- 顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶(calpain)表达的影响,探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。方法取出生后3d的昆明小鼠300只(600耳),分离出耳蜗基底膜600条,体外培养24h后,随机分为对照组和4、8、16μg/ml顺铂组,每组150条;对照组加入2ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2ml含不同浓度顺铂(4、8、16μg/ml)的新鲜培养基,再继续培养24h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用免疫荧光染色和免疫印迹(Western blot)技术检测calpain 1(μ-calpain)和calpain 2(m-calpain)在耳蜗毛细胞的表达。结果 4、8、16μg/ml顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为15.63%±0.20%、38.40%±2.64%和64.24%±0.05%,均高于对照组(5.55%±0.12%),呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组μ-calpain和m-calpain的表达均较对照组明显增强(P<0.01),且m-calpain的表达随顺铂浓度的增高而明显增强(P<0.01)。结论顺铂可通过calpain通路诱导小鼠耳蜗毛细胞凋亡,从而发挥毒性效应。
- 张立伟刘芳芳于利王爱梅
- 关键词：顺铂耳蜗毛细胞钙蛋白酶小鼠
