李晨
- 作品数：13 被引量：13H指数：2
- 供职机构：上海市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 重组人皮肤模型在化妆品皮肤刺激性评价中的应用研究被引量：4
- 2021年
- 目的探讨重组人皮肤模型应用于化妆品体外皮肤刺激性评价的可行性。方法以重组人皮肤模型(EpiSkinTM)为受试模型,在对10个已知刺激性分类的标准化学品进行方法验证的基础上,再根据化妆品的使用特性对23个产品进行皮肤刺激性分类评价,其中6个基础型化妆品和10个美容型化妆品暴露18 h、7个清洁型化妆品分别暴露18、4和2 h,检测终点为MTT试验测定细胞活性,并以细胞相对存活率50%为判定依据来分类刺激性和非刺激性物质。分类评价结果同步与本实验室传统Draize兔皮肤刺激性试验历史数据进行一致性比较。结果23个测试产品在暴露时间为18 h的预测性达到73.9%,其中16个基础型和美容型化妆品的预测性可达到100%,而7个清洁型化妆品的预测性仅为14.3%。针对清洁型化妆品缩短上样时间(参照Draize兔皮肤刺激性试验方法),结果该类产品暴露4 h的预测性可提高至42.9%,暴露2 h的预测性可达到100%。结论基于EpiSkin^(TM)的皮肤刺激性体外替代方法(18 h上样)可用于对护肤类和彩妆类化妆品的评价,但全面推广至化妆品的评价尚有局限性,仍需对产品的上样时间进一步研究和摸索。
- 孙静秋邓晗依帅怡李晨王彦琴沙毅杰陶功华
- 关键词：化妆品皮肤刺激性
- 基于重组人角膜模型的眼刺激性体外替代方法研究
- ＜正＞目的:建立重组人角膜模型SkinEthicTM体外替代方法并探讨其用于化学品眼刺激性评价的预测能力。方法:选取11种已知刺激性分类的标准化学品（其中包括5种固体化学品和6种液体化学品;覆盖不同溶解度、含自身颜色反应...
- 霍倩帅怡孙静秋李晨肖萍陶功华
- 文献传递
- 纳米二氧化硅致Nrf-2基因缺陷人永生化表皮细胞氧化损伤的研究被引量：1
- 2017年
- [目的]探讨纳米二氧化硅(nano-SiO_2)致核因子E2相关因子2(Nrf-2)基因缺陷型人永生化表皮细胞的氧化应激损伤效应。[方法]采用RNA干扰技术构建人永生化表皮细胞(HaCaT)Nrf-2基因缺陷细胞模型,以终质量浓度(后称浓度)为2.5、5.0、10.0 mg/L的nano-SiO(215 nm粒径)分别染毒HaCaT细胞和Nrf-2基因缺陷细胞24 h,检测细胞内活性氧(ROS)、8-羟化脱氧鸟苷(8-oHdG)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激指标,并对细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2蛋白的表达水平进行分析。[结果]5.0、10.0 mg/L nano-SiO_2可引起HaCaT细胞的活力明显降低(P<0.05),而2.5 mg/L nano-SiO_2开始即可引起Nrf-2基因缺陷细胞活力呈剂量依赖性降低(r=-0.914,P<0.05),Nrf-2基因缺陷细胞的活力均明显低于同浓度组的HaCaT细胞(P<0.05)。各浓度组细胞内ROS、8-oHdG和MDA水平均呈剂量依赖性增高,而T-SOD和GSH-Px的含量则呈剂量依赖性降低;与同浓度组HaCaT细胞相比,Nrf-2基因缺陷细胞中相关指标的变异程度更大,差异有统计学意义(P<0.05)。正常HaCaT细胞中,低剂量组总Nrf-2蛋白和低、中剂量组核Nrf-2蛋白的表达水平增高(P<0.05);而随着nano-SiO_2暴露浓度的进一步增高,两种蛋白的表达水平又呈降低的趋势。与HaCaT细胞的阴性对照比较,Nrf-2基因缺陷细胞中总Nrf-2蛋白表达水平下降,核Nrf-2蛋白表达水平未见差异。[结论]5.0 mg/L nano-SiO_2可体外诱导HaCaT细胞发生氧化应激性损伤,Nrf-2基因缺陷可通过改变细胞的抗氧化防御能力,增加HaCaT细胞对nano-SiO_2的敏感性。
- 陶功华肖萍孙静秋娄丹霍倩王彦琴李晨仲伟鉴帅怡
- 关键词：核因子E2相关因子2纳米二氧化硅氧化应激
- 基于AOP策略的体外替代试验在化妆品皮肤致敏性评价中的应用
- 2022年
