刘乐平
- 作品数：7 被引量：30H指数：3
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金温州市科技计划项目浙江省自然科学基金更多>>
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- Wnt5a参与的星形胶质细胞合成神经营养因子下降导致亚临床型肝性脑病意识损伤的机制研究
- 目的：Wnt信号对神经保护和突触可塑性起着关键的作用.我们推测,Wnt信号可能调节星形胶质细胞神经营养因子(NTs)的产生.此前我们证明了多巴胺(DA)超负荷是大鼠肝性脑病的重要机制.方法：我们采用免疫印迹及荧光荧光双染...
- 丁赛丹刘乐平徐竹杨建静梁勇诸葛启钏
- 关键词：轻微型肝性脑病WNT5ANO-CGMP
- 下瘀血汤对肝硬化大鼠肝组织CD68和CD163蛋白表达的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨下瘀血汤抗肝硬化的作用机制。方法 SD雄性大鼠ip给予硫代乙酰胺200 mg·kg-1每周2次,连续8周,制备大鼠肝硬化模型。造模成功后,模型大鼠于第9周首日ig给药下瘀血汤0.313,0.626和1.252 g·kg-1,每天1次,连续3周。于第11周末处死大鼠,取肝组织,用Western蛋白质印迹法和免疫组化法测定肝组织CD68和CD163蛋白表达;用激光共聚焦方法检测肝组织CD68+TUNEL+和CD163+TUNEL+双阳性细胞,观察ED1和ED2肝巨噬细胞凋亡。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性增强(P<0.01),血清总胆红素(TBil)水平升高(P<0.01),血清白蛋白(Alb)水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,下瘀血汤0.626和1.252 g·kg-1组大鼠血清GPT和GOT活性以及Tbil水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),Alb水平显著升高(P<0.01)。Western蛋白质印迹和免疫组化实验结果显示,与正常对照组比较,模型组CD68表达升高(P<0.01),CD163表达明显降低(P<0.01);与模型组相比,下瘀血汤0.626和1.252 g·kg-1组CD68表达明显降低(P<0.01),CD163表达显著升高(P<0.01)。激光共聚焦实验结果表明,与正常对照组比较,模型组大鼠CD68+TUNEL+双阳性细胞显著增加(P<0.05);与模型组比较,下瘀血汤0.626和1.252 g·kg-1组CD68+TUNEL+双阳性细胞进一步增加(P<0.05,P<0.01);所有组别均未检测到CD163+TUNEL+双阳性细胞。结论下瘀血汤对肝硬化大鼠肝功能具有改善作用,可抑制肝硬化大鼠肝组织CD68表达,促进CD163表达。
- 刘乐平陆芩王晓斌谢洁雅丁赛丹
- 关键词：下瘀血汤肝硬化CD68肝巨噬细胞
- M1/M2型巨噬细胞极化参与肾组织炎症损伤和修复进程被引量：15
- 2017年
- 目的:研究M1/M2型巨噬细胞在肾组织炎症损伤和修复进程中的分布趋势及作用。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为缺血再灌注损伤(IRI)组和单侧输尿管梗阻(UUO)组两部分。IRI组分为假手术(sham)组及术后0、6、24和72 h组;UUO组分为sham组及梗阻3、7和14 d组;每个时相5只大鼠。全自动生化分析仪检测血肌酐和尿素氮水平;HE与免疫组织化学染色分别观察肾组织损伤及CD68的表达;流式细胞术检测M1(CD68+、F4/80+和CD16/32+)和M2(CD68+、F4/80+和CD206+)型巨噬细胞的分布;ELISA检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:IRI早期,肾组织损伤程度随再灌时间延长而加剧,并与CD68+巨噬细胞浸润呈一致性变化趋势;至24 h,组织损伤与巨噬细胞浸润最为严重;但之后随时间延长,损伤和巨噬细胞浸润反而减轻。UUO组中,肾损伤随梗阻时间延长而加剧,14d时纤维化明显;而巨噬细胞浸润第7天最为严重,之后又有减轻。流式细胞术分析显示IRI和UUO损伤早期浸润的巨噬细胞以M1型为主,i NOS表达较高;IRI和UUO损伤后期巨噬细胞均向M2型极化,Arg-1水平明显增加;巨噬细胞这种变化趋势与肾组织在不同时间节点出现损伤与修复表征存在明显相关性。深入分析发现,M1型巨噬细胞可通过诱导TNF-α高表达促进早期炎症损伤,M2型巨噬细胞通过提高TGF-β1水平促进后期纤维增生性修复。结论:UUO和IRI过程中均存在巨噬细胞极化:M1型巨噬细胞可诱导早期损伤,M2型巨噬细胞则参与损伤后期的纤维性修复。M1和M2型巨噬细胞在损伤修复过程中的极化特征可为临床治疗提供指导。
- 吴莲凤陆红洪炜龙张行刘乐平白永恒
- 关键词：输尿管梗阻缺血再灌注损伤M2型巨噬细胞极化
- 多巴胺通过mTOR-EAAT2通路影响星形胶质细胞谷氨酸摄取能力被引量：2
- 2017年
- 目的:研究多巴胺(dopamine,DA)对星形胶质细胞谷氨酸(glutamate,Glu)摄取能力的影响,以及DA通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)-兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)信号通路对星形胶质细胞Glu摄取能力的影响。方法:采用Amplex Red谷氨酸测定试剂盒检测经过干预的原代皮层星形胶质细胞对Glu摄取含量的变化,RT-q PCR、Western blot和免疫荧光染色等检测EAAT2和m TOR mRNA和蛋白质相对表达量,m TOR拮抗剂雷帕霉素或m TOR兴奋剂MHY1485干预在DA中共培养的星形胶质细胞,检测m TOR和EAAT2的表达情况,以及培养上清液Glu的含量。结果:DA干预的原代星形胶质细胞中m TOR表达下调,EAAT2表达下调,培养上清液Glu水平上升;雷帕霉素干预后,EAAT2表达下调,培养上清液中Glu的含量增加;MHY1485干预后,EAAT2表达上调,培养上清液中Glu的含量下降。结论:DA通过与星形胶质细胞m TOR-EAAT2通路相互作用,减弱星形胶质细胞摄取Glu的能力,引起细胞外Glu蓄积,最终损伤星形胶质细胞的功能。
- 温芳芳徐竹刘乐平杨建静丁赛丹
- 关键词：多巴胺谷氨酸星形胶质细胞
- Wnt5a参与的星形胶质细胞合成神经营养因子下降导致亚临床型肝性脑病意识损伤的机制研究
- 目的:Wnt信号对神经保护和突触可塑性起着关键的作用。我们推测,Wnt信号可能调节星形胶质细胞神经营养因子(NTs)的产生。此前我们证明了多巴胺(DA)超负荷是大鼠肝性脑病的重要机制。方法:我们采用免疫印迹及荧光荧光双染...
