钱栋
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 缺氧微环境中胰腺星状细胞通过CCL7/CCR5轴促进胰腺癌侵袭被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨缺氧状态下胰腺星状细胞的单核细胞趋化因子7(C-C motif chemokine ligand 7,CCL7)表达情况及其对胰腺癌侵袭的影响。方法:通过组织块外植法获得人肿瘤相关胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs),于常氧(20%O_2)、缺氧(1%O_2)下培养,并通过人趋化因子抗体芯片技术分析其上清液中多种趋化因子的表达差异;通过加入不同浓度外源性人重组蛋白CCL7(0、1、10、100 ng/mL)研究趋化因子CCL7与胰腺癌细胞侵袭之间的浓度依赖关系;使用慢病毒转染、Transwell等技术着重分析缺氧PSCs过表达的CCL7促胰腺癌侵袭的作用。结果:相较于常氧培养PSCs,缺氧培养PSCs的条件培养基可显著增强胰腺癌侵袭能力(P<0.05);缺氧培养下PSCs上清液中CCL7相较于常氧培养显著高表达(fold change=2.38);外源性重组CCL7蛋白(0、1、10、100 ng/mL)可显著增加胰腺癌细胞(Miapaca-2、Colo357)侵袭能力,且呈浓度依赖关系。流式细胞术检测CCL7受体(CCR1、CCR2、CCR3、CCR5)表达,显示胰腺癌细胞(Miapaca-2、Colo357)仅有CCR5高表达。Western blot印迹显示,缺氧诱导PSCs高表达CCL7并促胰腺癌侵袭的过程中存在EMT改变,即E-cadherin表达下降,Vimentin、N-cadherin表达上升。结论:缺氧可诱导PSCs高表达CCL7,并通过CCL7/CCR5轴促进胰腺癌细胞迁移和侵袭,其机制可能与诱导胰腺癌上皮间质化有关。
- 吴飏刘东方张纯陆子鹏彭云鹏蔡宝宝吴鹏飞田蕾钱栋袁昊时国东朱毅张静静蒋奎荣
- 关键词：缺氧胰腺星状细胞CCR5
- 胰腺星状细胞高表达Galectin-1通过SDF-1促进胰腺癌细胞侵袭转移机制研究
- 背景:胰腺导管腺癌因为较早的局部浸润或转移,致死率高,预后令人失望。病理观察发现胰腺癌微环境中,癌灶周围存在大量间质细胞,主要为胰腺星状细胞(Pancreatic Stellate Cells,PSC),这些细胞可能与胰...
- 钱栋
- 关键词：胰腺癌胰腺星状细胞GALECTIN-1SDF-1
- 文献传递
- 模块叠加式枪头盒
- 本实用新型公开了一种移液器枪头盒子结构，包括底座、设置在所述底座上并逐个叠加放置的多个标准化枪头托板模块、位于最上层的盒盖，所述的多个枪头托板模块相互扣接，盒盖扣接于最上层的枪头托板模块上，所述枪头托板模块上设置有数个用...
- 吴飏蒋奎荣陆子鹏杨兵张纯张晓艳张静静李潇吴鹏飞彭云鹏钱栋刘东方
- 文献传递
- 人胰腺星状细胞分离方法改良
- 2015年
- 目的 ：探讨人胰腺星状细胞的两种新分离方法。方法 ：通过酶消化-密度梯度离心法进行静止态的人正常胰腺星状细胞的分离,分离获得的细胞在含10%FBS的DMEM/F12继续培养。通过组织块外植法获得激活态的人肿瘤相关胰腺星状细胞（Ca PSCs）,分离获得的细胞在含20%FBS的DMEM/F12继续培养。结果：通过方法改良,1 g人正常胰腺组织能够获得（0.5-5.0）×106个星状细胞,细胞活率约为90%。使用新的组织块外植法后,组织块不易掉落,细胞爬出时间显著缩短,约5-10 d即可获得Ca PSCs。所有细胞贴壁良好,细胞倍增时间约为24 h。正常胰腺星状细胞（normal pancreatic stellate cells,NPSCs）培养早期形态符合典型静止态星状细胞特征,细胞为多边形或圆形,内含丰富脂滴,在荧光显微镜下可观察到320nm激发波长下的蓝绿色自发荧光。NPSCs培养晚期和Ca PSCs呈多触角状,胞内无脂滴,细胞增殖速度明显快于静止态细胞。激活态的细胞均表达α-SMA、Desmin、vimentin、GFAP等胰腺星状细胞特征性标记。结论：新的原代培养方法能够满足静止态和激活态两种状态胰腺星状细胞的分离培养,同时能够增加细胞得率、缩短分离培养时间,所获得细胞的活性和纯度符合进一步实验的要求,为胰腺星状细胞的相关研究提供了便利。
- 田蕾陆子鹏吴鹏飞蔡宝宝赵良涛钱栋徐庆成朱毅张静静杜青蒋奎荣吴峻立苗毅
- 关键词：胰腺星状细胞
