该研究通过硫胺素(VB1)营养缺陷型负选择法,从中国淄博食用油污染的土壤中获得一株酵母属菌株R6。该菌株具有累积胞外α-酮戊二酸(α-KG)的能力。生理学和生物化学实验表明该R6菌株与已测试的API 20 C AUX酵母鉴别系统中的胶红酵母具有共同特征。此外,R6菌株的18S r DNA基因已经获得并测序,基于该序列以及同源菌属所得到的系统进化学分析表明菌株R6与胶红酵母属成员具有99%的同源性。因此,菌株R6被鉴别为胶红酵母属的一员。随后,本实验通过控制单一发酵变量以及高效液相色谱法(HPLC)检测优化了R6累积α-KG的发酵条件。当发酵培养基中添加的VB1和Ca CO3的浓度分别为0.03 mg/L和60 g/L时,α-KG达到6.035 g/L的最高产量。天然营养缺陷型的R6菌株的发现不仅丰富了通过发酵生产α-KG的微生物来源,而且为进一步的发酵调控奠定了基础,从而实现过量的α-KG的累积。
