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迟明
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
第四军医大学基础医学部中心实验室
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
王强
第四军医大学基础医学部中心实验...
张建平
第四军医大学基础医学部中心实验...
亢君君
第四军医大学基础医学部中心实验...
李娜
第四军医大学唐都医院
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第四军医大学基础医学部中心实验...
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现代生物医学...
年份
1篇
2011
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小鼠DLL1真核表达载体的构建及其在肿瘤细胞中的表达
被引量:1
2011年
目的:构建带绿色荧光蛋白的小鼠DLL1全长基因真核表达载体,并在肿瘤细胞中表达。方法:利用PCR特异性引物扩增出DLL1基因全长,将克隆的基因片段插入带绿色荧光蛋白的真核表达载体pIRES2-EGFP质粒中。然后利用脂质体将重组质粒pIRES2-EGFP-DLL1转染进小鼠B16黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选后选取生长良好、荧光强度高的三株单克隆进行mRNA水平DLL1表达的鉴定。结果:成功扩增小鼠DLL1的全长基因。克隆入质粒载体后,通过DNA序列测定证实其序列正确。将构建的pIRES2-EGFP-DLL1质粒转染小鼠B16黑色素瘤细胞,经过G418筛选和荧光显微镜观察后,挑选得到GFP阳性率90%以上的稳定转染细胞株。RT-PCR检测稳定转染细胞的mDLL1的表达显著增加,进一步证实了pIRES2-EGFP-DLL1的表达效能。结论:成功构建了小鼠DLL1基因的真核表达质粒,证实其在真核细胞B16中可以表达。
张建平
李娜
王强
亢君君
李永强
迟明
王春梅
关键词:
肿瘤
质粒构建
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