刘勇
- 作品数：21 被引量：79H指数：6
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律更多>>
- 干细胞与视网膜损伤修复被引量：2
- 2007年
- 近年来,利用干细胞移植治疗视网膜损伤的研究进展迅速,不断取得令人鼓舞的成果。干细胞的来源多种多样,既有视网膜源性的,如Müller细胞、睫状体细胞等;也有非视网膜来源的,如胚胎干细胞、脑源性干细胞等。本文就近年来在种子细胞来源方面的研究进展作一综述。
- 刘勇冯东福朱志安
- 关键词：干细胞分化转分化视网膜
- hBDNF-GFP基因转染神经干细胞移植对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响
- 目的探讨hBDNF-GFP基因转染神经干细胞移植后对视神经损伤大鼠视网膜BDNF表达的影响。方法1、将78只SD大鼠如下处理:6只为正常对照组,余下72只行右侧视神经夹伤,并行左侧视神经单纯暴露作为假损伤组,随机平均分为...
- 冯东福刘勇陈二涛潘栋超汪洋
- 文献传递
- 神经干细胞增殖能力的组织差异性研究被引量：13
- 2006年
- 目的从胚胎大鼠海马和上丘脑区中分离、培养神经干细胞,并进行体外增殖能力的比较。方法采用机械分离,无血清传代培养法从胚鼠海马和上丘脑获得神经干细胞。动态观察细胞生长情况,测定其体外生长曲线。使用免疫荧光法对两种来源的细胞克隆进行鉴定,激光共聚焦显微镜三维形态观察。使用扫描电镜观察神经干细胞克隆球的表面形态特征。将神经干细胞与Brdu共孵育,观察体外增殖情况。结果海马源胚胎神经干细胞的体外生长情况与上丘源干细胞基本相同,但前者的增殖速度相对较慢。两种来源的干细胞克隆球具有相似的超微结构。在相差显微镜和激光共聚焦显微镜下,两种来源的神经干细胞形态相似。与Brdu共孵育后,上丘源神经干细胞的阳性率高于海马源干细胞。从细胞生长曲线上可见两种来源的干细胞呈现了相同的增殖趋势,但生长曲线并不相同。从培养第8d起,上丘源胚胎神经细胞的活细胞记数就高于海马源干细胞。结论使用机械分离、无血清培养的方法可以获得胚胎海马源与上丘源神经干细胞,两者具有相似的形态结构,但上丘来源的神经干细胞增殖速度高于海马来源的神经干细胞。
- 冯东福卢亦成刘勇楼美清汪洋李文生
- 关键词：干细胞细胞培养细胞增殖
- 上海市严重精神障碍患者社区非自愿随访管理现状被引量：8
- 2020年
- 目的:分析上海市严重精神障碍患者社区非自愿随访管理现状,为相关部门制定精神卫生政策提供数据支持。方法:数据来自上海市精神卫生信息管理系统,截至2017年11月14日全部在管的非自愿随访患者(n=582),对非自愿随访患者的病种、未治期、病程情况采用构成比进行描述;对登记时间满1年的在册患者(n=397)的管理现状,包括规范管理率和规律服药率情况采用频数和率进行描述。结果:非自愿随访患者中,青年男性(<=40岁)、受教育程度低、离婚、居住地管理、起病急、贫困患者更易被实施社区非自愿随访;病种以精神分裂症比例最高(69.24%,403/582),未治期大于2年以上患者占比较高(40.38%,235/582),病程大于10年患者比例最高(62.89%,366/582);非自愿随访患者具有高规范管理率(98.99%,393/397)和规律服药率(84.63%,336/397)。结论:社区非自愿随访制度能够有效的对非自愿患者进行规范管理,并对患者病情变化进行及时监测,这提示非自愿随访制度可进一步推进。
- 刘勇张伟波蔡军谢斌
- 关键词：严重精神障碍病例分析
- GAL4/UAS系统在果蝇Tis11基因RNA干扰中的应用被引量：3
- 2012年
- TTP在哺乳动物许多关键基因表达的转录后水平上起调控作用,Tis11是TTP蛋白在果蝇中的同源物.目前还没有现成的可用于研究Tis11功能的基因敲除或敲低的果蝇.为了获得肌动蛋白启动子或者热激蛋白启动子驱动表达Tis11 mRNA干扰序列的具有较高干扰效率的Tis11基因干扰果蝇,将肌动蛋白启动子或者热激启动子驱动表达的GAL4果蝇品系与融合有Tis11 mRNA干扰序列的UAS品系杂交,收集同时带有GAL4基因和UAS序列的子一代果蝇.提取所收集果蝇的总RNA,将其中的mRNA逆转录成cDNA,并设计检测Tis11基因的特异性引物,然后通过Real-time PCR检测Tis11 mRNA的表达情况.结果显示所收集的能表达Tis11基因干扰序列的子一代果蝇与不能表达Tis11基因干扰序列的对照果蝇相比,其体内Tis11 mRNA的表达水平下降明显.收集的果蝇其体内所表达的干扰序列对Tis11 mRNA干扰效果显著,我们成功获得了Tis11基因的RNA干扰果蝇.
