陈金桃
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组日本血吸虫亲环素B的克隆、表达及免疫分析
- 2017年
- 目的克隆、表达日本血吸虫亲环素B(SjCyPB)基因,鉴定并分析重组蛋白的免疫性。方法根据Genbank中日本血吸虫序列设计一对特异性引物,以日本血吸虫cDNA为模板扩增SjCyPB基因,酶切后连接到表达载体pET28,构建pET28a(+)-SjCyPB重组质粒,转化入感受态大肠杆菌BL21/DE3后对质粒进行双酶切和测序鉴定。IPTG诱导表达后,经亲和层析纯化重组蛋白。采用Western Blotting分析鉴定重组蛋白的抗原性。将纯化的重组蛋白免疫大鼠,获得免疫血清,ELISA检测抗SjCyPB特异性抗体滴度。结果构建的pET28a(+)-SjCyPB重组质粒经双酶切和测序鉴定证实SjCyPB基因成功连接到pET28a(+)质粒中。经原核表达后获得纯化的重组蛋白,Western Blotting结果显示,该重组蛋白可与感染日本血吸虫的兔血清结合形成明显的条带。采用ELISA检测重组蛋白免疫后大鼠免疫血清的特异性IgG抗体滴度为1∶51 200。结论成功克隆了日本血吸虫CyPB基因,并获得大量纯化的重组蛋白,重组SjCyPB具有免疫原性和抗原性。
- 陈金桃胡旭初
- 关键词：日本血吸虫原核表达
- 华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶的表达定位及其酶活性的研究被引量：3
- 2014年
- 目的克隆和表达有酶活性的华支睾吸虫硫氧还蛋白过氧化物酶（CsTPx）,并进行组织定位研究,为进一步研究其功能奠定基础。方法利用生物信息学方法从华支睾吸虫基因组文库中识别硫氧还蛋白过氧化物酶（TPx）基因,并对蛋白的结构特征和相关生物学和免疫学功能进行预测。从华支睾吸虫成虫cDNA中扩增目的基因,克隆到原核表达载体pET-30a（＋）中,进行蛋白纯化,免疫印迹鉴定、组织定位及其酶活性的检测。结果华支睾吸虫TPx基因全长2 175 bp,有一大一小的两个内含子,其编码区序列长度为636 bp,编码212个氨基酸;该蛋白第1~17位氨基酸为其信号肽序列,第51-74位氨基酸为跨膜区,属于经典的2-Cys过氧化物还原酶。重组蛋白可被感染了华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该蛋白定位于成虫的皮层、肠支、卵黄腺、虫卵和囊蚴的体壁中。酶活性检测结果表明,在一定范围内,CsTPx还原H2O2呈剂量和时间依赖性。抗体对酶活性有影响,在合适的抗体水平可以促进酶活性。结论 CsTPx可在大肠杆菌中进行功能性表达,其产物具有良好的免疫学和生物学活性。
- 李婷杨梅陈金桃宋天章余新炳陈红武胡旭初
- 关键词：华支睾吸虫酶活性
- 循环miR-155与胃癌炎症因子相关性分析及在胃癌诊断中意义研究
- 2017年
- 目的:血中miR-155与胃癌炎症因子相关性分析及其在胃癌诊断中意义研究。方法:qRT-PCR检测胃癌病人血清中miR-155相对表达;小分子干扰RNA干扰miR-155后研究其对胃癌细胞株SGC-7901炎症因子分泌作用;ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8水平。结果:胃癌病人血清中miR-155水平明显高于健康人血清中miR-155水平,且ROC曲线分析表明血清中miR-155对胃癌诊断具有较好的诊断价值。此外,胃癌病人血清中miR-155水平与炎症因子IL-6、IL-8水平呈正相关;在胃癌细胞中SGC-7901干扰miR-155后明显抑制胃癌细胞SGC-7901炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8分泌。结论:血清中miR-155水平对胃癌具有诊断意义,且其调控胃癌炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8分泌。
- 洪宏海陈金桃林丽英
- 关键词：胃癌MIR-155炎症因子
- MALDI-TOF-MS检测分枝杆菌属正确率的荟萃分析被引量：2
- 2016年
- 目的对MALDI-TOF MS快速检测分枝杆菌属的正确率进行荟萃(meta)评价。方法收集1990-2015年,国外公开发表的关于MALDI-TOF MS检测分枝杆菌的文献,按meta分析的要求对文献进行检索、筛选,对纳入的文献进行质量评价,对符合条件的研究进行meta分析。结果共有11篇文献纳入,对各文献的研究进行数据提取后合并MALDI-TOF MS鉴定分枝杆菌属的正确率,结果正确率为91%。结论 MALDI-TOF MS对分枝杆菌属的鉴定有较好的准确性。
- 郭旭光林翠琼邓穗燕林丽英陈琼陈金桃夏勇
- 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱质谱分枝杆菌
- 一种新型腹膜透析液透析安全性的初步研究
- 2015年
