樊宏英
- 作品数：8 被引量：26H指数：3
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- 黄粉虫抗菌肽促K562细胞凋亡作用及其机制的研究被引量：2
- 2011年
- 为观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的影响,进而探讨黄粉虫抗菌肽否是影响线粒体膜电位以及是否可以引起K562细胞凋亡,本文首先采用荧光探针罗丹明123 标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小;其次用caspase-3检测试剂盒和酶标仪测定K562细胞caspase 3的含量.实验结果显示,抗菌肽组的K562细胞荧光强度显著低于对照组（t=5.635,P〈0.05）,说明黄粉虫抗菌肽可使K562细胞线粒体膜电位降低;抗菌肽组caspase 3的含量显著高于对照组（t=43.289,P〈0.05）,说明黄粉虫抗菌肽可以诱导K562细胞发生凋亡.结果表明,黄粉虫抗菌肽可以诱导K562细胞发生凋亡,作用机制是通过降低K562细胞线粒体膜电位,扰乱其生理功能,促使其凋亡.
- 樊宏英刘颜岗赵瑞君乔丛静申金雁
- 关键词：抗菌肽线粒体膜电位CASPASE-3细胞凋亡
- 家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞K562作用机制的初步研究
- 目的：
1．从三龄家蝇幼虫体内分离纯化，筛选具有抗肿瘤细胞K562（人慢性髓性白血病细胞）的抗菌肽，并鉴定其是否对人正常细胞293T 有抑制作用。
2.观察分离纯化得到的抗菌肽对K562细胞存活率及生长曲线的...
- 樊宏英
- 关键词：抗菌肽K562蛋白纯化荧光标记法线粒体膜电位CASPASE-3
- 家蝇幼虫抗菌肽对K562细胞膜的质量浓度阈值作用被引量：5
- 2012年
- 目的探讨家蝇3龄幼虫抗菌肽对K562细胞膜的作用。方法通过针刺感染大肠埃希菌诱导家蝇3龄幼虫大量表达抗菌肽,然后经过研磨、离心、固相萃取、反相高效液相色谱分离纯化家蝇3龄幼虫抗菌肽,采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法和光镜观察法筛选对K562有抑制作用的抗菌肽;用不同质量浓度的峰5、峰8处理K562细胞,采用台盼蓝拒染法测定细胞存活率和生长曲线的变化;用光学显微镜和荧光显微镜检测细胞膜形态的变化;用荧光分光光度计检测细胞膜荧光素的渗漏;用激光共聚焦显微镜观察细胞膜的损伤程度。结果低质量浓度(<50μg/ml)对细胞存活率无明显影响,细胞整体形态变化不大,细胞荧光素渗漏较少[(18.95±0.05)～(22.49±0.68)],细胞损伤甚微;高质量浓度(≥50μg/ml)使细胞存活率明显下降,细胞形态变化逐渐增大,细胞荧光素渗漏较多[(62.77±4.08)～(70.81±0.18)],甚至大分子荧光素DextranFITC可以通过。结论家蝇3龄幼虫抗菌肽对K562细胞膜的作用存在质量浓度阈值,低质量浓度时可引起膜通透性增加,高质量浓度时可引起细胞膜严重损伤。家蝇幼虫抗菌肽可能通过直接杀伤作用抑制K562细胞生长,其作用机制首先是通过对膜作用,然后可能进一步对膜作用从而使膜上孔洞不断扩大或者进入细胞后经过其他途径抑制K562细胞生长。
- 程璟侠樊宏英赵瑞君
- 关键词：家蝇幼虫抗菌肽肿瘤细胞K562
- 家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽促K562细胞凋亡作用及其机制研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽对K562细胞核和线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽是否可以影响线粒体膜电位及促进K562细胞凋亡。方法首先采用Hoechst33258荧光标记法,将家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞,用荧光显微镜检测K562细胞核荧光强度的变化;其次采用荧光探针罗丹明123标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光强度表示线粒体膜电位大小;最后用caspase-3检测试剂盒和酶标仪测定K562细胞caspase-3的含量。结果采用Hoechst33258荧光标记法,用荧光显微镜观察到家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用于K562细胞后部分细胞核的荧光强度增强,说明其可以引起K562细胞发生凋亡;用罗丹明123标记,激光共聚焦显微镜观察发现,家蝇3龄幼虫峰5、峰8组分作用组的K562细胞荧光强度值明显低于对照组(t1=21.30,t2=196.23,P<0.05),说明家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽可以使K562细胞线粒体膜电位降低;峰5、峰8组分作用组caspase-3的含量明显高于对照组(t1=146.92,t2=189.56,P<0.05),说明3龄幼虫抗肿瘤肽可以促进K562细胞发生凋亡。结论家蝇3龄幼虫抗肿瘤肽峰5、峰8组分对K562细胞核具有损伤作用,可以引起K562细胞发生凋亡,作用机制是通过降低K562细胞线粒体膜电位,激活caspase-3,扰乱其生理功能,促使其凋亡。
