刘晓会
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院病理生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：吉林省卫生厅重点实验室科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠近端肾小管上皮细胞的原代培养和鉴定被引量：6
- 2010年
- 目的建立较好的大鼠近端肾小管上皮细胞原代培养模型。方法无菌取Wistar大鼠肾脏,取皮质剪碎,经Ⅰ型胶原酶消化和45%Percoll连续密度梯度离心进行纯化,用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基原代培养并传代,观察细胞形态并以免疫细胞化学染色及酶化学染色鉴定。结果培养4～5d细胞融合成单层,呈典型的鹅卵石样,细胞角蛋白18及碱性磷酸酶染色均呈阳性,细胞可传2～3代。结论此法可在短期获得数量较多、重复性好的近端肾小管上皮细胞,为体外研究肾小管细胞的病变提供了实验平台。
- 王光兰陈爽张丽红范颖石英爱孙华君刘晓会吴珊
- 关键词：近端肾小管上皮细胞原代培养
- 白细胞介素1β诱导肾小管上皮细胞转分化及其对细胞骨架的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:观察白细胞介素1β(IL-1β)诱导肾小管上皮细胞转分化及其对细胞骨架的调节作用。方法:选择永生化的大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E,经体外培养后以IL-1β(30μg/L)分别诱导3天及6天,观察细胞形态;RT-PCR半定量检测细胞α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和细胞骨架成分β-actin、α-tubulin的mRNA表达;免疫荧光染色观察α-SMA蛋白表达及骨架蛋白β-actin、α-tubulin在细胞内的分布及排列。结果:培养的NRK52E细胞经IL-1β体外诱导3天及6天后,细胞中α-SMA mRNA及蛋白表达水平与相应的对照组细胞比较明显增多(P<0.001),提示NRK52E上皮细胞出现了表型转化,此时培养细胞的形态也发生了改变,由典型的多边铺路石样变为成纤维细胞样,并有多个突起,细胞骨架蛋白β-actin mRNA的表达也稍有增多(P<0.05);其蛋白的分布排列也发生了改变,由胞膜转移至核周及胞浆,形成束状纤维样结构。但IL-1β诱导组细胞的另一个骨架蛋白α-tubulin mRNA表达和分布与对照组比较无明显不同。结论:IL-1β能够诱导体外培养的NRK52E细胞转分化,此过程中细胞形态变为成纤维细胞样,多突起;骨架蛋白β-actin也表达增加,并出现了骨架重建;而α-tubulin在此过程中则没有明显变化。
- 王光兰陈爽王心蕊石英爱张丽红刘晓会吴珊
- 关键词：白介素1Β转分化Α-SMAΒ-ACTINΑ-TUBULIN
- TGF-β1诱导肾小管上皮细胞转分化过程中对细胞骨架的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察TGF-β1在诱导肾小管上皮细胞转分化过程中对细胞骨架的调节作用。方法选择正常大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E,经TGF-β1(15μg/L)体外诱导3天,RT-PCR检测细胞α-平滑肌动蛋白(-αSMA)评价细胞的转分化状态,观察细胞形态,同时检测细胞骨架成分-βactin、-αtubulin mRNA的表达;免疫荧光染色观察上述细胞骨架蛋白在细胞内的排列。结果培养的NRK52E细胞经TGF-β1体外诱导3天后,细胞中-αSMA mRNA的表达水平明显增多,高于相应的对照组细胞(P<0.001),说明NRK52E上皮细胞出现了表型转化,此时培养细胞的形态也发生了改变,由典型的鹅卵石样变为成纤维细胞样,并有多个突起;细胞骨架蛋白-βactin mRNA的表达也明显增多(P<0.05);β-actin蛋白的排列也发生了改变,其在胞膜下形成的厚的板样结构消失,转而在胞浆中形成粗大的束状应力纤维,沿细胞长轴纵行排列,此外,-βactin尚在某些细胞边缘形成了片层样伪足和丝状伪足。微管成分-tαubulin mRNA的表达和分布与对照组比较无明显不同。结论TGF-β1能够诱导体外培养的NRK52E细胞转分化,在此过程中细胞形态发生了改变,骨架蛋白-βactin的表达增多并发生了重建,同时骨架蛋白-αtubulin未见明显变化。
- 王光兰王心蕊陈爽刘晓会张丽红孙华君石英爱吴珊
- 关键词：转化生长因子TGF-Β1转分化Α-SMAΒ-ACTINΑ-TUBULIN