- 探讨基于皮肤致敏有害结局通路中第二及第四事件所建立的体外替代试验在化妆品皮肤致敏性测试中应用的可行性及评估策略。以体外培养的DSens及Jurkat细胞作为受试模型,分别采用DSens和TCPA方法对9种标准化学品和特殊类化妆品产品进行测试,通过检测2种方法对应指标的表达水平,对体外皮肤致敏性预测能力进行验证。验证结果显示,DSens法对于致敏强度不同的标准化学品的识别敏感度要高于使用Jurkat细胞作为模型的TCPA法,而应用研究结果显示,2种方法对于12种产品的预测结果与基于AOP第三事件的h-CLAT的判定结果及体内皮肤变态反应的判定结果具有高度的一致性。基于AOP原理的体外皮肤致敏性测试作为化妆品皮肤致敏性评价的一种新型筛查方法具有一定的有效性,采取合理的组合策略能够给我国动物替代试验的发展及应用带来非常良好的前景。
- 应梦超肖萍洪新宇孙静秋霍倩李晨陈田陶功华
- 关键词：皮肤致敏性T细胞激活
- 重组人皮肤模型在日用化学品皮肤刺激性评价中的应用研究
- 目的:探讨重组人皮肤模型EpiSkinTM（中国生产）应用于日用化学品体外皮肤刺激性评价的可行性。方法:本实验室首先根据OECD TG439的推荐方法（15min上样/42h孵育,检测终点为MTT测定细胞活性,并以相对细...
- 孙静秋陶功华李晨王彦琴帅怡
- 重组人皮肤模型在日用化学品皮肤刺激性评价中的应用研究
- [目的]探讨重组人皮肤模型EpiSkin？(中国生产)应用于日用化学品体外皮肤刺激性评价的可行性。[材料和方法]本实验室首先根据OECD TG439的推荐方法(15min上样/42h孵育，检测终点为MTT测定细胞活性，并...
- 孙静秋陶功华李晨王彦琴帅怡
- 关键词：日用化学品
- 高糖暴露对小鼠脑微血管内皮细胞通透性的影响
- 2020年
- 【目的】探讨高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。【方法】选取小鼠脑微血管内皮细胞系(bEnd.3)作为研究模型,检测跨内皮细胞电阻值(TEER)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)的活性,对细胞模型的血脑屏障特征进行鉴定;再通过细胞形态学、细胞活力、细胞内乳酸脱氢酶活性及ZO-1、Occludin基因相对表达量的变化评价高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。【结果】细胞的TEER值、ALP及γ-GT的活性随细胞培养时间的增加而逐渐升高;细胞形态学结果显示,高糖作用下细胞数目明显减少,贴壁不稳;细胞活力实验显示,经葡萄糖暴露处理后,受试细胞活力呈剂量和时间依赖性降低;随着葡萄糖暴露浓度的增高,细胞内乳酸脱氢酶活性逐渐增高,各剂量组差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,对紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的mRNA表达水平进行检测发现,高糖暴露可抑制ZO-1、Occludin基因的表达,且表达水平呈剂量依赖性降低。【结论】体外培养的bEnd.3细胞模型具有血脑屏障的特征,高糖暴露能够抑制紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达,该结果可能与脑微血管内皮细胞通透性的改变有关。
- 娄丹沙毅杰帅怡霍倩李晨肖萍陶功华
- 关键词：高糖血脑屏障
- 体外微核高内涵筛选法在食品毒理学遗传毒性评价中应用研究
- 2020年
- 目的探讨基于高内涵筛选(high-content screening, HCS)技术的体外微核(in vitro micronucleus, IVMN)检测方法应用于食品毒理学遗传毒性评价的可行性。方法采用IVMN和HCS法,分别对10种化合物进行遗传毒性评价,其中5种已知遗传毒性化合物(染色体断裂剂和非整倍体诱发剂)、1种已知非遗传毒性化合物以及4种食品原料,每个受试物至少设置3个剂量组,每个剂量组设2个复孔,同时设置阴性对照组(无血清最小必需培养基)和阳性对照组(+S9为环磷酰胺20μg/ml、-S9为丝裂霉素C 1.0μg/ml)。