左毅
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 凋亡抑制基因survivin真核表达载体的构建及其在SHG44细胞中的表达
- 2009年
- 目的:克隆细胞凋亡抑制蛋白基因survivin(SVV)的编码序列,构建含SVV基因的真核细胞表达载体并观察其在人胶质瘤细胞系SHG44中的表达.方法:利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增SVV基因编码序列,扩增产物双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,成功构建SVV基因真核表达载体pcDNA3.1-SVV.通过脂质体介导用pcDNA3.1-SVV转染SHG44细胞,经G418筛选,RT-PCR、免疫蛋白印迹(Western Blot)和免疫细胞化学方法鉴定SVV的表达.结果:经酶切鉴定和核苷酸序列分析,证实成功构建了SVV基因真核表达载体pcDNA3.1-SVV.蛋白和RNA水平检测表明SVV基因在SHG44细胞中稳定表达.结论:真核表达载体pcD-NA3.1-SVV使SVV基因在SHG44细胞中稳定表达.
- 张家墅甄海宁章翔张瑞韩涛左毅王鹏霍军丽
- 关键词：SURVIVIN真核表达载体神经胶质瘤SHG44细胞
- 稳定整合靶向性Survivin基因RNA干涉载体胶质瘤细胞系的建立
- 2009年
- 目的构建针对细胞凋亡抑制蛋白survivin(SVV)基因的特异性RNA干涉载体,并建立稳定转染该干涉载体的人胶质瘤细胞系。方法设计合成针对SVV基因和针对荧火虫荧光素酶(FLF)基因特异性RNA干涉片断,并分别克隆入pSilencer3.1-H1neo载体中,成功构建SVV基因RNA干涉载体pSilencer3.1-SVV和无关序列载体pSilencer3.1-FLF。RNA干涉载体、无关序列载体和空白载体经脂质体法转染胶质瘤细胞系U251,经G418筛选,采用实时定量反转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)、免疫蛋白印迹(Westernblot)和免疫细胞化学方法分别检测SVV基因在转染细胞中的表达情况。结果酶切鉴定和核苷酸序列分析证实,成功构建了SVV基因RNA干涉载体pSilencer3.1-SVV。获得了稳定转染干涉载体、无关序列载体和空白载体的细胞系分别命名为U251-S、U251-F和U251-P。U251-S细胞中SVV的mRNA和蛋白表达受到明显抑制,U251-F和U251-P细胞中SVV基因表达水平无明显变化。结论SVV基因特异性RNA干涉载体能够明显抑制SVV基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究SVV在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。
- 张家墅甄海宁章翔张瑞左毅王鹏霍军丽
- 关键词：RNA干涉SURVIVIN胶质瘤
- 白藜芦醇抑制神经元MMP-9表达的作用机制研究被引量：7
- 2009年
- 目的白藜芦醇是一类多酚类化合物,研究表明白藜芦醇能通过下调基质金属蛋白酶9(MMP-9)对神经元产生保护作用。对其抑制机制进行探讨。方法以小鼠神经元氧糖剥夺为模型,分别加入不同剂量的白藜芦醇和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α阻断剂MK886,通过测定乳酸脱氢酶活力反映细胞的损伤程度,分别采用蛋白印迹和逆转录聚合酶链反应研究PPAR-α和MMP-9的表达,探讨白藜芦醇、MMP-9和PPAR-α之间的关系。结果白藜芦醇能上调PPAR-α的表达,同时抑制MMP-9的表达,上述作用能被MK886部分阻断。结论白藜芦醇能通过上调PPAR-α抑制MMP-9的表达。
- 程岗章翔高大宽蒋晓帆左毅
- 关键词：白藜芦醇过氧化物酶体增殖物激活受体基质金属蛋白酶氧糖剥夺
- 小骨窗微创手术治疗高血压基底节区脑出血的随访研究被引量：2
- 2007年
- ①目的比较小骨窗微创手术和常规骨瓣开颅手术治疗高血压性基底节脑出血的近期与远期疗效。②方法对符合入选标准的363例患者,依据手术方式不同分为小骨窗微创手术治疗组(186例)和常规骨瓣开颅手术组(177例)。比较两组患者术前颅内血肿量、发病至手术时间,GCS与ESS评分。术后神经功能恢复状况采用ESS评分和BI评价。③结果术前两组年龄、性别、颅内血肿量、发病至手术时间、GCS与ESS评分差异无统计学意义(P>0.05)。手术后ESS分数迅速增加,术后12个月小骨窗微创手术组ESS为(83.67±16.90)分,明显高于常规骨瓣开颅手术组ESS(69.50±20.88)分,两组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。小骨窗微创手术组的恢复优良率也显著优于常规骨瓣开颅手术组(P<0.05)。④结论小骨窗微创手术具有手术创伤小、术后恢复快、远期效果好特点,是治疗高血压性基底节区出血的一种较为理想的手术方式。
- 左毅肖三潮李峰党连锋李宝明章翔
- 关键词：高血压微创手术基底节区脑出血
