余涛
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 富白细胞和血小板血浆对BMSCs在兔股骨头缺血性坏死中成骨作用的影响被引量：10
- 2015年
- 目的探讨富白细胞和血小板血浆（leucocyte-and platelet-rich plasma,L-PRP）在治疗早期股骨头缺血性坏死（avascular necrosis of femoral head,ANFH）兔模型中,对BMSCs成骨分化作用的影响。方法取4-6月龄新西兰大白兔24只,体重2.0-3.0 kg,雌雄不拘。随机分成A、B、C、D 4组（n=6）,建立双侧ANFH模型。取髂骨骨髓分离培养BMSCs并鉴定;采用Landesberg方法制备L-PRP。ANFH动物模型修复方法：A组单纯行髓芯减压,B组行髓芯减压联合L-PRP移植,C组行髓芯减压联合BMSCs移植,D组行髓芯减压联合BMSCs及L-PRP移植。术后2、4、8周摄X线片,观察髋关节和骨缺损灶骨密度变化,并行Lane-Sandhu X线评分评价成骨情况;取各组股骨头标本,行组织学观察及血管计数、新生骨面积百分比检测。结果影像学及组织学观察均显示各组骨缺损呈现不同程度骨再生。术后2、4、8周,Lane-Sandhu X线片评分、血管计数、新生骨面积百分比均显示：C、D组明显优于A、B组,D组优于C组,B组优于A组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 L-PRP在治疗兔ANFH模型中对BMSCs成骨分化有促进作用,为临床髓芯减压联合BMSCs及L-PRP治疗ANFH奠定了理论基础。
- 方家刘尹宗生王伟陆鸣江正高维陆张硕余涛
- 关键词：BMSCS股骨头缺血性坏死成骨分化
- 促红细胞生成素对脊髓源性神经干细胞分化能力的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨成体大鼠脊髓源性神经干细胞(NSCs)在促红细胞生成素(EPO)的作用下体外分化的形态学表现,为成体脊髓源性NSCs移植治疗脊髓损伤提供理论基础。方法利用无血清悬浮培养,体外分离培养SD大鼠脊髓源性NSCs,随后以含血清培养基贴壁诱导分化培养7 d,行免疫细胞化学染色,以抗巢蛋白(Nestin)鉴定NSCs,以抗微管相关蛋白2(MAP2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色检测NSCs的分化情况。选取第3代NSCs,向培养基中添加EPO,使EPO的终浓度为10 IU/ml,并设不添加EPO的对照组,免疫荧光共聚焦显微镜下分别观察并计数各组神经元/细胞总数得出百分率。结果 SD大鼠脊髓组织体外悬浮培养可获得大量神经球,所获得的神经球均表达Nestin蛋白,以含血清培养基贴壁诱导分化培养,可检测出MAP2和GFAP阳性细胞;EPO组诱导分化后,表达MAP2阳性细胞较对照组显著提高(P<0.05)。结论 SD大鼠脊髓体外培养可获得NSCs,EPO可促进成体脊髓源性NSCs向神经元方向分化。
- 李小波张辉王少滨刘杰余涛杜怡斌尹宗生
- 关键词：神经干细胞促红细胞生成素神经元分化
- Wnt3a基因沉默对内皮祖细胞增殖的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨wnt3a基因沉默对内皮祖细胞(EPCs)增殖的影响。方法体外分离、培养及鉴定EPCs。将沉默型p EGFP-shRNA-wnt3a重组质粒转染EPCs;Western blot法分析wnt3a在EPCs中的表达变化;MTT分析wnt3a沉默对EPCs增殖的影响。结果鉴定培养的细胞为EPCs;Western blot法结果提示p EGFP-shRNA-wnt3a转染EPCs后明显抑制了wnt3a蛋白的表达。MTT提示沉默型pEGFP-shRNAwnt3a转染组吸光度值明显低于空白对照组。结论成功分离、培养出EPCs,wnt3a有效沉默明显抑制EPCs的增殖,为进一步的实验提供了基础。
