焦锋
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 供职机构：南方医科大学基础医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人Snail基因RNAi慢病毒载体对鼻咽癌5-8F细胞增殖和侵袭的影响被引量：5
- 2009年
- 目的构建人Snail基因慢病毒干扰载体及观察干扰前后对鼻咽癌5-8F细胞增殖和侵袭的影响。方法设计Snail基因特异性RNAi靶序列,克隆至经双酶切后的plVTHM线性化载体,测序鉴定正确后,用病毒上清感染鼻咽癌细胞5-8F,流式细胞仪分选获得稳定干扰Snail基因的细胞亚系。荧光定量PCR检测mRNA表达情况;MTT法和体外侵袭实验分别测定对细胞增殖和侵袭的影响。结果plVTHM-siSnail慢病毒干扰载体构建正确。荧光定量PCR结果表明分选后的细胞Snail mRNA水平表达显著降低。干扰后的细胞增殖减慢,穿透基膜的细胞数量减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论plVTHM-siSnail表达质粒可显著下调Snail基因在5-8F中的表达,在一定程度上抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。
- 陈丽刘求真邱际华焦锋姚开泰
- 关键词：SNAILRNA干扰鼻咽癌增殖
- 鼻咽癌细胞株侧群细胞染色条件的优化及其表面标记物的测定被引量：2
- 2010年
- 目的探讨鼻咽癌细胞株侧群细胞所需荧光染料Hoechst33342最佳的孵育时间和浓度;研究细胞密度对侧群细胞比例的影响;测定其表面标记物CD133和ABCG2蛋白的表达。方法荧光染料Hoechst33342孵育细胞,选择不同的时间(30、60、90、120、150、180min)及不同的浓度(3、4、5、6、7、8mg/L),用流式细胞仪检测,倒置荧光显微镜观察选择合适的孵育时间和浓度。选取不同生长密度(70%、100%)的细胞,流式细胞仪检测侧群细胞比例的变化。荧光抗体CD133和ABCG2共孵育Hoechst33342,流式细胞仪测定细胞表面标记物CD133和ABCG2蛋白的表达。结果Hoechst33342孵育时间为70min,侧群细胞染色效果较佳。不同的鼻咽癌细胞株,合适孵育终浓度不同,如CNE2为6mg/L,而CNE1为2mg/L。另外,侧群细胞的比例呈生长密度依赖性。CD133蛋白总含量恒定在0.1%～0.2%,侧群细胞和主群细胞表达量没有显著差异,CD133并不富集于侧群细胞中。而侧群细胞ABCG2蛋白较主群细胞优势表达,比例达80%以上。结论鼻咽癌细胞株侧群细胞最佳的荧光染料染色时间为70min,不同细胞株孵育终浓度不同。侧群细胞的比例呈密度依赖,与ABCG2密切相关。
- 焦锋邱际华张千兵姚开泰刘求真
- 关键词：侧群细胞肿瘤干细胞HOECHST33342
- CXCR4／SDF-1对鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响被引量：11
- 2009年
- 目的观察鼻咽癌不同恶性程度的细胞中趋化因子受体CXCR4的表达,检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的增殖作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响。方法以鼻咽癌成瘤高转移细胞株5-8F及成瘤不转移细胞株6-10B为研究对象,采用Westernblot免疫印迹法检测鼻咽癌细胞株CXCR4蛋白的表达情况,SDF-1及CXCR4阻断剂AMD3100作用于两种细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力,体外迁徙实验检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的趋化作用。结果5-8F细胞株CXCR4蛋白的表达明显高于6-10B细胞株;SDF-1能明显增强5-8F细胞增殖与迁移能力,CXCR4阻断剂AMD3100作用后,5-8F细胞增殖与迁移能力明显降低;SDF-1对6-10B细胞的迁移及增殖能力无明显影响。结论CXCR4/SDF-1生物学轴与鼻咽癌细胞株的增殖与迁移有一定的关系,AMD3100可明显抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移能力。
- 邱际华刘求真陈丽焦锋姚开泰
- 关键词：鼻咽癌增殖迁移CXCR4SDF-1
