解璞 作品数:30 被引量:133 H指数:6 供职机构: 贵州省农业科学院 更多>> 发文基金: 贵州省科技计划项目 贵州省优秀青年科技人才计划 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
红肉火龙果α-淀粉酶基因HpAMY3的克隆及功能鉴定 2024年 为了解α-淀粉酶在红肉火龙果〔Hylocereus polyrhizus(F.A.C.Weber)Britton et Rose〕果实淀粉降解中的作用,对红肉火龙果α-淀粉酶基因HpAMY3进行克隆和生物信息学分析,检测果实发育期间该酶的活性及其编码基因的表达,同时对HpAMY3重组蛋白的淀粉降解活性进行分析。结果表明:HpAMY3基因的开放阅读框长度为2742 bp,编码913个氨基酸;HpAMY3蛋白的理论相对分子质量为102370,理论等电点为pI 6.02,预测此蛋白位于叶绿体,且为亲水性蛋白。系统进化分析表明HpAMY3与拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕AtAMY3的亲缘关系最近,均属于AMYⅢ类。亚细胞定位实验结果显示HpAMY3定位于本氏烟草(Nicotiana benthamiana Domin)叶片的叶绿体,表明HpAMY3具有质体定位的特点。在授粉后20和23 d,红肉火龙果果实的α-淀粉酶活性较低;在授粉后25 d,α-淀粉酶活性显著(P<0.05)升高;在授粉后27和30 d,α-淀粉酶活性保持在较高水平。红肉火龙果果实的HpAMY3基因相对表达量在授粉后20和23 d较低,在授粉后25和27 d持续升高,在授粉后30 d略有降低。红肉火龙果果实发育期间α-淀粉酶活性与HpAMY3基因相对表达量的相关性较高(R^(2)=0.94)。体外淀粉降解活性实验结果显示:在含有HpAMY3重组蛋白的反应体系中均检测到麦芽糖和麦芽三糖,且二者含量极显著(P<0.01)高于含有载体对照pDR196的反应体系。综合上述结果,HpAMY3蛋白可能定位于红肉火龙果果实的淀粉体;在果实发育期间,HpAMY3基因上调表达,HpAMY3具有淀粉降解活性。 郑乾明 王红林 王小柯 解璞 马玉华关键词:红肉火龙果 Α-淀粉酶 果实发育 亚细胞定位 酵母表达 3个品种火龙果采后生理特性变化与耐贮性分析 被引量:2 2021年 以“紫红龙”、“晶红龙”、“粉红龙”火龙果为试材,比较了常温库贮藏过程中这3个品种火龙果果实的腐烂率、呼吸速率、失重率、果皮的显微结构、电导率、果皮厚度、含水量、果胶和纤维素含量的变化及差异,分析造成3个品种耐贮性差异的原因。结果表明,参试3个品种火龙果的耐贮性为:“粉红龙”>“晶红龙”>“紫红龙”。火龙果采收时果皮越厚,蜡质层越完整,表皮细胞和厚角细胞层数越多,细胞越小,则原果胶含量越高,耐贮性越好。贮藏过程中,火龙果果皮细胞解体率越慢,则含水量峰值越晚到来,原果胶下降越缓慢,耐贮性越好。而采收时果实的呼吸强度、膜透性、含水量、纤维素含量与火龙果耐贮性关系不大。 张绿萍 解璞 王宇 袁启凤 王立娟 王彬 黄鑫关键词:火龙果 采后 生理特性 显微结构 耐贮性 不同品种红肉柚类胡萝卜素组分及其抗氧化能力研究 被引量:2 2022年 采用液相色谱串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)对果肉色泽有差异的6种贵州红肉柚品种的类胡萝卜素组分及含量进行比较分析,同时运用体外抗氧化法测定果肉中总类胡萝卜素、总类黄酮和总多酚等活性成分的大小。结果表明,红肉柚果肉中总类胡萝卜素含量在150.81 mg/kg~241.29 mg/kg,组分包括玉米黄质、γ-胡萝卜素及番茄红素等10种,其中γ-胡萝卜素是主要呈色色素。果肉中总类黄酮含量在55.54 mg/kg~482.22 mg/kg,总多酚含量在0.41 mg/g~0.77 mg/g,抗氧化能力与总类胡萝卜素、总多酚和总类黄酮含量呈正相关性。 罗怿 李金强 李文云 王小柯 解璞关键词:色泽 类胡萝卜素 抗氧化能力 蜂糖李低产原因及应对措施 被引量:5 2020年 为提高蜂糖李产量的科学管理提供参考,从花果管理、树形、肥水及病虫害等方面对蜂糖李低产原因进行了分析,并提出了应对措施。 