刘显智
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 蛋白激酶C调节血管内皮细胞CD44分子表达的机制
- 2007年
- 目的:研究血管内皮细胞蛋白激酶C对CD44分子表达的调控机制。方法:以人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)为研究模型。利用免疫沉淀法制备Raf-1激酶的提取物,以Western blot及增强化学发光法检测Raf-1激酶活性;放射自显影检测CD44的磷酸化情况;RT-PCR方法检测CD44基因表达。结果:与未处理的细胞相比较,加入10ng/ml的Phorbol-myristate-acetate(PMA)后,CD44磷酸化随时间延长而明显增强,尤以30分钟时最显著。HUVECs的PKC活化后,Raf-1Kinase活性明显增强,加入Calphostin C后其活性则被抑制;10ng/ml PMA处理1分钟,即能看到CD44基因表达明显升高(P<0.05),而先加入0.05μmol/L Calphostin C、30μmol/L RKIP,5μmol/L PD98059、10μmol/LGenistein预处理HUVECs,则能抑制PMA对CD44基因表达的上调作用。结论:PKC活化通过对CD44的磷酸化作用而影响CD44基因表达,其信号传导途径为PKC→Raf-1Kinase→MEK→ERK。此路径相关酶的抑制剂能抑制CD44基因的表达。
- 郝一文周文玲刘显智
- 关键词:血管内皮细胞CD44蛋白激酶C
- 纤维结合蛋白胶的制备被引量:1
- 1999年
- 纤维结合蛋白胶(fibringlue)由于其优良的止血、封固及促进上皮细胞再生等性能正被人们日益广泛地应用于临床。由于纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)是一种人血液中天然存在的生物活性物质,无毒副作用,因此,以其作为外科止血、封固、填充的生物制...
- 郝一文周勇刘显智
- 关键词:纤维蛋白原冷沉淀凝血酶
- 蛋白激酶C对血管内皮功能的影响被引量:1
- 2006年
- 【目的】研究血管内皮蛋白激酶C对内皮通透性及粘附功能的影响。【方法】以血管内皮细胞为研究对象,以流式分析法测定细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达;以同位素标记法测定HUVECs的粘附率;双室培养法测定HUVECs的通透率。【结果】10 ng/mlPMA处理HUVECs后,HUVECs的通透性于30 min时开始明显增高;VCAM-1、ICAM-1表达增强,对血小板粘附率2 h达到最大值。【结论】PKC活化能其上调血管内皮细胞VCAM-1I、CAM-1的表达,并增强其粘附性。HUVECs的PKC活化与血管内皮细胞通透性增加有关。
- 郝一文丁伟刘显智
- 辐照的血管内皮对造血干细胞迁徙的影响被引量:2
- 2005年
- 目的通过对小剂量γ射线辐照的血管内皮细胞的蛋白激酶C(PKC)活性、黏附分子表达及造血干细胞跨内皮迁徙率的测定,研究辐照的血管内皮对造血干细胞跨内皮迁徙能力的影响。方法1~5Gyγ射线辐照人脐静脉内皮细胞(HUVECs);用[γ32P]ATP掺入外源性底物测定PKC活性;用ELISA法测定黏附分子VCAM1、PECAM1、CD44的表达;用双室培养法测定造血干细胞跨HUVECs的迁徙能力。结果3Gy以下γ射线辐照后的HUVECs膜PKC活性逐渐升高,浆PKC活性逐渐降低,尤以2、3Gy辐照的HUVECs变化最为显著(P<0.01),而高于3Gy辐照的HUVECs的膜、浆PKC活性呈下降趋势。3Gy以下辐照的HUVECs的VCAM1、PECAM1、CD44的表达量也显著升高(P<0.01)。造血干细胞通过γ射线辐照后的HUVECs的数量显著增加(P<0.01),但加入针对上述黏附分子的单克隆抗体后,能显著降低造血干细胞跨内皮能力。PKC活性与VCAM1、PECAM1、CD44的表达呈正相关关系。结论适当小剂量的γ射线辐照血管内皮细胞,能活化其PKC、增加PKC活性,并进而上调黏附分子VCAM1、PECAM1、CD44的表达,有利于造血干细胞的跨内皮迁徙。
- 郝一文李亚明刘显智
- 关键词:辐照损伤血管内皮造血干细胞细胞迁徙黏附分子