秦玉涛
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：北京农学院植物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 农杆菌介导的大豆萌发种子转化技术被引量：3
- 2013年
- 采用农杆菌介导的萌发种子侵染法,开展大豆遗传转化技术研究。以萌发大豆的生长点、子叶节、下胚轴3处为外植体,将带有抗除草剂草甘膦基因EPSPS及草丁膦抗性筛选基因Bar的质粒借助农杆菌介导转入大豆中,通过共培养及盆栽种植获得转化体。经过对T0代和T1代植株进行双重PCR检测以及两种除草剂的抗性鉴定得到转基因阳性株。试验结果表明,通过农杆菌介导的萌发种子转化法已将抗两种除草剂基因成功的转入大豆中,其综合转化率约为0.37%。
- 刘志敏熊鹤雯谢皓秦玉涛赵嫣然郭蓓
- 关键词：农杆菌萌发种子大豆
- 大豆GmAGL8基因的克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2015年
- 通过同源扩增从大豆中克隆得到与拟南芥AGL8基因相似的基因GmAGL8,并对该序列进行了测定。同时对GmAGL8进行了生物信息学分析,通过比对GmAGL8与桃PpMADS6和拟南芥FUL的核酸序列,相似度分别为80%和77%,三者的氨基酸序列同源性为74%。通过亲疏水性分析预测GmAGL8基因编码的蛋白为亲水性蛋白。在GmAGL8中发现与MADS基因家族相似的MEF2并找到可能对多聚体的形成有关的K-box基因。
- 李冉阳秦玉涛张倩吴婧谢皓郭蓓
- 关键词：大豆炸荚克隆生物信息学
- 大豆炸荚基因GmAGL8的转基因鉴定与功能初探被引量：1
- 2017年
- 炸荚是大豆的一种自然特征属性,是影响大豆产量的重要因素之一。本研究以前期获得的转大豆炸荚相关基因GmAGL8的T_1代植株为材料,继续繁育获得T_2和T_3代;采用PCR和RT-q PCR检测方法对转基因植株进行基因遗传稳定性和表达情况分析;并以野生型中黄10号为对照,对大豆炸荚性状进行了鉴定分析。结果表明:转基因植株阳性率T_1代为87.5%,T_2和T_3代均达到100%,说明GmAGL8基因已基本能够在转基因后代中稳定遗传。RT-q PCR检测结果显示,转基因植株中GmAGL8基因的相对表达量都明显高于非转基因植株,且各转基因植株之间表达量具有差异性。对T_1、T_2和T_3代植株炸荚率进行了统计,不同世代转基因大豆的平均炸荚率为9.09%,而非转基因大豆炸荚率为83.3%,转基因与非转基因大豆之间炸荚率存在显著差异。综上所述,GmAGL8基因已基本实现在大豆转基因后代中稳定遗传并正常表达,表型鉴定结果初步证明了GmAGL8基因与大豆炸荚性状相关。
- 秦玉涛王瑞吕金东田源黄天珑谢皓郭蓓
- 关键词：大豆炸荚转基因
- 大豆基因GmGW2的克隆与转化被引量：2
- 2015年
- GW2编码一个环型E3泛素连接酶,位于细胞质中,通过将其底物锚定到蛋白酶体进行降解,从而负调节细胞的分裂。之前有文献报道GW2位点突变可导致水稻籽粒大小的改变。根据水稻中GW2基因序列,在Gen Bank中找到与之同源的大豆基因序列Gm GW2,克隆目的片段并进行了生物信息学分析。构建转化载体p CAMBIA1300∷Gm GW2∷EYFP,并对大豆品种中黄10进行转化。利用含有重组载体的农杆菌EHA105侵染萌发24 h的中黄10幼胚。当外植体长出3片复叶后,提取基因组DNA,对报告基因EYFP进行PCR检测。得到的阳性株在激光共聚焦显微镜下观察,EYFP蛋白含量显著增加,实验结果显示目的基因已转化成功。序列分析表明GW2基因与苜蓿,鹰嘴豆中的GW2基因具有较高的同源性。
- 熊鹤雯吴志慧段思宇谢皓秦玉涛郭蓓
- 关键词：大豆系统进化树
