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大肠杆菌Nissle 1917株鞭毛展示6His标签的构建及相关生物学特性分析被引量：1: 2016年; 为探索大肠杆菌Nissle 1917株(EcN)鞭毛展示的应用,本研究以重组质粒p UC18-fli C为模板,反向PCR产物经DpnⅠ、Exnase^(TM)Ⅱ重组环化,将6His标签基因分别插入无质粒大肠杆菌Nissle 1917(EcNcured of its two cryptic plasmids p MUT1和p MUT2;EcNc)fli C高变区774 bp^775 bp和792 bp^811 bp之间,构建嵌合鞭毛基因片段fliC01和fliC02。分别将其克隆于自杀性载体pRE112中,构建重组质粒pRE112-fliC01和pRE112-fliC02,并分别转化至EcNc中。通过一次重组和二次重组将嵌合鞭毛基因整合于EcNc基因组中,构建无抗性筛选的重组菌株EcNc fliC01和EcNc fliC02。对重组菌株进行生长状况、鞭毛形成以及体外细胞黏附试验和小鼠体内定植试验检测,结果表明EcNc fliC01和EcNc fliC02的生长未受影响,表达的嵌合鞭毛能够被H1多抗或His-Tag单克隆抗体识别并组装形成鞭毛丝;重组菌对IPEC-J2细胞的黏附能力及小鼠肠道定植能力与亲本株EcNc相比无显著性差异。本实验结果为进一步研究EcNc鞭毛展示技术应用于活疫苗研制奠定了基础。; 杨颖区炳明杨溢张倩杨玮枫夏芃芃朱国强; 关键词：鞭毛蛋白

沙门氏菌PEG菌毛研究进展被引量：6: 2017年; 菌毛是细菌表面一种特殊的细丝状结构，其顶端的粘附素蛋白可以结合宿主的特定组织细胞，是细菌黏附、定植致病的关键蛋白。同时，菌毛具有良好的免疫原性，在疫苗的研制和诊断试剂的研发等领域具有重要的意义。此外，某些菌毛存在对细胞的侵袭和促进生物被膜形成能力，因此菌毛研究领域一直是研究的热点。; 杨玮枫朱春红李芙蓉谢静陆广富孟霞朱国强; 关键词：菌毛沙门氏菌 PEG 组织细胞细菌黏附诊断试剂

大肠杆菌Nissle 1917隐秘质粒消除方法的建立被引量：2: 2016年; 质粒消除旨在获得无质粒菌株,是对益生菌进行遗传改造所需的一项重要技术。本试验建立在质粒不相容性的基础上,引入自杀性载体pRE112作为辅助工具,使用分子生物学方法构建重组自杀质粒pMUT1-pRE112和pMUT2-pRE112,将其分别导入携带2个大隐秘质粒pMUT1和pMUT2的益生菌大肠杆菌Nissle 1917(Escherichia coli Nissle 1917,EcN),利用重组自杀质粒去除EcN内原有隐秘质粒并在含有10%蔗糖的LB培养基上实施自杀质粒自身消除。结果试验成功获得EcN无质粒克隆菌株(Escherichia coli Nissle 1917cured of its two cryptic plasmids pMUT1and pMUT2,EcNc),为优质益生菌EcN更好的潜在应用研究奠定基础。; 杨颖区炳明朱军杨溢张倩杨玮枫夏芃芃朱国强; 关键词：质粒消除

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杨玮枫