帆周倜董晓平陈勇
- 关键词：衣霉素内质网应激缺血再灌注损伤
- 内质网应激预处理对人正常肝细胞缺氧再复氧损伤的保护作用
- 2012年
- 目的:研究内质网应激预处理对人肝细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:将培养的人肝细胞分为4组:正常对照(C)组、细胞缺氧复氧损伤(H/R)组、内质网应激(ER)组、内质网应激预处理(ERP+H/R)组。收集各组细胞,以流式细胞仪检测细胞凋亡,Western-bloting及RT-PCR检测内质网应激特异蛋白GRP78表达水平,并通过透射电镜观察各组细胞超微结构改变。结果:ERP+H/R组细胞凋亡率明显低于H/R组(P<0.05),ER及ERP+H/R组GRP78蛋白表达明显高于H/R组(P<0.05)。结论:内质网应激预处理对肝细胞缺氧复氧损伤具有明显的保护作用,内质网应激特异性蛋白GRP78可能在肝细胞缺氧复氧损伤中作为一种关键性的保护蛋白出现。
- 郑志刚吴楠周倜刘栋陈勇
- 关键词：内质网应激预处理人正常肝细胞缺氧再复氧损伤
