宋宏梅
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学生命科学学院四川省分子生物学及生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 利用报告基因表达系统快速鉴定骨诱导活性材料被引量：1
- 2011年
- 通过构建真核表达质粒,使增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Pro-tein,EGFP)报告基因的表达受骨形成相关转录因子Cbfa1基因启动子的调控,再用该质粒转染大鼠成肌细胞L6,建立稳定细胞株.在成骨培养基中诱导培养后,该细胞株呈现较明显的绿色荧光,表明细胞在经诱导的成骨分化过程中,Cbfa1基因表达增强,Cbfa1启动子驱动了EGFP的表达.将该细胞株接种到有较强骨诱导活性的羟基磷灰石/磷酸三钙(hydroxyapa-tite-tricalcium phosphate,HA/TCP)陶瓷支架材料的表面,可观察到细胞中绿色荧光的增强;而接种到不具备骨诱导活性的胶原海绵(Collagen sponge)材料表面的细胞,未观察到绿色荧光的变化.细胞绿色荧光的增强与材料的骨诱导活性相一致,表明该细胞株可用来快速鉴定生物材料的骨诱导活性.
- 李彩侠宋宏梅王刚张义正李珉童英
- 关键词：骨诱导增强型绿色荧光蛋白启动子报告基因生物材料
- Sox9基因转染诱导L6大鼠成肌细胞向软骨细胞表型分化的研究
- 2011年
- 利用脂质体转染法,将真核表达质粒pcDNA3.1-Sox9导入L6细胞中.通过细胞增殖检测、细胞形态学观察、标志基因表达分析和甲苯胺蓝染色等方法分析Sox9基因转染对L6细胞增殖和向成软骨方向分化的诱导作用.结果表明,Sox9基因转染对L6细胞的增殖能力没有影响,但能明显抑制L6细胞相互融合形成肌管.和对照相比,Sox9基因转染后,细胞成肌分化标志基因Myf5的表达受到明显抑制,而成软骨分化标志基因Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)和蛋白聚糖(Aggrecan,Agg)的表达显著提高.转染后14 d,Sox9基因转染的细胞可见甲苯胺蓝染色阳性的软骨细胞样结节,而对照组则鲜见类似结构.上述结果表明,Sox9基因转染可以抑制L6细胞向成熟肌细胞分化,并促进其向软骨表型分化.
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- 关键词：SOX9软骨细胞分化基因转染
