刘艳
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 牛源材料中BVDV检测方法的验证及应用被引量：2
- 2016年
- 目的对生物制品生产过程中使用的牛源材料(牛血清、牛源细胞等)进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测以保证制品的生物安全性。方法参照制药质量体系Q10(ICH Q10)对杂质的定性检测要求,采用一步法RT-PCR检测BVDV的5'-UTR保守区,并对其特异性、敏感性和重复性进行验证,然后将其应用于牛源材料中BVDV的检测。结果扩增产物为250 bp的目的片段,测序后经序列比对分析软件BLAST比对,同源性达99%,且与其他5种牛源病毒均无相关性;敏感度达1CCID50/m L。应用该方法对牛血清、牛鼻甲骨细胞(BT)、牛肾原代细胞、MDBK细胞等样品进行检测,15份为阳性,阳性检出率为12%。结论一步法RT-PCR检测BVDV,特异性强、重复性好、敏感性高,可用于牛源材料中BVDV的快速检测。
- 郭敏鱼轲刘军刘艳魏至栋
- 关键词：生物制品牛病毒性腹泻病毒一步法RT-PCR
- 影响轮状病毒半数细胞感染剂量法滴定的因素分析被引量：1
- 2012年
- 目的:确定影响轮状病毒感染增殖过程的因素,以提高滴度检测结果的重复性和可靠性。方法:采用半数细胞感染剂量法(CCID50)结合ELISA(CCID50-ELISA)判断病毒在细胞上有无复制来检测病毒滴度。结果:不同细胞代次、接种浓度、培养时间、培养液种类和接种细胞孔数均会对病毒滴定结果造成显著影响。结论:轮状病毒滴度检测的线性和准确性与细胞状态与培养环境相关。CCID50-ELISA法检测轮状病毒滴度有良好的重复性和耐用性。
- 鱼轲魏至栋郭敏刘艳谢澎庞兴崔焰
- 关键词：轮状病毒滴度
- 牛肾细胞基质牛源病毒的控制和检测被引量：4
- 2012年
- 目的:检测和控制牛肾细胞基质中可能存在的外源病毒,提高细胞基质的安全性,保证轮状病毒疫苗的质量。方法:用ELISA法检测牛肾供体新生小牛血清中的病毒抗体。用细胞培养法检测供体血清和牛肾细胞中的外源病毒,免疫荧光抗体法检测供体血清和牛肾细胞中的特殊牛源病毒。结果:81份禁食禁水的新生小牛血样7种病原抗体检测均为阴性;血吸附病毒检测均为阴性,直接免疫荧光检出1例BVDV阳性。65份牛肾细胞特殊牛源病毒检测均为阴性。结论:通过对牛肾供体小牛进行病原筛选可有效降低牛肾细胞携带外源病毒的风险,也是提高疫苗安全性行之有效的策略。
- 魏至栋鱼轲刘艳郭敏谢澎庞兴
- 关键词：外源病毒