赵凯 解璞 冯建文 赵晓珍 马玉华关键词:低产原因 采后复合肥、中微量元素配施对蜂糖李根际土壤、叶片养分及果实产量、品质的影响 被引量:2 2023年 研究采后复合肥、中微量元素配施对蜂糖李果园土壤、叶片养分、果实产量及品质的影响,为蜂糖李施肥提供依据。选择5年生、生长正常、树势一致的蜂糖李,设3个处理:采后施平衡型复合肥(15-15-15)+中微量元素(处理A)、采后施高钾(16-8-21)复合肥+中微量元素(处理B)、采后不施肥(CK),研究采后施肥对蜂糖李果园土壤、叶片养分、果实产量及品质的影响。结果表明,通过采后施肥,蜂糖李园土壤碱解氮、速效钾含量显著提高,增幅分别在24%、141%以上,采后施用平衡型肥可显著增加土壤有效磷含量;采后施肥可显著提高叶片氮、钾含量,增幅分别在5.6%、36.3%以上,对叶片磷含量影响不大;采后施肥显著提高果实钾含量,增幅在31.9%以上,并显著提高蜂糖李果实产量、单果质量,增幅在126%、9.6%以上。但采后施肥造成果实成熟推迟,相较同期对照果实,因未充分成熟,品质显著下降;采后施肥降低果实色度角、硬度、可溶性固形物、固酸比,增加果实可滴定酸、维生素C含量。从补充土壤养分、增加叶片营养,以及增加产量、单果质量方面考虑,采后施用高钾复合肥效果均最佳。较之三元平衡肥(15-15-15),采后施用高氮高钾复合肥(16-8-21)产量最高、单果质量最大,综合增产效果更佳。 张敏 彭志军 解璞 赵凯 王红林 周俊良 马玉华关键词:叶片养分 果实产量 基于转录组序列的火龙果SSR和SNP多态性分析 被引量:9 2018年 为深入挖掘火龙果SSR和SNP分子标记,以自交亲和型火龙果新种质‘黔蜜龙’转录组序列为基础,系统分析了SSR和SNP位点多态性和分布特征。转录组序列组装共获得96 800个unigene,其中28 471个unigene在数据库中得到注释,在各个数据库中均得到注释的有5 800个。从unigene中搜寻到26 167个SSR位点,出现频率为0.35个/kb。SSR重复类型共180种,单核苷酸重复最多(66.00%),其次为二核苷酸重复(23.01%)、三核苷酸重复(9.99%),其他类型较少(1.00%)。SSR长度在10~381 bp,10~11 bp的SSR有7 988条(30.53%),长度12~20 bp的有15 901条(60.77%),长度21~40 bp的有1373条(5.25%),长度大于40 bp的有905条(3.46%)。unigene中共有357 330个SNP位点,发生频率为1/204 bp,其中碱基转换位点226 165个(63.29%),碱基颠换位点141 165个(36.71%)。6种单碱基变异类型中,C/T、A/G的发生频率最高,分别占31.91%和30.38%。A/T、A/C、T/G和C/G这4种颠换类型分别占SNP总数的7.85%、7.85%、7.2%和13.09%,碱基转换类型比例高于颠换类型。火龙果转录组序列中的SSR和SNP位点丰富,筛选多态性、准确率高的引物,有望在火龙果遗传多样性分析、品种鉴定和遗传图谱构建等方面得到应用。 严佳文 肖图舰 袁启凤 解璞 彭志军 毛永亚 马玉华关键词:火龙果 转录组 SSR SNP 荸荠杨梅的挥发油成分分析 被引量:4 2014年 研究了黔产荸荠杨梅果实(Myrica rubra Boqi)挥发油的化学成分。采用水蒸气蒸馏法制备荸荠杨梅挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对荸荠杨梅的挥发油成分进行研究。从荸荠杨梅挥发油中检出51个色谱峰,鉴定了32个化合物,占挥发油总量的94.64%,主要化合物为:石竹烯(20.29%)、棕榈酸乙酯(18.35%)、5-羟甲基-1,3,3-三甲基-2-(3-甲基-1,3-丁二烯基)-环戊醇(12.66%)、2,2'-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)(9.38%)、邻苯二甲酸己烷-3-醇异丁醇酯(5.68%)、α-古巴烯(2.42%)、别香橙烯(2.36%)、β-谷甾醇(2.23%)、α-榄香烯(1.80%)和(1,4-二烷-2,5-二羟基)二甲醇(1.61%)。通过对其挥发油成分和含量的分析评价,为开发利用荸荠杨梅资源提供科学依据。 