吴炎
- 作品数:8 被引量:29H指数:4
- 供职机构:吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省产业技术研究与开发项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 鹿茸细胞生长因子的研究进展
- 梅花鹿或马鹿的鹿茸不仅是哺乳动物肢体再生领域一种理想的研究模型,也是独一无二的再生哺乳动物器官。细胞生长因子在鹿茸快速生长过程中起到重要的作用。本文对胰岛素生长因子、表皮生长因子、神经生长因子、转化生长因子、成纤维细胞生...
- 吴炎牛永梅司博王蒙蒙胡薇
- 关键词:梅花鹿马鹿鹿茸细胞生长因子生长发育
- 梅花鹿VEGF基因的克隆及其在鹿茸顶端组织的表达被引量:4
- 2017年
- 为了得到VEGF成熟肽基因,利用Trizol试剂法提取鹿茸顶端组织总RNA,反转录形成c DNA。根据Gen Bank已发表的相关基因序列设计1对特异性引物,并克隆VEGF成熟肽基因,再利用免疫组化法检测VEGF基因在鹿茸顶端不同组织的表达水平。结果表明:成功获得梅花鹿VEGF成熟肽基因,该基因长495 bp,共编码164个氨基酸;经Blast同源性分析,结果显示与牛、羊、猪的核苷酸序列的同源性分别为98.79%、97.98%、96.36%;经DNAMAN软件比对,其氨基酸序列的同源性分别为98.78%、97.56%、96.95%。免疫组化法结果显示,VEGF在茸皮层、间充质层和软骨层中均有表达,其中在软骨层中表达水平较高。
- 韩香玉吴炎李璐闫语多胡薇
- 关键词:梅花鹿鹿茸血管内皮生长因子克隆免疫组化
- 鹿茸细胞生长因子的研究进展
- 梅花鹿或马鹿的鹿茸不仅是哺乳动物肢体再生领域一种理想的研究模型,也是独一无二的再生哺乳动物器官。细胞生长因子在鹿茸快速生长过程中起到重要的作用。本文对胰岛素生长因子、表皮生长因子、神经生长因子、转化生长因子、成纤维细胞生...
- 吴炎牛永梅司博王蒙蒙胡薇
- 关键词:梅花鹿马鹿鹿茸细胞生长因子生长发育
- 文献传递
- 鹿茸细胞生长因子的研究进展被引量:8
- 2015年
- 梅花鹿或马鹿的鹿茸不仅是哺乳动物肢体再生领域的一种理想的研究模型,也是独一无二的再生哺乳动物器官。细胞生长因子在鹿茸快速生长过程中起着重要作用。文章对胰岛素生长因子、表皮生长因子、神经生长因子、转化生长因子、成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子在鹿茸再生发育过程中的作用进行了简要综述。
- 吴炎牛永梅司博王蒙蒙胡薇
- 关键词:梅花鹿马鹿鹿茸细胞生长因子生长发育
- 梅花鹿角脱盘多肽的分离纯化及对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响被引量:6
- 2014年
- 目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘多肽;以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘多肽对肿瘤细胞端粒酶活性的影响。方法采用酸提醇沉法提取鹿角脱盘多肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定的多肽蛋白质含量,TRAP-银染法分析MA782细胞端粒酶活性的变化,再利用相对荧光定量PCR技术检测MA782细胞端粒酶催化亚基TERT基因的表达水平。结果分离纯化出鹿角脱盘多肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;TRAP-银染法检测MA782细胞端粒酶的活性发现,与对照组细胞比较,多肽使细胞端粒酶活性有所下降,典型的重复序列条带数依次减少,多肽处理24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后,MA782细胞中相对端粒酶活力分别为91.4、78.3、66.5、47.8、29.2、20.5,呈时间依赖性;相对荧光定量PCR法分析结果表明,与对照组比较,TERT基因的表达水平降低。结论鹿角脱盘多肽对乳腺癌细胞端粒酶活性有一定的抑制作用,可为深入研究鹿角脱盘多肽抗肿瘤活性提供依据。
- 胡薇田玉华孟星宇李沐李婷李子彬吴炎
- 关键词:多肽分离纯化端粒酶活性
- MiRNA-93-5p对VEGF的转录调控及其与梅花鹿茸细胞增殖的关系被引量:3
- 2014年
- 为了探讨miRNA-93-5p对梅花鹿血管内皮生长因子(VEGF)的转录调控作用及其与鹿茸细胞生长的关系,分离了鹿茸顶端软骨组织细胞,利用Trizol试剂法提取细胞总RNA,反转录合成c DNA。根据Gen Bank已发表的相关序列设计梅花鹿VEGF基因的3'端非编码区部分序列(3'UTR)特异引物并进行克隆,构建VEGF基因的3'UTR野生型及其突变体序列双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测。再将人工合成的miRNA-93-5p模拟物转染鹿茸软骨细胞,MTT法检测鹿茸细胞体外增殖的变化;Western blotting分析VEGF蛋白的表达丰度。结果表明:成功获得了鹿茸组织VEGF基因的3'UTR序列,野生型序列长度为356 bp,突变体长度为336bp。荧光素酶活性检测结果表明,转染野生型质粒组细胞荧光素酶活性降低,而转染突变体组细胞荧光素酶活性无明显变化。MTT法和Western blotting结果显示,鹿茸细胞的体外增殖受到抑制,VEGF蛋白的表达水平下降,且呈时间依赖性。
- 李璐李婷李沐吴炎齐琳崔东明胡薇
- 关键词:血管内皮生长因子转录调控细胞增殖
- 梅花鹿鹿角脱盘总肽的分离纯化及其抗肿瘤活性研究被引量:9
- 2013年
- 目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘总肽,以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘总肽的抗肿瘤活性。方法采用酸提醇沉、真空旋转蒸发及冷冻干燥提取鹿角脱盘总肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定总肽的蛋白质浓度,SDS-PAGE电泳分析总肽中的蛋白质,MTT法和流式细胞仪检测鹿角脱盘总肽对小鼠乳腺癌细胞系MA782增殖的影响和细胞周期的变化。结果分离纯化出鹿角脱盘总肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;SDS-PAGE分析显示,鹿角脱盘总肽中主要含有11 kDa,18 kDa,40 kDa,64 kDa和80 kDa 5种多肽,总肽对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用,细胞周期各期细胞比例变化明显,当总肽浓度为30 mg/L时,作用72 h后细胞抑制率最高为69.200%,G0/G1期细胞百分比为81.621%,S期细胞百分比为8.983%。结论鹿角脱盘总肽对乳腺癌细胞具有抑制作用,为深入研究鹿角脱盘的抗肿瘤活性提供了实验依据。
- 胡薇田玉华孟星宇李沐李婷吴炎
- 关键词:分离纯化活性研究
- 梅花鹿VEGF基因的克隆、原核表达及对细胞增殖的影响
- 鹿茸是雄性梅花鹿或马鹿的带有红黄色或棕黄色细茸毛未长成硬骨时的嫩角,也是哺乳动物中唯一能够完全再生的器官。人们逐渐发现鹿茸具有特殊的分子机理,有很高的研究价值。随着研究深入,鹿茸细胞生长因子已经被认为是调节鹿茸再生发育的...
- 吴炎
- 关键词:梅花鹿鹿茸血管内皮生长因子原核表达细胞增殖
- 文献传递