- 丁赛丹刘乐平徐竹杨建静梁勇诸葛启钏
- 关键词：轻微型肝性脑病WNT5ANO-CGMP
- 文献传递
- 多巴胺对轻微型肝性脑病大鼠脑内谷氨酸摄取能力的影响及其发病机制被引量：4
- 2018年
- 目的研究多巴胺（DA）对神经细胞摄取谷氨酸（Glu）能力的影响，以及DA通过通路对轻微型肝性脑病（MHE）大鼠认知障碍的影响。方法45只SD大鼠随机分为对照组，MHE模型组和DA干预模型组∞=15），其中MHE模型组采用硫代乙酰胺（TAA）腹腔注射、DA干预组采用脑室内注射DA、对照组大鼠腹腔注射等渗盐水，每周2次，共8周；采用脑活体微透析检测MHE大鼠和DA干预大鼠的脑内Glu含量变化，实时定量PCR和免疫印迹分析等检测痕量胺相关受体1（TAARl）、兴奋性氨基酸转运子2（EAAT2）基因mRNA和蛋白质相对表达量；TAARl微小RNA（siRNA）和TAARl质粒侧脑室注射MHE大鼠和DA干预大鼠后检测EAAT2表达情况和细胞外Glu水平变化。计量资料是正态分布且满足方差齐性检验，多组问比较采用单因素方差分析；否则多组间比较采用非参数检验。等级资料多组间比较，采用非参数检验。结果MHE大鼠与对照组相比，DA含量在肝组织[（4．90±0．13）ng／g对比（1．20±0．13）rig／g]、血清[（16．32±1．01）pmol／ml对比（5．50±0．82）pmol／m1]和脑组织[（732．45±78．85）ng／g对比（387．00±23．36）ng／g】均显著升高，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。DA干预大鼠在脑室内注射DA后，在40～120min之间细胞外Glu含量显著升高。在MHE大鼠和DA干预大鼠组，TAARl蛋白相对表达量分别为3．72±0．50、4．18±0．43，与对照组的0．96±0．40相比，显著增高，p值均〈0．05，差异均有统计学意义。MHE大鼠和DA干预组大鼠的EAAT2蛋白相对表达水平与对照组相比，显著下降（0．46±0．16对比0．92±0．11，P=0．013；0．51±0．20对比0．92±0．11，p=0．036），差异均有统计学意义。MHE大鼠和DA干预大鼠经TAARlsiRNA干预后脑组织中EAAT2蛋白相对表达量与空载体处理模型组相比上调（0．86±0．142对比0．56±O．060，p=0．028；0
- 温芳芳徐竹刘乐平杨建静丁赛丹
- 关键词：肝性脑病多巴胺谷氨酸
- TAAR1-EAAT2通路抑制乳鼠星形胶质细胞的谷氨酸摄取能力被引量：3
- 2017年
- 目的研究多巴胺(DA)对原代星形胶质细胞谷氨酸(Glu)摄取能力的影响,以及DA通过痕量胺相关受体1-兴奋性氨基酸转运体2(TAAR1-EAAT2)信号通路对星形胶质细胞Glu摄取能力的影响。方法采用Amplex Red谷氨酸测定试剂盒测定经过DA处理的原代星形胶质细胞对Glu摄取含量的变化,反转录PCR检测TAAR1、EAAT2 mRNA水平,Western blot法检测TAAR1、EAAT2蛋白水平;采用TAAR1小干扰RNA(siRNA)和TAAR1质粒转染DA处理后的原代星形胶质细胞,Western blot法检测EAAT2表达水平并采用Amplex Red谷氨酸测定试剂盒测定培养上清液Glu含量。结果 DA处理的原代星形胶质细胞EAAT2水平降低,TAAR1水平增加,培养上清液Glu含量上升。DA处理经TAAR1 siRNA转染后的原代星形胶质细胞,上调EAAT2水平,培养上清液中Glu含量减少;DA处理经TAAR1质粒转染后的原代星形胶质细胞,则EAAT2降低,培养上清液中Glu的含量增加。结论 DA通过影响星形胶质细胞TAAR1-EAAT2信号通路,减弱细胞Glu摄取能力,引起细胞外Glu蓄积,从而损伤星形胶质细胞的功能。
- 温芳芳刘乐平徐竹杨建静丁赛丹
- 关键词：谷氨酸星形胶质细胞
