李海波 作品数:3 被引量:9 H指数:2 供职机构: 中南大学湘雅医院 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
两个汉族家族性玻璃体淀粉样变性家系突变基因检测及临床表型分析 被引量:1 2021年 目的探讨2个汉族家族性玻璃体淀粉样变性(FVA)家系的临床特征及其基因突变特点。方法采用家系调查研究,收集2015年1月至2018年12月于中南大学湘雅医院就诊的2个汉族淀粉样变性家系,对家系成员进行全身及眼科检查,抽取外周静脉血,进行DNA抽提、PCR扩增、筛选及测序等检测转甲状腺素蛋白(TTR)基因。分别对2个家系的先证者行经睫状体平坦部标准三通道23G玻璃体切割术,术后对玻璃体样本行组织病理学检查。结果家系1的63名成员中有15例出现双眼玻璃体混浊,平均发病年龄为(43.6±5.8)岁;全身检查未发现神经系统、心血管系统、肾脏、肝脏病变;先证者术中玻璃体黏稠,难以切净;玻璃体标本刚果红染色呈阳性;术后伴发开角型青光眼,基因检测发现TTR基因第3外显子Gly83Arg突变。家系2的49名成员中有7例出现双眼玻璃体混浊,平均发病年龄为(50.4±5.5)岁;其中3例患者出现四肢麻木、肌力下降症状。先证者术中见玻璃体松软易于切割,玻璃体标本刚果红染色呈阳性反应,基因检测发现TTR基因第2外显子Ala36Pro突变,未伴发青光眼。结论TTR基因Gly83Arg或Ala36Pro突变可导致FVA,2个家系致病基因位点不同,其发病年龄、临床症状、并发其他系统疾病等临床表型也有所不同。 郑巍 李海波 张雪咏 周学智 陈媛媛 毛俊峰关键词:玻璃体淀粉样变性 临床表型 转甲状腺素蛋白 汉族 家系分析 视网膜Sigma-1受体拮抗剂对豚鼠形觉剥夺性近视形成的抑制作用及其机制 被引量:6 2021年 目的研究视网膜Sigma-1受体拮抗剂N,N-二乙基-2-(4-甲氧基-3-苯乙基氧基苯基)乙胺盐酸盐(NE-100)在豚鼠形觉剥夺性近视(FDM)形成中的调控作用及其机制。方法选取健康21日龄三色豚鼠85只,采用随机数表法将其中36只随机分为正常对照组、眼遮盖14 d组和眼遮盖11 d组,每组12只,其中正常对照组不予遮盖,眼遮盖14 d组用自制半透明眼罩连续遮盖豚鼠右眼14 d作为FDM模型组,眼遮盖11 d组同法连续遮盖右眼11 d后去遮盖3 d。将剩余49只豚鼠采用随机数表法随机分为FDM组10只、FDM+NE-1006μg组12只、FDM+NE-10060μg组10只、FDM+NE-100600μg组9只和FDM+生理盐水组8只。根据分组,FDM眼每天接受球周注射NE-1006μg、60μg、600μg和生理盐水各100μl。采用红外偏心自动验光仪测定眼球屈光度;采用A型超声仪测量眼轴长度;采用角膜曲率计测量角膜曲率。采用免疫组织化学染色和Western blot法检测视网膜中Sigma-1受体蛋白表达分布;采用高效液相色谱电化学法测定神经视网膜的多巴胺含量。结果各组间豚鼠屈光度和眼轴长度总体比较,差异均有统计学意义(F=147.81、160.10,均P<0.01),其中与正常对照组比较,眼遮盖14 d组和眼遮盖11 d组豚鼠遮盖眼相对近视度数明显加深,眼轴明显延长,差异均有统计学意义(均P<0.05);与眼遮盖14 d组比较,眼遮盖11 d组相对近视度数明显较低,眼轴较短,差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常对照组豚鼠Sigma-1蛋白表达于视网膜神经节细胞(RGCs)、光感受器内节及少量内核层细胞;与正常对照组比较,眼遮盖14 d组豚鼠RGCs及光感受器内节Sigma-1蛋白染色增强,内核层Sigma-1染色阳性细胞明显增多,内、外丛状层也可见Sigma-1染色阳性细胞,Müller细胞染色尤为明显,在视网膜中Sigma-1受体蛋白表达量明显升高。与眼遮盖14 d组比较,眼遮盖11 d组遮盖眼视网膜中Sigma-1受体蛋白表达量明显下降,差异有统� 陈媛媛 谢伏娟 李海波 关宇欣 毛俊峰关键词:形觉剥夺 近视 视网膜 多巴胺 重组慢病毒GV303 Rat IL-33体外转染原代大鼠骨髓间充质干细胞的研究 被引量:2 2017年 目的:探索构建稳定表达IL-33的原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞系的方法。方法:体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,并进行ELISA实验检测转染前IL-33的表达情况。构建GV303 Rat IL-33慢病毒载体,并进行慢病毒的包装。3d后荧光显微镜下观察GFP的表达,分别使用Western blot、ELISA检测转染后的BMSC中IL-33的表达。结果:大鼠BMSC被成功分离并传代,流式细胞术鉴定BMSC可得到CD90、CD29为阳性,CD11b、CD45、CD34为阴性,与之前的文献报道相符。并且BMSC被成功诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞。对转染前的BMSC行ELISA实验检测IL-33的表达,结果为阴性。病毒转染3d后于荧光显微镜下可观察到GFP的表达;ELISA实验检测转染后BMSC中IL-33的表达,结果为阳性;Western blot亦可以检测到IL-33的表达。结论:应用GV303慢病毒载体可以建立稳定表达IL-33的大鼠BMSC原代细胞系。 姚雪雁 杨薇 李海波 许惠卓关键词:转染 骨髓间充质干细胞