郭艳婕
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：复旦大学药学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 广藿香MSAP分析技术体系的优化及引物筛选被引量：5
- 2014年
- 目的首次利用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术开展广藿香表观遗传多样性研究,建立并优化广藿香MSAP技术分析的反应体系。方法对MSAP技术中关键的步骤,包括酶切反应中的酶切时间和基因组DNA酶切量,预扩增反应中连接产物的稀释倍数、选择性扩增中预扩增产物的稀释倍数等条件进行了优化。同时,利用优化的条件,对81对引物进行初步的多态性筛选。结果分步酶切,以1 000 ng DNA量进行EcoRⅠ(30 U)酶切5 h,纯化反应产物,再各取15μL的EcoRⅠ酶切纯化产物进行MspⅠ/HapⅡ(10 U)酶切5 h,可完全酶切。优化后的反应体系得到条带清晰、特异性好、背景涂布少的选择性扩增产物。结论建立了MSAP反应体系,保证MSAP图谱稳定、清晰;初步筛选出的32对引物组合,可用于后续广藿香DNA甲基化模式的相关研究。同时,也为其他药用植物提供甲基化敏感扩增多态性研究的依据。
- 黄洁燕卢慧娟熊燕郭艳婕谢晖姬生国
- 关键词：广藿香DNA甲基化表观遗传学
