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微小RNA分析技术研究进展被引量：1: 2013年; 微小RNA(miRNA)是一类起重要调控作用的非编码小分子RNA。准确分析组织或细胞中miRNA的表达水平是研究其生物学功能的基础。近年,研究者开发出多种方法检测不同生理、病理过程中miRNA的差异表达,发现miRNA的异常表达与癌症等多种疾病密切相关。目前,miRNA已逐渐成为重要的疾病诊断生物标志物乃至治疗靶点。miRNA的分析技术贯穿miRNA的研究和药物研发过程,并起到关键作用。我们针对miRNA的不同研究阶段所采用的定性和定量分析方法,着重阐述了用于初始miRNA研究的克隆测序类技术、分析miRNA表达谱的高通量芯片技术、研究具体目标miRNA及其前体表达的qPCR和改良Northern印迹技术,以及将修饰后miRNA作为药物的药代动力学评价技术。; 刘潜付洁宋海峰; 关键词：微小RNA 分析技术药代动力学

基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术同时定量反义寡核苷酸药物原型及其代谢物方法的初步建立被引量：1: 2014年; 目的利用悬浮芯片技术，建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物同时定量的分析方法。方法本研究在确证探针与微球偶联的基础上，考察生物基质效应、偶联微球浓度、检测探针浓度、S1核酸酶用量以及荧光显色液浓度等因素对方法定量的影响。最终在同一生物样品中对反义寡核苷酸原型及其代谢产物进行同时定量分析。结果通过考察生物基质效应，确定稀释10倍的PBS作为条件优化及样品定量分析的生物学基质；微球浓度为150个/μl，检测探针浓度为400 nmol/L，S1核酸酶用量为1 U/孔，荧光显色液浓度为1 μg/ml。在猕猴血浆基质中该方法针对原型与代谢产物序列的定量范围均为7.81～2000 nmol/L。在同时含有低浓度（20 nmol/L）和高浓度（1500 nmol/L）AI-ON1原型（Ai）与AI-ON1缩短代谢产物（Am）的混合血浆样品中，该方法可同时特异性地定量分析Ai与Am。结论本研究成功建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片定量分析方法，可在微量生物样品中实现对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物的同时定量分析。; 刘潜孙云娟付洁宋海峰; 关键词：药代动力学

基于悬浮芯片技术对反义寡核苷酸定量分析方法的建立: 目的建立基于酶联桥接的悬浮芯片技术对反义寡核苷酸原型以及其代谢物同时进行定量分析。方法分别合成3,端与反义寡核苷酸或其代谢物序列互补的捕获探针,并偶联不同荧光标记地址的微球。通过核酸杂交原理,偶联不同微球的捕获探针分别捕...; 刘潜孙云娟付洁高新宋海峰

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刘潜