- 赵瑞君樊宏英程璟侠冀霞焦丽萍贾琳
- 关键词：荧光标记法线粒体膜电位半胱天冬氨酸蛋白酶-3凋亡
- 黄粉虫幼虫抗肿瘤细胞K562抗菌肽的分离纯化被引量：11
- 2009年
- 目的从黄粉虫幼虫体内分离纯化具有抗肿瘤细胞K562的抗菌肽。方法通过超声诱导黄粉虫幼虫大量表达抗菌肽。然后经过研磨、离心、固相萃取、反相高效液相色谱分离纯化黄粉虫幼虫抗菌肽,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法和光镜观察法筛选对K562有杀伤作用的抗菌肽。结果离心上清液上样固相萃取柱,经10%、30%、80%的乙腈水溶液洗脱,只有80%的乙腈水溶液分离组分有活性(P<0.01)。该活性组分经反相高效液相色谱纯化后分离出5个具有抗肿瘤活性的峰物质,这5个峰活性都较强(P<0.01),其中峰9、峰4能初步确定为抗菌肽,其他3种有待于进一步的实验证明。结论黄粉虫幼虫体内存在抗肿瘤细胞K562的抗菌肽和抗菌物质,而且不止一种。
- 刘颜岗程璟侠赵瑞君樊宏英
- 关键词：黄粉虫幼虫抗菌肽肿瘤细胞K562纯化
- 抗菌肽抗肿瘤作用机制的研究进展被引量：3
- 2011年
- 抗菌肽（antimicrobial peptide，AMPs）是天然免疫系统中的一种小分子多肽，一些具有抗肿瘤活性，毒副反应小，不易产生耐药性。近年来，深入细致的研究已经明确了抗菌肽对肿瘤细胞的杀伤抑制作用及其作用机制。目前，普遍认同的抗肿瘤抗菌肽的作用机制包括以下五方面：（1）在肿瘤细胞膜上形成穿膜孔道，使肿瘤细胞死亡；（2）作用于细胞骨架使其结构紊乱；（3）抑制DNA合成，影响细胞增殖；（4）作用于线粒体引起肿瘤细胞凋亡；（5）影响免疫效应进而杀伤肿瘤细胞。该文就抗菌肽抗肿瘤细胞的作用机制作一综述。
- 樊宏英赵瑞君
- 关键词：抗菌肽肿瘤细胞
- 黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响及与羟基脲对细胞增殖抑制的比较被引量：2
- 2010年
- 目的观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响;比较该抗菌肽与羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用。方法用流式细胞仪检测黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响。黄粉虫抗菌肽与羟基脲分别设置5个浓度组,用MTT比色法分别求出2种药物不同浓度对K562的抑制率,根据浓度和抑制率用SPSS软件求出回归方程和IC50。结果细胞周期G0/G1期和G2/M期细胞比例增加,S期细胞比例下降。其中只有G0/G1期和S期与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。说明抗菌肽可使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而抑制S期DNA的合成。抗菌肽和羟基脲的IC50分别为29.98和3644.45μg/ml。结论抗菌肽可通过影响细胞周期来发挥抗K562细胞的作用。抗菌肽明显优于羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用,有较好的应用前景。
- 程璟侠刘颜岗索文莉赵瑞君樊宏英
- 关键词：抗菌肽羟基脲K562细胞周期增殖抑制
- 家蝇源抗K562活性物质的分离与纯化被引量：1
- 2012年
- 为从家蝇Ⅲ龄幼虫体内提取具有抗K562细胞活性的物质，并对其组分化学性质及对人正常细胞的作用进行分析。本文用大肠杆菌诱导家蝇Ⅲ龄幼虫大量表达活性物质，然后通过研磨、离心、固相萃取法（SPE）初步分离活性物质，通过反相高效液相色谱（RP—HPLC）进一步纯化提取活性组分，通过四甲基偶氮噻唑蓝（Methyl thiazolyl tetrazolium，MTT）比色法和光镜观察法相结合，筛选出对K562有抑制作用的活性组分，并鉴定其对人正常细胞293T的作用。结果显示，从家蝇Ⅲ龄幼虫体内分离出4个具有抑制K562细胞活性的多肽组分（峰5～8），具有分离度高、纯度高等特点。当质量浓度为100ug／mL和作用时间为24h时，4个多肽组分均具有抗K562细胞的活性，其中峰5多肽组分和峰8多肽组分活性较强，对K562细胞的相对抑制率分别为48．52％和65．80％。结果表明，家蝇Ⅲ龄幼虫体内存在一些具有抗K562细胞活性的多肽，而且对人正常细胞几乎无杀伤作用。但是，这些多肽是否属于抗肿瘤肽还有待被证实。
- 刘颜岗樊宏英赵瑞君
- 关键词：反相高效液相色谱多肽K562
