欧阳文
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：武汉工业学院生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 一种地衣芽孢杆菌表达载体的构建
- 2011年
- 用PCR方法从地衣芽孢杆菌WH-08基因组DNA中分别扩增α-淀粉酶基因amyL启动子PamyL和终止子TT,用重叠PCR技术将两者连接,重叠PCR产物用Hind III和EcoR I双酶切后,与经相同酶切的载体PHY300 PLK连接,构建重组质粒PHY-PamyL-TT。该重组载体的构建为外源蛋白在地衣芽孢杆菌中的高效表达奠定了基础。
- 欧阳文刘军李俊辉
- 关键词：地衣芽孢杆菌重叠PCR
- 响应面法优化酿酒酵母工程菌产甜蛋白monellin发酵培养基被引量：5
- 2011年
- 对酿酒酵母工程菌WHF9/monellin在液体培养基中产甜蛋白monellin的条件进行了优化。采用单因子试验筛选出细胞生长培养基的最适碳源为蔗糖,氮源为玉米浆干粉,且应添加微量元素溶液。在此基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响菌体生物量的3个显著因素:蔗糖、玉米浆干粉、微量元素溶液。用最陡爬坡路径逼近最大响应区域后,利用Box-Behnken设计和响应面分析法对显著因素进行优化,得出蔗糖、玉米浆干粉、微量元素溶液的最佳浓度分别为102.2g/L,33.9g/L,4.5mL/L。菌株在优化后的生长培养基中的生物量比在YPD培养基中提高了81.38%。在诱导剂半乳糖最适浓度102.2g/L条件下,菌株在优化后的培养基中monellin的表达量达到226.7mg/L,比在YPG中表达的monellin提高了4.2倍,且表达的monellin具有生物活性。
- 赵沁沁刘军徐爱才欧阳文闫达中赵胜军
- 关键词：MONELLIN酿酒酵母响应面法
