杨惠
- 作品数：13 被引量：26H指数：4
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 慢病毒介导exJSRV-env过表达对绵羊绒毛膜滋养层细胞自噬影响的初探
- 利用慢病毒载体过表达ex JSRV-env致癌基因,探究ex JSRV-env对绵羊绒毛膜滋养层细胞自噬水平的影响,帮助研究者更好的认识ex JSRV-env致癌基因介导肿瘤发生的分子机制。利用慢病毒p LVX-CMV-...
- 杨惠刘淑英
- 关键词：慢病毒自噬基因致瘤机制
- 文献传递
- 自然感染OPA的羔羊肺组织中自噬相关因子的表达分析被引量：1
- 2020年
- 为研究细胞自噬现象在绵羊肺腺瘤(ovine pulmonary adenocarcinoma,OPA)发生发展过程中的作用,本试验以自然感染OPA的羔羊肺组织为材料,以健康羔羊肺组织为对照组,利用免疫组织化学(IHC)染色、实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot等方法综合检测了自噬基因MAP1LC3B、BECN1、SQSTM1及其对应的自噬蛋白LC3、Beclin1、P62的表达情况。结果显示:在对照组中,LC3、Beclin1、P62主要表达于细支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞中;在OPA肺组织中,LC3、Beclin1、P62主要表达于肿瘤化增生的细支气管上皮细胞、增生的Ⅱ型肺泡上皮细胞和浸润的巨噬细胞中。与对照组相比,OPA肺组织中MAP1LC3B基因表达量极显著升高(P<0.01),BECN1基因表达量显著升高(P<0.05),而SQSTM1基因表达量则极显著降低(P<0.01)。在蛋白水平上,OPA肺组织中LC3和Beclin1表达量均显著高于对照组(P<0.05),而P62表达量则极显著低于对照组(P<0.01)。结果表明自然感染OPA的羔羊肺组织中自噬水平明显高于健康羔羊肺组织,提示当病毒入侵机体时机体为了抵抗病毒带来的伤害并维持内环境的稳态,细胞自噬水平升高。本试验为深入探讨自噬在OPA发生发展过程中的作用提供了依据。
- 黄家荣杨惠孙志伟王多智丁玉林刘淑英
- 关键词：OPA羔羊肺组织自噬
- 阿拉善戈壁驼与沙漠驼屠宰性能与骨骼肌组织学性状研究
- 2018年
- 为了研究阿拉善戈壁驼与沙漠驼屠宰性能和骨骼肌组织学性状,试验随机选取6,8,10齿龄的阿拉善戈壁驼和沙漠驼,每个品种、每个齿龄各6峰,共36峰,测量体尺指标并统计屠宰性能,选取成年（8齿龄）阿拉善戈壁驼和沙漠驼臂三头肌、股二头肌、背最长肌制作组织切片,观察肌纤维性状。结果表明：相同齿龄阿拉善戈壁驼体高、体长、活重、胴体重、净肉重、屠宰率、净肉率均显著或极显著大于阿拉善沙漠驼（P〈0. 05或P〈0. 01）;阿拉善沙漠驼臂三头肌、股二头肌、背最长肌肌纤维直径、肌纤维横截面积均显著或极显著大于阿拉善戈壁驼（P〈0. 05或P〈0. 01）,而肌纤维密度显著小于阿拉善戈壁驼（P〈0. 05）。说明阿拉善戈壁驼产肉量大,不仅与其体尺指标相关,还与肌纤维数量的增多有关。
- 王小虎杨惠安希文齐旺梅徐斯日古楞王阿荣那仁巴图刘图雅巴音吉日嘎拉额尔敦木图
- 关键词：体尺屠宰性能骨骼肌
- 阿拉善戈壁驼与沙漠驼骨骼肌纤维类型的比较研究
- 2018年
- 为了探索阿拉善戈壁驼与沙漠驼骨骼肌纤维类型差异,随机选取6,8,10齿龄的健康阿拉善戈壁驼与沙漠驼,每个品种、每个齿龄各6峰,共36峰,分别采集臂三头肌、背最长肌、股二头肌组织,采用组织切片ATP酶染色法对阿拉善戈壁驼与沙漠驼骨骼肌纤维类型及组织学性状进行比较研究,用LAS 4. 0软件分析图片,采用SAS软件进行方差分析。结果表明：6,8,10齿龄阿拉善戈壁驼MyHCⅠ型、MyHCⅡa型、My HCⅡb型肌纤维含量与阿拉善沙漠驼相比差异显著或极显著（P〈0. 05或P〈0. 01）。阿拉善戈壁驼MyHCⅠ型、MyHCⅡa型、MyHCⅡb型肌纤维直径与横截面积均显著或极显著小于阿拉善沙漠驼（P〈0. 05或P〈0. 01）,而单肌纤维密度、肌纤维平均密度、肌纤维总密度显著或极显著大于阿拉善沙漠驼（P〈0. 05或P〈0. 01）。说明阿拉善戈壁驼产肉量大于阿拉善沙漠驼,与肌纤维类型、含量、直径和密度差异有关,其中MyHCⅡb型肌纤维对产肉量的影响最大,其肌纤维直径最小,单肌纤维密度最大;在阿拉善沙漠驼中,MyHCⅡb型肌纤维直径最大,而单肌纤维密度最小。
- 文芳包花尔杨惠徐斯日古楞齐旺梅图雅敖特根巴雅尔白永明格日勒图额尔敦木图
- 关键词：骨骼肌肌纤维类型
- 内蒙古绵羊梅迪-维斯纳病的病理组织学和巢式PCR诊断被引量：6
- 2019年
