王明艳
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 地中海拟无枝酸菌S699电转化方法的优化被引量：2
- 2014年
- 地中海拟无枝酸菌S699(Amycolatopsis mediterranei S699)能够产生具有重要经济价值的抗生素———利福霉素B。在该菌株中建立高效的遗传操作系统是研究利福霉素生物合成机制以及构建基因工程高产菌株的基础。研究利用单因素试验探索了供体质粒的构型、甘氨酸溶度、MgCl2浓度及电转化参数对地中海拟无枝酸菌S699电转化效率的影响。结果表明,使用添加了0.05 g/L甘氨酸和2.5 mmol/L MgCl2的34%YEME培养基培养菌丝体,在9 kV/cm、25μF、550Ω的电转化条件下,以双链DNA为供体,转化效率最高可达到3.37×102个转化子/μg DNA。利用优化后的电转化方法,成功地获得了利福霉素生物合成基因簇中细胞色素P450氧化酶基因orf5的同源缺失突变菌株,证实了优化后的电转化方法可以很好地用于后期遗传学及利福霉素生物合成基因的研究。
- 王明艳何璟
- 关键词：MEDITERRANEI利福霉素B电转化
- 吸水链霉菌ATCC 29253产Hygrocins的条件优化被引量：4
- 2011年
- 吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)ATCC29253能够产生多种具有较好生物活性的次级代谢产物,包括雷帕霉素、尼日利亚菌素、洋橄榄叶素、安莎类抗生素Hygrocins等。通过改变发酵的温度、pH及通氧量,探索菌丝体的最佳生长条件。利用正交试验优化改变培养基中各组分的含量,测试了不同的碳源和氮源对发酵的影响。优化后的培养基组成为甘油20.0 mL/L,棉子饼粉30.0 g/L,磷酸二氢钾1.0 g/L,磷酸氢二钾1.5 g/L,氯化钠5.0 g/L,甘露醇20.0 g/L,水解酪蛋白5.0 g/L。优化的发酵培养基不仅明显提高了hygrocins的产量,同时还较大幅度地促进了雷帕霉素的产生。
- 吴竹华王明艳何璟
- 关键词：雷帕霉素正交试验发酵培养基
