宋丹丹
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：河南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 烟草转录因子NtWRKY-R1的转录激活域鉴定
- 2015年
- 为确定烟草转录因子Nt WRKY-R1的转录激活域,本研究将Nt WRKY-R1的编码区分为7个不同片段,分别构建到酵母表达载体p GBKT7中与GAL4的DNA结合域融合,通过酵母双杂交试验确定,Nt WRKY-R1本身具有能够激活GAL4 BD转录起始的激活结构域,并将转录激活区定位于该转录因子蛋白肽链的N端75个氨基酸残基和C端80个氨基酸残基中。
- 杨金淼宋丹丹周祁宋海龙赵钰泽刘卫群
- 关键词：烟草酵母双杂交
- 烟草WRKY-R1基因的克隆及瞬时表达分析被引量：2
- 2014年
- 以烟草根尖组织cDNA为模板,RT-PCR结合电子克隆得到NtWRKY-R1基因的完整ORF,序列分析显示,NtWRKY-R1具有WRKY转录因子家族典型的WRKYGQK保守结构域及C2H2的锌指结构,属于WRKY转录因子家族第Ⅱ类。采用生物信息学方法对NtWRKY-R1蛋白的理化性质、进化关系和磷酸化位点进行预测和分析,结果表明,NtWRKY-R1与茄科植物保守结构域的同源性及系统进化关系最近;磷酸化位点分析显示该蛋白可能通过磷酸化作用修饰,进而对其相应的代谢活动进行调节。通过构建真核表达载体、建立瞬时表达分析体系,结果显示,NtWRKY-R1基因的过表达导致JA信号途径标记基因PDF1.2及烟碱合成关键酶基因PMT1表达量降低,推测NtWRKY-R1基因影响JA信号途径,进而调控烟碱合成。
- 胡曼宋丹丹杨金淼刘卫群
- 关键词：烟草基因克隆生物信息学分析瞬时表达分析信号途径
