彭婧
- 作品数:2 被引量:20H指数:2
- 供职机构:中南林业科技大学资源与环境学院更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 4种不同广玉兰基因组DNA提取方法的比较被引量:13
- 2008年
- 采用常规CTAB法、常规SDS法、改良CTAB法、改良SDS法4种方法对广玉兰(Magnolia grandiflora)叶片基因组DNA的提取进行比较,并进行ISSR-PCR检测,结果表明:改良的CTAB法提取的基因组DNA效果比常规CTAB法、常规和改良SDS法都好,提取DNA的浓度和纯度高,无蛋白质和RNA等杂质影响,并且可以很好的应用于ISSR分子标记分析,ISSR-PCR反应体系中模板DNA的最佳浓度是30 ng/20μL.
- 陈永华相阳张冬林李志辉陈亮明彭婧马倩
- 关键词:广玉兰基因组DNA提取
- 两种方法对广玉兰ISSR-PCR反应体系的优化比较被引量:8
- 2008年
- 采用单因子和正交设计2种方法,对影响广玉兰ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引模板DNA)进行优化。结果表明:正交设计采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平与单因子试验找出影响因素最佳反应水平有一定差异,通过综合比较分析,最终建立了广玉兰ISSR-PCR的最佳反应体系:在20μl的反应体系中,TaqDNA聚合酶1.0U、Mg2+1.2~1.5mmol/L、dNTP1.80mmol/L、引物0.5~0.6μmol/L、30ng模板DNA、10×PCRbuffer。同时,通过PCR比较,确定延伸时间为2min,循环次数为35个较为合适,确定了引物最佳退火温度,得到了广玉兰ISSR-PCR反应的最佳扩增程序。
- 陈亮明相阳张冬林李志辉陈永华马倩彭婧
- 关键词:广玉兰单因子试验正交设计