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押挥远
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
洛阳师范学院生命科学系
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
王颖
洛阳师范学院生命科学系
郑玲
洛阳师范学院生命科学系
耿惠敏
洛阳师范学院生命科学系
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教学
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分子生物
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分子生物学
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分子生物学实...
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表达载体构建
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RESTIN
机构
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洛阳师范学院
作者
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王颖
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押挥远
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耿惠敏
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传媒
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山西医科大学...
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科技信息
年份
2篇
2009
共
2
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分子生物学实验教学改革探索
被引量:2
2009年
针对分子生物学的实验教学中遇到的问题,分别对实验活动开展、学生实验技能培养方式提出了设想,初步探讨师范院校分子生物学实验教学改革的新思路。
王颖
郑玲
押挥远
关键词:
分子生物学
实验教学
授课方式
restin及其位点缺失体的表达载体构建、表达及分析
2009年
目的构建人restin及其核定位信号序列(nuclear localization signal,NLS)、酪蛋白激酶Ⅱ(casein kinaseⅡ,CKⅡ)作用位点缺失体基因rt1、rt2的真核表达载体并检测其在非洲绿猴肾细胞COS-7中的表达。方法应用RT-PCR方法从体外培养的人胚肾细胞HEK293的mRNA中扩增出restin及其缺失体基因的编码区,克隆至pMD18T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)3×flag,酶切鉴定正确后以脂质体法瞬时转染COS-7细胞,Western blot检测restin、rt1、rt2的表达及其亚细胞定位情况,从而确定功能位点缺失是否影响了Restin的核定位。结果测序证实PCR扩增得到的restin、rt1、rt2基因编码区序列正确;脂质体法转染COS-7细胞后检测到预期目的蛋白的表达。截取NLS/CKII位点阻滞了Restin的细胞核定位。结论成功构建了restin及其缺失体基因的真核表达载体并使其在COS-7细胞中表达并检测到功能结构域的缺失引起蛋白Restin的核定位变化。
王颖
耿惠敏
押挥远
关键词:
RESTIN
真核表达载体
核定位
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