- 为检测内蒙古地区是否存在梅迪-维斯纳病(Maedi-Visna dieas,eMVD),本试验以内蒙古呼浩特市周边某屠宰场采集的12份绵羊病肺组织为研究对象,采用组织病理学、巢式PCR和测序分析等方法进行检测。组织病理学结果显示:肺脏发生纤维化,并且肺泡腔内Ⅱ型肺泡上皮增生以及间质增宽,支气管和细支气管周围可见较多的淋巴滤泡增生;巢式PCR结果显示:病肺组织中有梅迪-维斯纳病毒(Maedi-Visna viru,sMVV)G ag基因序列的特异性扩增,且与小反刍兽疫、绵羊肺腺瘤病毒以及支原体均无交叉反应。以上结果表明,内蒙古存在MVD。
- 王多智史晓娜张洁杨惠刘淑英
- 关键词：梅迪-维斯纳病巢式PCR组织病理学
- JSRV Env通过Akt/mTOR信号通路调控绵羊绒毛膜滋养层细胞增殖被引量：2
- 2021年
- 利用已构建的JSRV Env慢病毒载体转染绵羊绒毛膜滋养层细胞(STCs),探讨Akt/mTOR信号通路的激活及其对细胞增殖的影响。以STCs为空白组,空病毒载体转染STCs为对照组,JSRV Env慢病毒载体转染STCs为试验组,通过Western blot检测Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白的表达,并在JSRV Env转化细胞中加入mTOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin),利用噻唑蓝(MTT)比色法比较分析细胞增殖情况。激光共聚焦观察显示JSRV Env慢病毒转染STCs 72 h后,因稳定表达了Env蛋白而出现大量红色荧光信号;Western blot结果显示,与空白组和对照组相比,试验组有p-Akt和p-mTOR的显著表达(P<0.05);MTT比色法分析结果显示,与空白组和对照组相比,试验组的细胞增殖能力显著上调(P<0.05)。JSRV Env转化细胞中加入雷帕霉素后,MTT比色法分析结果显示,与JSRV Env慢病毒转染STCs组相比,细胞增殖能力显著下调(P<0.05);Western blot结果显示,雷帕霉素作用72 h后mTOR表达显著下调(P<0.05)。综上可知,JSRV Env慢病毒激活了STCs中的Akt/mTOR信号通路,参与调控细胞增殖。研究结果为进一步探究JSRV Env诱导细胞转化、参与细胞增殖等生物学作用的探讨提供了基础的参考资料。
- 段续接杨惠刘淑英
- 关键词：慢病毒载体
- JSRV-env慢病毒过表达载体构建及其对NIH3T3细胞增殖的影响被引量：4
- 2020年
- 为研究绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)囊膜蛋白(Envelope,env)对NIH3T3细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)增殖的影响,构建pCMV-dR8.91-JSRV-env慢病毒过表达载体并感染NIH3T3细胞。将JSRV-env基因连接红色荧光慢病毒报告载体pCMV-dR8.91,基因测序正确后将载体命名为pCMV-dR8.91-JSRV-env。将pCMV-dR8.91-JSRV-env重组质粒和包装辅助质粒共转染HEK 293T细胞包装产生JSRV-env重组慢病毒。将重组慢病毒悬液利用超速离心沉淀法浓缩,real-time PCR测定病毒滴度。浓缩病毒转导NIH3T3细胞72h后,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况。结果显示:env同源重组入pCMV-dR8.91载体,测序结果与预期序列一致;pCMV-dR8.91-JSRV-env与包装辅助质粒共转染HEK 293T细胞72h,real-time PCR验证JSRV-env过表达极显著(P<0.01),JSRV-env重组慢病毒平均滴度为2.99×10^8 IU/mL;MTT分析显示10μg JSR-env慢病毒感染NIH3T3细胞72h显著促进NIH3T3细胞增殖(P<0.05)。综上,成功构建了JSRV-env慢病毒过表达载体,证实JSRV-env能够促进NIH3T3细胞增殖。
- 杨惠刘淑英
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒囊膜基因慢病毒细胞增殖致病机制
- 利用JSRV构建啮齿动物LPA模型研究进展被引量：1
- 2019年
- 针对绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)构建啮齿动物鳞屑样生长型肺腺癌(Lepidic predominant adenocarcinomas,LPA)模型的问题,采用文献检索的方式,以"JSRV"、"adenocarcinomas"、"mouse model"为检索词,对利用JSRV构建啮齿动物LPA模型的相关文献进行归纳整理。结果表明:该模型主要构建方法为干扰质粒介导体内细胞转化或培育转基因动物;该模型中被激活的信号通路为肿瘤经典信号通路PI3K/Akt及MAPK信号通路;该模型具备相对完善的生物信息学数据支撑,是深入探讨LPA分子水平致病机制的良好模型。在LPA的致病机制以及LPA不同发病阶段靶向药物筛选方面有待进一步研究。
