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李享
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1
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供职机构:
军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
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发文基金:
北京市自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
张凤娇
军事医学科学院微生物流行病研究...
房华丽
军事医学科学院微生物流行病研究...
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军事医学科学院微生物流行病研究...
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军事医学科学院微生物流行病研究...
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军事医学科学院微生物流行病研究...
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李享
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2013
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KPC-2型碳青霉烯酶的表达纯化及其催化抗生素水解的动力学
2013年
目的:表达纯化KPC-2型碳青霉烯酶,并研究其催化抗生素水解的酶动力学活性。方法:将KPC-2基因与pET-22b(+)原核表达载体连接后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经FF镍柱纯化后,SDS-PAGE检测蛋白的纯度;用BioTek酶联仪进一步检测其抗生素水解范围及动力学特性。结果:构建了高效表达KPC-2的工程菌,得到了纯度在90%以上的KPC-2蛋白,该蛋白能水解几乎所有β内酰胺类抗生素,其水解美罗培南等碳青霉烯类抗生素的能力较强,最适温度约为40℃,最适pH值约为6.5。结论:为进一步了解最常见的KPC功能与活性提供了重要信息。
刘雄
张凤娇
李享
陈芳红
房华丽
王琴
李涛
王慧
关键词:
细菌耐药
KPC-2型碳青霉烯酶
Β内酰胺类抗生素
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