胡晓红
- 作品数：3 被引量：63H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- PCR及Real-time PCR评价细菌DNA提取方法被引量：42
- 2008年
- 目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度。结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100+NP40法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度。结论:Chelex-100+NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR。
- 胡晓红彭惠民刘昕黄正根袁科
- 关键词：DNA提取PCR实时荧光定量PCR
- 应用于PCR及实时荧光定量PCR的细菌DNA提取方法被引量：14
- 2006年
- 目的建立特异灵敏的适应于PCR及实时荧光定量PCR的细菌DNA提取方法。方法于细菌样本离心所得沉淀中加入提取液(25%Chelex-100,0·5%NP40,TE配制,pH=9·0);56℃孵育30min;100℃水浴10min;离心后所得上清即为DNA。电泳、PCR及Real-time PCR扩增评价该方法的特异性及灵敏度。结果本方法所提细菌DNA电泳条带清晰,未见假阳性,D(260)/D(280)=(1·79±0·03);PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,灵敏度达101/ml细菌浓度。结论本研究细菌DNA提取方法特异灵敏,适应于PCR及Real-time PCR。
- 胡晓红刘昕黄正根彭惠民袁科程英高云
- 关键词：PCR实时荧光定量PCRDNA提取
- 禽流感病毒检测技术研究进展被引量：7
- 2006年
- 胡晓红彭惠民刘昕
- 关键词：禽流感病毒