- 目的实验评价新型氨基壳聚糖（AC）腹膜透析液的理化性质,透析效果及生物安全性,为进一步临床研究奠定基础。方法参照艾考糊精透析液配方构建新型AC透析液,检测酸碱度,稳定性,胶体性及抑菌作用。将126只大鼠随机分为7组,各组SD大鼠腹腔分别注射不同浓度葡萄糖透析液、艾考糊精透析液、AC透析液5 ml,测量注射后1、2、3、4、8、12 h腹腔内液体含量。连续腹腔注射AC透析液2周,取肝、肾、肠系膜及腹膜组织,染色观察病理变化。结果新型AC透析液为无色透明状胶体,具有丁达尔效应,p H 7.0-8.0;经高温高压、反复冻融等处理后无不溶物析出。AC透析液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长均有抑制作用。1.0%与1.5%AC透析液均可增加腹腔内液体体积,8 h达到最大容积分别为（7.15±0.107）ml与（9.43±0.232）ml,8 h与12 h腹腔液体含量变化无统计学意义（P〉0.05）。大鼠长期腹腔注射AC透析液与葡萄糖透析液比较,肝、肾、肠系膜HE染色无区别,腹膜纤维化程度无加重。结论新型AC透析液生物安全性较高,透析效果明显,透析速度缓慢平和,且能抑制细菌生长,有较好的研究价值和临床应用前景。
- 宋天章陈金桃尹红玲姜宗培胡旭初
- 关键词：腹膜透析液抑菌
- 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床特点及耐药监测被引量：1
- 2016年
- 目的监测广州医科大学附属第三医院2014年和2015年大肠埃希菌的分离情况及其对抗菌药物的耐药状况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法常规方法培养分离患者感染的病原菌,并采用全自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按CLSI规定的标准进行,采用WHONET5.6软件进行数据统计分析。结果 2014年和2015年共分离到大肠埃希菌1 202株,标本分布前5位分别为尿液、血液、痰液、分泌物和组织,本次分离得到的大肠埃希菌对替加环素敏感率为99.9%,对亚胺培南敏感率为99.2%,对阿米卡星敏感率为97.7%,对哌拉西林/他唑巴坦敏感率为97.2%,对呋喃妥因敏感率为85.2%。2014年和2015年分离得到的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌阳性菌共643株,占53.5%。2年分离得到的ESBLs阳性的大肠埃希菌对头孢曲松、氨苄西林、头孢唑啉耐药率达99.0%;而对亚胺培南、替加环素、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因敏感率达80.0%以上。结论大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药趋势相对稳定,临床微生物实验室应加强对多重耐药菌株的监测,为临床合理使用抗菌药物提供依据。
- 林丽英郭旭光邓穗燕陈琼陈金桃夏勇
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药监测
- 重组日本血吸虫亲环素A的原核表达及免疫保护作用的研究被引量：1
- 2015年
- 目的克隆、表达日本血吸虫亲环素A(Sj Cy PA)基因,并对重组蛋白的免疫保护效果进行实验室评价。方法构建p ET28-Sj Cy PA重组质粒,转化感受态大肠杆菌BL21/DE3。用IPTG诱导表达,经亲和层析纯化目的蛋白。用PBS、r Sj Cy PA分别免疫小鼠后进行日本血吸虫尾蚴攻击感染,观察其免疫保护效果。结果成功表达了可溶性Sj Cy PA蛋白并得到纯化,经Western blot鉴定为血吸虫蛋白。r Sj Cy PA免疫小鼠产生60.10%的减虫率和43.42%的减卵率,HE染色及Masson染色揭示实验组肝脏虫卵肉芽肿及纤维化明显减轻。结论 r Sj Cy PA具有较好的抗血吸虫感染和抗血吸虫病的作用,是一个有前景的血吸虫疫苗候选分子。
- 陈金桃宋天章尹红玲黄怀球胡旭初
- 关键词：日本血吸虫亲环素A疫苗
- Sortilin促进肝癌细胞侵袭作用及机制研究
- 2018年
- 目的探讨Sortilin在肝癌侵袭中作用及其分子机制。方法 ELISA法检测血清中Sortilin水平;小分子干扰片段沉默Sortilin研究其功能;Western blot检测蛋白金属酶MMP-2和MMP-9水平;采用Invasion assay法检测肝癌侵袭作用。结果沉默Sortilin后抑制肝癌细胞侵袭,下调蛋白金属酶MMP-2和MMP-9水平。肝癌病人血清Sortilin水平升高(P<0.001),且与AFP呈正相关。结论Sortilin通过下调蛋白金属酶MMP-2和MMP-9水平促进肝癌细胞侵袭;血清中Sortilin水平对肝癌具有较好的诊断价值。
- 洪宏海王征陈金桃
- 关键词：肝癌SORTILIN肿瘤侵袭