- 余涛杜怡斌杜公文张辉张硕方家刘高维陆尹宗生
- 关键词：内皮祖细胞WNT3A基因沉默基因转染细胞增殖
- 妊娠早期蜕膜甲状腺激素受体信号异常对蜕膜化进程的影响及其与流产发生的关联
- 2024年
- 目的评估自然流产患者蜕膜血管生成情况,并探讨自然流产患者蜕膜中甲状腺激素受体信号的表达改变。方法收集行人流术的孕妇蜕膜。以自然流产患者作为实验组,以社会因素行人流术的健康孕妇作为对照组,收集两组人群蜕膜组织。采用Western blot方法,检测蜕膜组织中甲状腺激素受体-α(THR-α)和THR-β的核转位情况,同时使用免疫组化法定位蜕膜组织中THR-α和THR-β的分布。Western blot测定蜕膜组织中Ⅱ型脱碘酶(DIO2)的蛋白表达水平,免疫荧光法定位DIO2在蜕膜组织分布并测定荧光强度。使用免疫组化,以CD34作为内皮标志物测定蜕膜血管密度。Western blot检测血管内皮生长因子受体(VEGFR-1)的蛋白表达水平。结果对照组与流产组在年龄、妊娠天数、TSH、T3、T4等基本资料中,差异均无统计学意义。Western blot结果提示THR-α和THR-β蛋白核转位置下降,同时蜕膜组织免疫组化染色结果表明自然流产患者蜕膜甲状腺激素受体核转位减少(P<0.05)。Western blot结果表明流产组DIO2蛋白表达较对照组下降,提示自然流产孕妇蜕膜中,甲状腺激素代谢受到影响;免疫荧光实验结果显示流产组DIO2的荧光强度较对照组减弱(P<0.05)。免疫组化法CD34标记蜕膜小血管的结果显示,在流产组中,CD34^(+)血管数量下降,差异有统计学差异(P<0.05)。Western blot结果提示流产组和对照组中VEGFR-1无明显变化,差异无统计学意义。结论蜕膜局部甲状腺激素受体信号异常可能导致蜕膜血管生成减少,从而参与自然流产的发生。
- 翟沐鑫李萱余涛赵丽赵丽杨媛媛
- 关键词：流产蜕膜化甲状腺激素受体
- 骨髓源性EPCs对脊髓源性NSCs增殖分化的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)对脊髓源性神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法通过密度梯度离心法获取骨髓血单个核细胞,以EBM-2进行诱导培养EPCs并进行免疫细胞化学染色鉴定,成熟的方法获取及鉴定SD大鼠的脊髓NSCs,1×105/ml第3代NSCs置于Transwell小室下层与1×105/ml上层原代EPCs进行体外1∶1共培养,以单纯第3代的NSCs培养为对照,培养7 d,双盲法分别计数各组在相差显微镜下神经球形成的数目,并用目镜测微尺测量神经球的平均直径,通过5%血清诱导培养NSCs7 d后,行β-微管蛋白-Ⅲ免疫荧光染色,Hoechst细胞核染色后在显微镜下计算神经元/细胞总数得出百分率。结果骨髓源性EPCs与脊髓源性NSCs共培养组神经球平均数目为(22.27±3.85)个,平均直径为(61.70±7.21)μm,诱导培养后分化为神经元的平均百分率为(46.10±3.70)%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论骨髓源性EPCs能促进脊髓源性NSCs增殖及其向神经元分化。
- 张硕杜怡斌杜公文张辉余涛方家刘高维陆尹宗生
- 关键词：NSCSEPCS增殖分化微环境
- 组织块法体外分离培养大鼠脊髓成体神经干细胞被引量：1
- 2014年
- 取8月龄SD大鼠脊髓,分组织块法和细胞悬液法培养,测量神经干细胞球出现的时间、数量、直径。MTT法鉴定增殖能力及免疫荧光染色鉴定分化神经元和星型胶质细胞的比例。组织块组在神经干细胞球出现的时间、数量及增殖能力上与细胞悬液组比较差异有统计学意义,两组在分化细胞比例上差异无统计学意义。
- 张辉张硕江正余涛钟林尹宗生
- 关键词：组织块培养成体神经干细胞脊髓
