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周达全
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
供职机构:
中南大学湘雅医院
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发文基金:
湖南省自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
易小平
中南大学湘雅医院
纪连栋
中南大学湘雅医院
邓公平
中南大学湘雅医院
欧阳洋
中南大学湘雅医院
江春
中南大学湘雅医院
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周达全
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年份
1篇
2009
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慢病毒载体介导RNAi稳定抑制XIAP表达及对胰腺癌细胞增殖、凋亡影响的实验研究
被引量:4
2009年
目的:探讨运用慢病毒载体介导的RNA干扰技术对X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的抑制效率及对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响,建立XIAP表达稳定抑制的胰腺癌细胞株。方法:应用pGCSIL-PUR慢病毒载体构建针对XIAP的ShRNA载体,转染包装细胞293T,收集病毒上清转染胰腺癌细胞系SW1990,经嘌呤霉素(puromycin)筛选并扩大培养得到稳定克隆;实时荧光定量PCR和western-blot免疫印迹检测癌细胞内XIAP的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;caspase 3/7活性测定和DAPI染色检测细胞凋亡。结果:成功构建3个XIAP-ShRNA慢病毒载体(X1、X2、X3)及XIAP表达稳定抑制的胰腺癌细胞株,对XIAP的抑制效率均达70%以上;MTT检测显示X1、X3稳定抑制XIAP后胰腺癌细胞增殖明显减慢,但caspase 3/7活性及细胞凋亡并没有明显增加。结论:慢病毒载体介导的靶向XIAP的RNAi可有效抑制XIAP表达,降低胰腺癌细胞的增殖能力;成功建立的XIAP表达稳定抑制的胰腺癌细胞株为进一步研究打下基础。
易小平
江春
宰红艳
邓公平
欧阳洋
周达全
纪连栋
李宜雄
关键词:
胰腺癌
X-连锁凋亡抑制蛋白
慢病毒载体
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