唐剑锋
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- 自噬在自身抗体所致心力衰竭进程中对T小管重塑的影响
- 2016年
- 目的:通过大鼠自身抗体所致的心力衰竭模型的建立,研究细胞在β1-肾上腺素受体自身抗体(β1-adrenergic receptor autoantibody,β1-AA)所导致的心力衰竭中,自噬对T小管重塑的调控作用。方法:采用我校实验动物中心提供的健康Wistar大鼠24只为研究对象,将其随机分为4组,β1-AA组及β1-AA+Rapa组采用β1-AR-ECⅡ肽段对大鼠进行主动免疫,而其对照组(Control组)则采用溶剂对大鼠进行主动免疫,建立对照组模型,另设立阳性对照组(Rapa组)使用雷帕霉素对大鼠进行注射,与β1-AA+Rapa组进行对照。在免疫模型建立的前一天对每只大鼠进行尾静脉的血样采集,对血清进行分离,采用酶联免疫吸附法测量大鼠血样中的β1-AA的含量,此后定期测量β1-AA的含量。在建立模型后,分别于建立后的第8周和12周的第一天,每组分别选取3只大鼠,使用压力换能器及生物信号记录分析系统将输入的压力信号进行分析,测得大鼠的心功能参数。随后处死大鼠,对大鼠心脏进行活检,并取大鼠的血清和心室的心肌组织备用。采用共聚焦显微镜对大鼠左心室的横管重塑进行评估检测;采用Western blot法对大鼠心肌组织中的Beclin1蛋白的含量进行检测。结果:大鼠主动免疫模型建立后的第2周到第6周,β1-AA组及β1-AA+Rapa组大鼠体内的β1-AA水平快速升高,明显高于对照组大鼠,6周以后该两组大鼠的β1-AA水平比较稳定,但是仍显著高于对照组。β1-AA组大鼠心肌细胞内与自噬相关的Beclin1蛋白的表达水平从第8周起即明显低于其他3组。第8周时,β1-AA组及β1-AA+Rapa组心肌细胞横管均出现重塑改变,但不伴心功能明显改变;第12周时,β1-AA组大鼠心脏出现明显扩大,镜下可见心肌组织间隙有大量结缔组织增生,β1-AA组及β1-AA+Rapa组心肌细胞TT-power值均有进一步下降,但β1-AA组心肌细胞T小管重塑更为明显,心肌细胞横管亦显著破坏,其TT-power明显
- 唐剑锋刘正华刘文亮梁恒星
- 关键词：心力衰竭自噬
