吴喆
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：湖南理工学院化学化工学院更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅优秀青年基金湖南省教育厅科研基金湖南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 弹性蛋白样多肽融合胸腺肽α1的原核表达方法
- 2011年
- 目的建立一种低成本生产胸腺肽α1(Tα1)的方法。方法采用融合表达方式表达Tα1基因,通过人工合成Tα1和弹性蛋白多肽(ELP)基因,构建Tα1-G-ELPn/pET41a(+),同时构建RimJ-pACYCDuet1载体,共转BL21,采用自诱导表达培养基进行蛋白表达,表达蛋白通过变温自动聚合沉淀获得高纯度融合蛋白,将融合蛋白羟胺裂解,变温沉淀,收集上清,最终获得目标蛋白。结果 1L培养基最终获得纯度为98%的目标蛋白29.5mg。结论建立了一种不需色谱和亲和纯化的生产胸腺肽α1的方法。
- 刘宇吴喆寻晓红向阳聂东宋
- 关键词：胸腺肽Α1纯化
- 莽山烙铁头蛇粗毒双向凝胶电泳分析被引量：2
- 2011年
- 采用固相pH梯度等电点聚焦-SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对莽山烙铁头粗毒进行了分析,通过银染法显色,电脑软件识别出约40个蛋白质点.其中分子量超过130 kD的蛋白质点很少,分子量90 kD^10 kD的区域均有蛋白质点分布,分子量34 kD区域的蛋白质点较为密集,且它们的含量明显较高.从蛋白质点的等电点分布范围分析,偏于碱性端的蛋白质明显多于酸性端的蛋白质,且分布在中性偏碱(pH 7~8)的区域.质谱数据的数据库搜寻结果表明:莽山烙铁头蛇毒中含有类凝血酶组分、纤溶酶组分、血小板聚集蛋白、抗血小板聚集蛋白和平滑肌钙离子通道阻断剂等组分.
- 聂东宋刘宇吴喆刘立超朱政斌
- 关键词：二维电泳蛋白质组
- 莽山烙铁头蛇粗毒的生物学活性被引量：1
- 2011年
- 分析了莽山烙铁头蛇粗毒对小鼠的半致死量,并采用膜片钳全细胞记录技术,研究了莽山烙铁头蛇粗毒对大鼠背根神经节神经元河豚毒素不敏感(TTX-R)钠通道、河豚毒素敏感(TTX-S)钠通道、低电压激活(LVA)电压依赖性钙离子通道和高电压激活(HVA)钙离子通道的作用。结果表明:粗毒对小鼠的半致死量为4.2 mg/kg,粗毒对钠通道和钙离子通道作用存在明显差异,10、100、1000 mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对河豚毒素不敏感(TTX-R)钠电流有抑制作用,而100mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对河豚毒敏感型(TTX-S)钠电流无明显影响;100、1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对HVA型钙离子通道有抑制作用;1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对LVA型钙离子通道电流峰值有抑制作用.
- 刘宇聂东宋吴喆刘立超朱政斌
- 关键词：莽山烙铁头蛇粗毒生物学活性