刘涛 龙本文 罗欢 金吉芬 解璞 彭志军关键词:荸荠杨梅 挥发油 化学成分 气相色谱-质谱 火龙果开花调控转录因子基因HpSOC1的克隆与表达分析 被引量:5 2018年 SOC1是拟南芥成花诱导过程中的关键基因之一,其表达产物能整合多条成花途径的调控信号。为揭示火龙果(Hylocereus polyrhizus) SOC1同源基因在光周期成花途径中的作用机制,以火龙果芽为试验材料,应用RACE技术克隆了SOC1同源基因,命名为HpSOC1。其cDNA全长为1365bp,开放阅读框长度为651bp,编码216个氨基酸, GenBank登录号为MH230063。HpSOC1蛋白具有典型的MADS-box、K-box结构域和SOC1-MOTIF,属于MADS基因家族中的SOC1/TM3亚家族,无信号肽输出位点和跨膜螺旋区,定位于细胞核内,属于非分泌蛋白。基因表达分析结果显示, HpSOC1在茎、茎芽和花芽中的表达量显著高于根、花瓣和果皮;相比对照,光照处理8 d时, HpSOC1表达显著上调。推测HpSOC1可能在营养生长向生殖生长转变的过程中发挥作用。 严佳文 解璞 袁启凤 肖图舰 毛永亚 马玉华关键词:火龙果 光周期 克隆 基因表达 百香果果斑病的病原鉴定及防控药剂初筛 被引量:1 2022年 采用组织分离法从贵州安顺发生果斑病的百香果上分离出真菌并纯化,根据柯赫氏法则确定其致病性,明确分离所得菌株B08为致病菌。经形态学观察初步鉴定其为链格孢菌。测定相关基因序列,构建多基因系统发育树,发现B08与梨黑斑链格孢Alternaria gaisen(菌株号:CBS 632.93、LM0519、BMP0243)聚于一支。在室内开展防治药剂的初步筛选,发现氟菌·肟菌酯和苯甲·嘧菌酯对病原菌的抑制效果较好,EC50分别为0.67μg/mL和0.79μg/mL。 赵晓珍 王红林 解璞 袁启凤 马玉华关键词:病原鉴定 链格孢菌 甜橙糖转运蛋白Cit SWEET15基因的表达分析与转运活性检测 2023年 高等植物糖转运蛋白SWEET(sugars will eventually be exported transporter)家族具有葡萄糖、果糖或蔗糖的转运活性,广泛参与光合产物韧皮部装载和卸载,以及花、果实和种子发育等生理过程。为探讨CitSWEET15基因在甜橙果实发育和成熟期间的生理功能,本研究开展CitSWEET15的基因克隆、表达模式、亚细胞定位和蔗糖转运活性分析。CitSWEET15基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为918 bp,编码305个氨基酸,含有7个跨膜结构域。CitSWEET15的理论等电点为6.29,相对分子量为34.15 kDa。系统进化分析表明,CitSWEET15与AtSWEET15、VvSWEET15、LcSWEET15和PuSWEET15为直系同源基因,属于SWEETⅢ类。序列比对表明,CitSWEET15与克里曼丁橘、莽山野橘、金柑、柚、宜昌橙和枸橼的SWEET15基因的核苷酸序列一致率为98.69%~99.9%,氨基酸序列一致率为97.38%~100%。CitSWEET15和上述柑橘类SWEET15成员,与AtSWEET13的4个蔗糖识别位点和3个蔗糖转运活性相关位点完全一致,说明CitSWEET15和柑橘类SWEET15成员可能均具有蔗糖转运活性。荧光定量PCR检测表明,CitSWEET15基因在甜橙果实的种子和果肉中表达量较高,果肉中CitSWEET15基因的表达水平在花后80~140 d较低,随着果实发育显著上调,在花后230 d达到最高水平。将CitSWEET15的C端融合绿色荧光蛋白,然后在拟南芥叶肉原生质体中瞬时表达。亚细胞定位分析表明,荧光信号分布在原生质体外缘,CitSWEET15定位于细胞膜。通过在酿酒酵母W303a(W303-1A)菌株中异源表达和蔗糖类似物七叶苷孵育,检测CitSWEET15和AtSWEET10(At5g50790,阳性对照)的蔗糖转运活性。表达CitSWEET15的酵母细胞与AtSWEET10相似,其荧光强度显著高于载体对照,表明CitSWEET15具有蔗糖转运活性。因此,CitSWEET15是定位于细胞膜的蔗糖转运蛋白,在柑橘类物种中序列高度保守,参与甜橙果实成熟期间的质外体蔗糖跨膜转运。本研究结果为了解甜� 郑乾明 王小柯 王红林 解璞 付慧敏 陈传武关键词:酵母表达 果实成熟