廖林
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人肝脏凝血因子Ⅺ的原核表达及其兔多克隆抗体的制备被引量：2
- 2014年
- 目的利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ(coagulation factorⅪ,F11)蛋白,并制备F11的兔多克隆抗体。方法从cDNA文库中筛选并扩增F11基因,将其分别与带有HIS标签的pET-32a及GST标签pGEX-4T-1载体连接,获得表达质粒,将表达质粒转入BL21菌中表达F11融合蛋白(分别含有HIS、GST-Tag),通过SDS-PAGE进行鉴定。获得的F11融合蛋白经纯化后作为免疫原及检测原,制备兔多克隆抗体,Western blot分析获得的兔多克隆抗体的特异性。结果成功构建pET-32a-F11、pGEX-4t-1-F11表达质粒,获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫兔,取得了能与重组蛋白特异性结合的兔血清。结论成功制备了F11重组蛋白及F11兔多克隆抗体,为进一步研发F11诊断试剂打下了基础。
- 吕鑫钰廖林李淑珍朱大岭
- 关键词：原核表达融合蛋白
