黄显德
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 供职机构：山东农业大学植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备被引量：3
- 2017年
- 将黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV上获得pEHISTEV-CGMMV-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,表达出分子量为19.5 kD的CGMMV CP融合蛋白。切胶回收诱导表达的CGMMV CP免疫家兔,制备抗血清。Western Blotting检测发现,制备的抗血清能与CGMMV CP发生特异性免疫反应,与同属的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)无反应。琼脂双扩散试验测定,制备抗血清的效价为1∶16,ELISA测定效价为1∶1024。该血清特异性强、效价高,可用于CGMMV的检测。
- 刘锦李亦晴黄显德房乐李向东田延平
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白基因原核表达抗血清
- 番木瓜环斑病毒山东分离物的全基因组序列分析被引量：3
- 2018年
- 番木瓜环斑病毒（Papayaringspotvirus，PRSV）属于马铃薯Y病毒科（Potyviridae）马铃薯Y病毒属（Potyvirus）。根据寄主范围可划分为P和W2个株系，其中P株系侵染番木瓜（CaricapapayaL．）和葫芦科（Cucurbitaceae）作物，而W株系只侵染葫芦科作物，两者血清学反应密切相关。PRSV可引起植株叶片褪绿、花叶、卷曲等症状，在果实表面形成环斑。
- 黄显德王玉闫志勇闫志勇田延平李向东
- 关键词：番木瓜环斑病毒马铃薯Y病毒属分离物葫芦科作物血清学反应
- 番木瓜环斑病毒西瓜株系衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：2
- 2017年
- 以感染番木瓜环斑病毒西瓜株系(papaya ringspot virus-watermelon strain,PRSV-W)的西葫芦叶片为供试材料,通过RT-PCR克隆PRSV-W衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,并将其连接到原核表达载体pEHISTEV上得到重组质粒pEHISTEV-PRSV-W-CP。将其转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后可表达分子量约为37 kD的融合蛋白。将融合蛋白从凝胶中切下,乳化后免疫新西兰长耳兔,制备PRSV-W CP的抗血清。间接ELISA测定该血清效价为1∶8192。Western blot检测结果表明,该抗血清只与感染PRSV的西葫芦样品有特异性反应,而与健康西葫芦、感染西瓜花叶病毒的西葫芦及感染马铃薯Y病毒的普通烟样品均无反应。本研究为PRSV的快速检测以及CP蛋白功能的研究奠定了基础。
- 黄显德王玉田延平田延平古勤生
- 关键词：衣壳蛋白原核表达抗血清制备
- 甘蔗花叶病毒2个山东分离物的全基因组序列分析被引量：5
- 2017年
- 甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是引起我国玉米矮花叶病的主要病毒。本文从山东泰安采集到2个表现矮花叶症状玉米样品的分离物(命名为DWK1和DWK2),通过RT-PCR扩增全基因组片段并测定了其序列(GenBank登录号分别为KU171814和KU171815)。序列分析结果表明,DWK1和DWK2基因组全长分别为9 575和9 576个核苷酸(nucleotides,nt),开放阅读框均为9 192 nt,编码3 063个氨基酸的多聚蛋白。DWK1和DWK2的全基因组核苷酸一致率为81.7%,DWK1与山西分离物SX(AY569692)的核苷酸一致率最高,为90.9%;DWK2与河北分离物BD8(JN021933)核苷酸一致率最高,达99.4%。二者在系统进化树中分别被聚类到Ⅰ组和Ⅳ组。重组分析发现,DWK1是HN(AF494510)、Guangdong(AJ310105)和BD8 3个分离物的重组体。选择压力分析表明,SCMV 11个蛋白的dN/dS值都小于1,均处于负选择,但在P1、P3和CP中存在正选择位点。本研究结果可为甘蔗花叶病毒株系的监测及防控提供理论指导。
- 程德杰闫志勇黄显德田延平原雪峰李向东
- 关键词：全基因组序列系统发育分析甘蔗花叶病毒
- 番木瓜环斑病毒西瓜株系侵染性克隆的构建及应用
- 利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)和RT-PCR获得了番木瓜环斑病毒西瓜株系山东分离物(PRSV-SD)的全基因组序列。PRSV-SD基因组(GenBank登录号为MF085000)全长10 337个核苷酸(nuc...
- 黄显德王玉程德杰刘锦闫志勇田延平李向东
- 关键词：全基因组序列
- 文献传递
- 山东省侵染马铃薯的马铃薯Y病毒株系鉴定
- 2015—2016年在山东省马铃薯主产区采集马铃薯病毒病样品584份。ELISA检测发现515个样品与马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)多克隆抗体呈现阳性反应,检出率为88.18%。随机选取不同地区13...
- 张继武王姝雯栾雅梦冀树娴黄显德王群李向东田延平
- 关键词：马铃薯Y病毒系统进化树复合侵染
- 文献传递
- 马铃薯Y病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：7
- 2018年
- 采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,可以表达出分子量为35 k D的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰大耳兔制备PVY CP抗血清。间接ELISA结果表明,该抗血清的效价为1∶16384,Western blot分析表明该抗血清只与感染PVY的普通烟植株有特异性反应,而与健康普通烟和感染PVX的普通烟植株无反应。本研究为PVY的血清学检测以及早期预警奠定了基础。
- 王玉黄显德魏代福温亮杨举田陈秀斋田延平
- 关键词：马铃薯Y病毒衣壳蛋白原核表达抗血清制备
