王凡
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 家蝇Denfensin-1基因的克隆、诱导表达及启动子活性分析被引量：4
- 2013年
- 【目的】鉴定一种新的家蝇Musca domestica防御素基因,并分析其功能。【方法】从家蝇转录组数据库中鉴定了1条新的防御素基因cDNA序列,并将其命名为家蝇防御素1(Md-defensin-1)基因Mdde-1。利用生物信息学网站、软件预测其结构等信息。以实时荧光定量PCR技术研究该基因的表达模式,并且利用基因步移技术获得了启动子序列,同时采取细胞转染技术验证Mdde-1启动子活性。【结果】该序列包含一个276 bp的开放阅读框,编码91个氨基酸残基。推导的氨基酸序列N端包括1个23个氨基酸残基的信号肽和1个28个氨基酸残基的前肽。成熟肽由40个氨基酸残基组成,含有1个典型的CSαβ基序。实时荧光定量PCR结果显示,家蝇2龄幼虫受金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus(G+)刺激后Mdde-1表达明显上调,而大肠杆菌Escherichia coli(G-)刺激后表达下调;Mdde-1在家蝇幼虫受到热激时呈上调表达。为进一步研究其调控机制,克隆了Mdde-1启动子,并证明了该启动子具有活性。【结论】据此认为Mdde-1是一种新的家蝇防御素,并且在免疫革兰氏阳性菌方面发挥重要作用;同时我们首先证明了Mdde-1的启动子具有活性。本研究为进一步研究家蝇防御素的作用机制奠定了基础。
- 卢丹郑立王欣欣王凡唐婷柳峰松
- 关键词：家蝇先天免疫抗菌肽防御素启动子
