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翟清华
作品数:
2
被引量:4
H指数:2
供职机构:
西北农林科技大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
农业科学
生物学
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合作作者
杨淑慎
西北农林科技大学生命科学学院
郭子平
西北农林科技大学生命科学学院
曾令锋
西北农林科技大学生命科学学院
邓西平
西北农林科技大学资源环境学院黄...
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原核表达
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作者
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杨淑慎
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邓西平
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曾令锋
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1篇
翟清华
传媒
1篇
华北农学报
年份
1篇
2016
共
2
条 记 录,以下是 1-1
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被引量排序
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小麦TaGAPC定点突变体基因载体构建及其原核表达
被引量:2
2016年
为了研究催化活性半胱氨酸Cys154、Cys158残基对小麦细胞质甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Ta GAPC)蛋白酶活性的影响,利用重叠延伸PCR法分别将这2个位点的半胱氨酸突变成丝氨酸,并分别连入p ET28a(+)原核表达载体。在25℃条件下,Ta GAPC及其定点基因Ta Cys154S/Ta Cys158S经0.25 mmol/L IPTG诱导后高效表达,SDS-PAGE电泳检测结果显示,目标重组蛋白均为可溶性且大小约为40 k Da,与预测结果一致。在此基础上,经超声波破菌及镍柱纯化获得3种纯化重组蛋白。这为后续Ta GAPC及其定点突变体蛋白酶活性测定及活性位点分析提供试验材料。
郭子平
翟清华
曾令锋
邓西平
杨淑慎
关键词:
GAPC
重叠延伸PCR
定点突变
原核表达
蛋白纯化
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