- 杨惠刘淑英
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒肿瘤模型致病机制
- 基于转录组测序分析自然感染的绵羊肺腺瘤肿瘤组织差异表达基因富集的生物学功能模块被引量：2
- 2020年
- 为鉴定自然感染的绵羊肺腺瘤肿瘤组织与绵羊健康肺组织之间的差异表达基因(DEGs),本研究采用Illumina Hiseq 4000高通量RNA-seq测序技术对自然感染的绵羊肺腺瘤肿瘤组织及绵羊健康肺组织进行转录组测序和生物信息学分析。参考绵羊基因组(Ovisaries3.1.88)对测序结果进行拼接与质量评估,测序数据处理后获得DEGs,上调的DEGs和下调的DEGs分别利用GO数据库进行富集分析。结果显示:自然感染的绵羊肺腺瘤肿瘤组织与绵羊健康肺组织比较,DEGs共有366个,其中上调的DEGs 154个,下调的DEGs 212个。通过GO功能富集分析,表达上调的DEGs主要富集于L-亮氨酸跨膜转运蛋白活性、铜还原酶活性、NADH脱氢酶活性、NAD+二磷酸酶活性、磷酸蛋白酶活性的负调控、Nem1-Spo7磷酸酶复合物等生物学功能;表达下调的DEGs主要富集于Ⅲ型转化生长因子β受体结合、DNA导向聚合酶活性、胃气化趋同延伸、面部发育等生物学功能。随机选取7个DEGs利用RT-qPCR方法验证,结果显示这7个DEGs的转录水平与上述结果一致,进一步表明转录组分析数据可信。本实验分析并验证了自然感染后期的绵羊肺腺瘤肿瘤组织的DEGs,为研究自然感染的绵羊肺腺瘤相关分子致瘤机制提供了数据支持。
- 杨惠刘淑英
- 关键词：转录组
- 基于转录组学分析自然感染绵羊肺腺瘤病毒患羊肺肿瘤组织中转录差异基因及病毒致瘤机制的研究
- 2024年
- 绵羊肺腺瘤病(OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的绵羊传染性肺肿瘤疾病。为探究JSRV对绵羊肺脏的致瘤机制,本研究从自然感染JSRV的羊(OPA患羊)肺肿瘤组织和健康羊肺组织中提取总RNA,构建二者的cDNA文库后采用Illumina Hi Seq 4000高通量测序平台进行转录组学测序(RNA-Seq),采用DESeqR筛选健康绵羊与患病绵羊肺组织中的转录差异基因,并以P<0.05和log2(Fold change)≥1筛选转录显著差异基因。通过GO和KEGG数据库对转录显著差异基因进行GO功能和KEGG信号通路的富集分析,并采用RT-qPCR对随机选择的10个转录显著差异基因进行验证。结果显示,与对照组相比,OPA羊肺肿瘤组织中共筛选到1 360个转录上调基因和783个转录下调基因,其中154个转录显著上调基因,212个转录显著下调基因。GO功能分析显示,转录显著差异基因显著富集在178个GO条目中,包括114个生物过程(BP)、19个细胞成分(CC)和45个分子功能(MF),主要涉及生长因子活性、复制后修复、NAD^(+)二磷酸酶活性、核苷代谢过程和鸟苷核苷酸交换因子活性等生物学功能。KEGG分析显示转录显著差异基因主要富集在细胞增殖、分化和肿瘤生成,如PI3K/Akt、MAPK和Hippo等信号通路。RT-qPCR结果显示,10个转录显著差异基因与RNA-Seq筛选结果均一致。本研究进一步通过RT-qPCR、western blot检测Hippo信号通路核心蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶1/2 (MST1/2)、大肿瘤抑制因子1/2 (LATS1/2)、YES相关蛋白1/2 (YAP1)在两组绵羊肺组织样品中的转录及表达水平和YAP1的磷酸化水平(p-YAP1);采用免疫组化试验(IHC)检测Hippo信号通路中上述核心蛋白在两组绵羊肺组织中的表达及定位。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,OPA羊肺组织中MST1和YAP1 mRNA的转录水平均极显著上调(P<0.01、P<0.001),LATS1 mRNA的转录水平显著上调(P<0.05)。Western blot结果显示,MST1/2蛋白在59 ku、YAP1和p-YAP1蛋白在65 ku、L
- 段续接杨惠孙志伟杜晓悦张培梁浚哲刘淑英
- 关键词：绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒
