王婷
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- EPO对窒息诱导新生大鼠脑损伤和CoCl_(2)诱导人脑胶质瘤细胞系U251缺氧的改善作用
- 2023年
- 目的观察促红细胞生成素(EPO)对窒息诱导新生大鼠脑损伤和CoCl_(2)诱导人脑胶质瘤细胞系U251缺氧的改善作用。方法①7日龄SPF级新生Wistar大鼠随机分为对照组、窒息组、EPO组,每组22只。窒息组和EPO组新生大鼠采用常压窒息法构建脑损伤模型。EPO组脑损伤模型大鼠腹腔注射5000 IU/(kg•d)的EPO,连续注射14 d;窒息组脑损伤模型大鼠注射等体积的生理盐水,连续注射14 d;对照组不注射生理盐水和EPO。每组取10只大鼠,采用Morris水迷宫实验观察各组新生大鼠空间记忆能力,包括逃避潜伏期、上台前游泳路程、90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离和有效区域内滞留时间。采用旷场实验观察各组新生大鼠自主运动能力,包括运动总路程、中央区域路程和平均速度。每组取6只大鼠,连续干预第3天和第7天时断头处死,取大鼠大脑称重并计算脑组织含水量,采用速率法检测血清脑损伤标志物乳酸脱氢酶(LDH)。②人脑胶质瘤细胞系U251分为空白对照组、CoCl_(2)组、EPO组,CoCl_(2)组加入CoCl_(2)制备缺氧模型,EPO组加入CoCl_(2)和EPO,空白对照组加入等量培养液,继续培养24 h。采用CCK-8法测算各组细胞存活率,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用比色法测算各组细胞上清液LDH。结果①与对照组比较,窒息组新生大鼠的逃避潜伏期、上台前游泳路程、干预第3天和第7天脑组织含水量及血清LDH水平显著升高(P均<0.05);与窒息组相比,EPO组新生大鼠的逃避潜伏期、上台前游泳路程、干预第3天和第7天脑组织含水量及血清LDH水平显著降低(P均<0.05)。与对照组比较,窒息组新生大鼠90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离、有效区域内滞留时间、运动总路程、中央区域路程、平�
- 呼格吉乐王婷苏慧敏
- 关键词：促红细胞生成素缺氧性脑损伤新生儿脑损伤
- 牛奶中乳腺上皮细胞的分离培养及鉴定被引量：7
- 2013年
- 旨在建立简便、经济、纯净的牛乳腺上皮细胞的体外培养方法,并对所培养细胞进行鉴定。以新鲜牛奶为材料,离心收集细胞进行原代培养并传代,通过测定生长曲线、乳腺上皮细胞骨架蛋白-角蛋白8和18、β-酪蛋白、核型等对所培养细胞进行鉴定,以确定其为乳腺上皮细胞。离心收集到的细胞原代培养3 d后形成多个单克隆,细胞呈典型的铺路石状,同时伴随少量的吞噬细胞,继续培养至单克隆汇合时,细胞表层产生大小不等的乳滴,吞噬细胞大多转移到乳滴中,传代后,得到纯净的乳腺上皮细胞,吞噬细胞随传代而消失;细胞生长曲线呈"S"型,RT-PCR法扩增到了乳腺上皮细胞的骨架蛋白8、18以及β-酪蛋白,细胞免疫组化检测到了细胞角蛋白8,核型为29对端着丝粒常染色体,1对近端着丝粒性染色体。通过以上试验证明,乳汁分离法可以培养纯净的、具有正常分裂增生能力的牛乳腺上皮细胞,建立了乳腺上皮细胞的体外培养模型。
- 崔新洁王婷刘秉春陶林王潇
- 关键词：乳汁牛乳腺上皮细胞细胞骨架蛋白泌乳
- 牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达
- 2014年
- 【目的】在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞,并构建牛白细胞介素-17(bIL-17)基因真核表达质粒,观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达.【方法】提取牛脾脏细胞总RNA,通过RT-PCR扩增bIL-17,将bIL-17连入pMD19-T进行测序,测序成功后将bIL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上,构建真核表达质粒pEGFP-N3-bIL-17.用脂质体法将pEGFP-N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达,RT-PCR检测bIL-17基因在细胞内的转录,定量ELISA检测bIL-17蛋白在细胞内的表达情况.【结果和结论】成功构建具有绿色荧光和新霉素抗性的双选择标记的牛白细胞介素-17真核表达载体,并可在牛乳腺上皮细胞成功表达.
- 王婷崔新洁刘秉春陶琳胡庆亮修磊王潇
- 关键词：牛乳腺上皮细胞转染