以中国仓鼠肺细胞为细胞模型,在有和/或无代谢活化系统条件下,依次对上述受试物采用短时处理(4 h)后进行微核检测,并分析微核细胞率。结果经IVMN和HCS法得到的IVMN试验结果显示:2.5~10μg/ml苯并芘[B(a)P]、5~20μg/ml甲磺酸甲酯(MMS)、0.01~0.04μg/ml 4-硝基喹啉-N-氧化物(4NQO)、0.25~1.0μg/ml秋水仙碱(COL)和0.5~2.0μg/ml硫酸长春碱(VB)在各自浓度范围内,在有或无代谢活化系统的条件下,诱导产生的微核细胞率随着受试物浓度的升高而增加,呈明显剂量-反应关系,且微核细胞率与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),试验结果为阳性;1 250~5 000μg/ml氯化钠(NaCl)、1 250~5 000μg/ml食品原料A、1 250~5 000μg/ml食品原料B、312.5~1 250μg/ml食品原料C和156.25~625μg/ml食品原料D在各自浓度范围内,在有和无代谢活化系统的条件下,微核细胞率虽呈现一定的剂量依赖性增加趋势,但均维持在较低的水平,且与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),试验结果为阴性。结论本试验条件下,两种方法对10种物质的检测结果均一致,提示将IVMN HCS法应用于食品毒理学遗传毒性评价具有一定的可行性。
- 孙静秋洪新宇肖萍帅怡王彦琴郑卫东李晨陶功华
- 关键词：遗传毒性
- 人重组皮肤模型评价手消毒剂产品皮肤刺激性的应用研究被引量：1
- 2022年
- 采用人重组皮肤模型(EpiSkin^(TM))作为实验模型,通过联合测定细胞活性和白介素-1α(IL-1α)来综合评估14个市售手消毒剂产品的皮肤刺激性,其中4个免洗型产品暴露4 h,10个非免洗型产品分别暴露2 h和4 h,将得到的结果分别与动物试验(Draize试验)结果进行对比。结果显示,在皮肤刺激性试验中,经Draize试验判定为中刺激性的两个产品,人重组皮肤模型均能有效鉴别。采用上样时间4 h,14个产品的人重组皮肤模型和动物试验结果的准确度为57.1%、特异度为50%。对其中10个非免洗型产品采用2 h上样,其准确度可达到71.4%、特异度可提高至66.7%。研究表明,人重组皮肤模型在手消毒剂产品的皮肤刺激性评价中具有一定的可行性,根据产品的使用特性进行暴露时间的优化可为消毒剂产品皮肤刺激体外测试标准方法的建立提供实验室依据。
- 邓晗依孙静秋肖萍李晨霍倩沙毅杰王乐天陶功华
- 关键词：消毒剂IL-1Α皮肤刺激性
- 基于转录组学的抗结核药物肝损伤生物标志研究
- 2023年
- 【目的】利用转录组芯片技术探索抗结核的药物肝损伤(DILI)的生物标志。【方法】对上海市定点医院首次接受抗结核药物治疗的152例病例进行6个月的跟踪研究。在第0、2、4、8、12、24周采集血液样本,根据临床生化指标将研究人群分为肝损伤病例(DILI组,34例)和对照病例(对照组,118例),对两组间各影响因素进行单因素分析。采取1∶1匹配的病例对照研究,对13对DILI组/对照组病例的RNA样本进行全转录组mRNA芯片测序,通过Hotelling’s T^(2)值排序法和STEM基因趋势分析软件筛选差异表达基因(DEGs),对DEGs进行功能富集和通路分析。【结果】在152例接受抗结核药物治疗的临床病例中,患者体质量是抗结核药物肝毒性发生的危险因素。基于13对DILI组/对照组6个时间点的mRNA芯片分析,Hotelling’s T^(2)值排序法筛选到513个DEGs,富集在基因本体(GO)的32条注释和KEGG基因数据库的10个通路中。STEM基因趋势分析软件筛选到1个差异表达模式,富集在GO的2条生物过程注释。其中关键基因AIM2、CD86、CXCL10和非编码RNA SCARNA10、SNHG10、SNORD105为抗结核药物肝毒性发生的潜在生物标志。【结论】对抗结核DILI人群的生物标志研究,识别了与肝毒性发生相关的生物学途径,并获得一组与DILI相关的关键基因,为DILI发生机制研究及寻找更加早期、敏感的肝毒性发生生物标志提供了参考。
- 李晨王彦琴霍倩帅怡陶功华洪新宇肖萍
- 关键词：抗结核药物肝毒性生物标志转录组学