- 刘勇张梅超韦有恒马维骏
- 关键词：RNA干扰果蝇
- 人BDNF和GFP基因共表达慢病毒载体的构建及神经干细胞转染被引量：10
- 2008年
- 目的构建人脑源性神经营养因子（hBDNF）与绿色荧光蛋白（GFP）共表达的慢病毒载体并转染神经干细胞（NSCs）。方法运用基因重组技术，将hBDNF基因连接到带GFP的慢病毒表达载体pWPXL-MOD（pWPXL-GFP-IRES-GFP）中，构建慢病毒载体pWPXL-hBDNF-IRES-GFP，MluⅠ、EcoRⅠ双酶切反应及测序分析加以鉴定。将慢病毒载体主体质粒pWPXL-hBDNF-IRES-GFP、包装质粒HELPER和包膜质粒VSVG共转染293T细胞，包装慢病毒载体并测定滴度。将构建的pWPXL-hBDNF-IRES-GFP感染NSCs，并对感染细胞进行鉴定及分化活性检测。结果构建的慢病毒载体pWPXL-hBDNF-IRES-EGFP经MluⅠ和EcoRⅠ双酶切反应鉴定正确；测序分析证实与Genbank报道的hBDNF基因序列完全一致。三质粒共转染293T细胞后，荧光显微镜下可见大量绿色荧光。包装后慢病毒测定滴度为0．1×10^9～1×10^9 TU／mL。pWPXL-hBDNF-IRES-GFP感染后的NSCs表达绿色荧光，可在体外扩增，NSCs细胞标志物巢蛋白表达阳性；细胞贴壁后可分化为神经元和胶质细胞。结论成功构建hBDNF与GFP基因共表达的慢病毒载体并转染NSCs，转染后细胞仍能保持已知的原有生物学特性及良好的分化活性。
- 刘勇陈二涛冯东福刘天津汪洋潘栋超
- 关键词：转染慢病毒
- 人脑源性神经营养因子基因转染神经干细胞治疗大鼠视神经损伤被引量：13
- 2009年
- 目的探讨转染人脑源性神经营养因子（brain—derived neurotrophic factor，hBDNF）-绿色荧光蛋白（GFP）基因神经干细胞体内移植后在视神经损伤大鼠视网膜内的存活、迁移和分化情况，以及其对视神经损伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）存活的影响。方法（1）取30只SD大鼠制作右眼视神经部分损伤模型，采用随机数字表法随机均分成两组，分别于玻璃体腔内移植GFP基因转染神经干细胞（GFP—NSCs）、hBDNF和GFP双基因转染神经干细胞（hBDNF—GFP—NSCs）。8周后处死大鼠，取右眼眼球做冰冻切片，然后分别用胸腺细胞表面糖蛋白（Thy1．1）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、β-微管蛋白（β-tubulin）、视紫红质（rhodopsin）抗体进行免疫标记，观察移植细胞的迁移分化情况。（2）取30只SD大鼠制作右眼视神经部分损伤模型，随机均分为三组：损伤组、GFP组、BDNF组。损伤组大鼠玻璃体腔内注射等渗盐水，而GFP组、BDNF组则分别于玻璃体腔内移植GFP—NSCs和hBDNF—GFP—NSCs，每只眼球玻璃体腔内移植5×10^4个细胞。8周后处死大鼠，取右侧眼球视网膜铺片，行Thy1．1免疫荧光染色后，荧光显微镜下观察计数RGCs细胞数量。结果（1）移植后，两组细胞均可在视网膜内存活、迁移，并产生细胞分化，两组细胞均可以分化成胶质细胞、神经元。移植hBDNF—GFP—NSCs组少量细胞分化为节细胞样细胞（Thy1．1^＋），而GFP—NSCs组未发现有分化为Thy1．1阳性细胞。（2）视网膜铺片Thy1．1免疫荧光染色后计数发现，移植hBDNF—GFP—NSCs的视网膜神经节细胞为（1461±154）个／mm^2，明显多于移植GFP—NSCs组（1244±187）个／mm^2（P〈0．05）。结论移植后的hBDNF—GFP—NSCs可以分化为神经元和神经胶质细胞，少数可分化为视网膜神经节样细胞。hBDNF—GFP—NSCs移植可以增加RGCs的存活数�
- 刘勇陈二涛冯东福潘栋超汪洋
- 关键词：干细胞基因转染
- 基于损伤信号的神经前体细胞靶向性迁移被引量：1
- 2008年
- 成体哺乳动物的中枢神经系统（central nervous system，CNS）内存在若干个神经发生区域：室管膜下区（subventricular zone，SVZ）、海马齿状回的颗粒下层（subgranular zone，SGZ）和脊髓中央管侧壁的室管膜带。大量研究表明，CNS损伤后这些区域内细胞增殖活跃，部分神经前体细胞（neural precursor cells，NPC）可以定向迁移至损伤灶周围，对损伤组织进行修复。
- 陈二涛刘勇冯东福
- 关键词：中枢神经系统神经前体细胞CNS损伤室管膜下区海马齿状回
- 组织-细胞共培养诱导神经干细胞定向分化的研究被引量：8
- 2008年
- 目的探讨大鼠上丘组织-神经干细胞（NSCs）共培养对细胞分化的影响。方法采用元血清选择培养的方法获得上丘源NSCs，单细胞克隆传代培养并进行形态学观察。使用组织-细胞共培养系统将不同年龄大鼠上丘组织与NSCs共培养，观察NSCs分化过程。对分化细胞进行鉴定，并与NSCs的自然分化过程进行比较。结果从胚鼠上丘中获得的细胞呈球形悬浮生长，可形成单细胞克隆，具有多向分化能力，经免疫荧光鉴定证实为NSCs。新生大鼠上丘组织与NSCs共培养可以促进NSCs的分化，并诱导分化出Thy1.1阳性的视网膜神经节细胞，阳性细胞比率为19．97％（273／1094）。而神NSCs的自然分化或与成年大鼠上丘组织共培养后均未发现Thy1.1阳性细胞。结论从胚胎大鼠上丘可以分离培养出NSCs，与新生大鼠的上丘组织共培养可以诱导NSCs分化为视网膜神经节细胞。
- 冯东福卢亦成楼美清刘勇陈二涛汪洋
- 关键词：干细胞视网膜神经节细胞分化
- 强制社区治疗的国际经验及对我国的启示被引量：3
- 2017年
- 本文通过对国际上流行的强制社区治疗(CCT)施行现状、制度设计及有效性进行分析,建议借鉴其成功的经验,探索建立适合我国精神卫生需求和资源条件的强制社区治疗制度,以提高特定精神障碍患者的治疗依从性,降低精神专科医院压床率及减少精神障碍患者肇事肇祸发生率。
- 刘勇谢斌
