胡焱 作品数:19 被引量:49 H指数:4 供职机构: 贵州大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 贵州省科学技术基金 国家自然科学基金 贵州省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
鸡importinβ1蛋白基因的克隆及其生物信息学分析 Importinβ1蛋白属于核质转运受体蛋白importinβ家族成员之一,主要在蛋白质的入核转运过程中发挥重要作用。已有研究表明,importinβ1蛋白能介导具有核定位特征的病毒蛋白进入细胞核,它是否同样可介导新城疫... 胡焱 段志强 嵇辛勤 雷云 万彪 陈强关键词:生物信息学分析 细胞核 IMPORTIN 鸡importin β1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:4 2016年 [目的]对鸡importin β1基因进行克隆和生物信息学分析。[方法]根据Gen Bank公布的鸡importin β1基因序列(XM_015299473)设计合成特异性引物,通过RT-PCR从DF-1细胞中扩增importin β1基因CDS区并进行克隆和测序,利用生物信息学工具对其理化性质、二级结构和系统进化树进行分析。[结果]鸡importin β1基因CDS全长2 268bp,共编码755个氨基酸,该蛋白等电点为4.61,相对分子质量84.15 k Da,分子式为C3712H5901N979O1152S46。蛋白质二级结构预测显示,鸡importin β1蛋白含有丰富的二级结构,以α-螺旋为主(占64.90%)。importin β1基因同源性及系统进化树分析结果表明鸡与鹌鹑的亲缘关系最近。[结论]鸡importin β1基因的克隆和生物信息学分析为进一步研究其功能奠定了基础。 胡焱 段志强 嵇辛勤 阮涌 赵佳福 雷云 万彪关键词:克隆 生物信息学 鸡importin β1基因原核表达载体的构建与表达 1引言Importin β1蛋白属于核质转运受体蛋白importin β家族成员之一,它是一种相对保守的、广泛分布于真核生物细胞内的核转运受体蛋白.早期的研究证实靶蛋白入核转运需要importin o和importinβ... 胡焱 段志强 嵇辛勤 阮涌 赵佳福 万彪 邓珊珊关键词:原核表达载体 犬乳腺肿瘤病理组织学观察及ER PR C-erbB-2的表达分析 2017年 通过对20例犬乳腺肿瘤进行病理组织学观察、免疫组织化学染色,探讨犬乳腺肿瘤病理形态学特点,ER、PR、Cerb B-2表达与乳腺肿瘤的关系。结果显示,20例犬乳腺肿瘤,70%为恶性肿瘤,其中良性肿瘤有导管内乳头状瘤和纤维性瘤,恶性肿瘤有浸润性导管癌,单纯癌,小叶原位癌,癌肉瘤,腺癌,恶性肿瘤发病率高于良性肿瘤。免疫组化结果显示-ER、PR在良性肿瘤的表达率均高于恶性肿瘤,P<0.05,差异显著;C-erb B-2在恶性肿瘤中的表达高于良性肿瘤,P<0.05,差异显著。提示,犬乳腺肿瘤恶性肿瘤发病率较高,ER、PR、C-erb B-2对犬乳腺肿瘤发病中的诊断、治疗及预后有重要意义。 刘廷江 嵇辛勤 主性 阮涌 王修江 林聪宏 陈强 雷云 龙丹丹 胡焱 万彪关键词:乳腺肿瘤 免疫组织化学 不同新城疫疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果比较 2017年 为探讨不同新城疫(ND)疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果,选用NDⅠ系活疫苗(CS2株)、Ⅳ系灭活疫苗(La Sota株)和重组基因Ⅶ型NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)分别对三穗麻鸭进行免疫实验,检测疫苗最小免疫剂量、免疫鸭的抗体滴度和消长规律,以及病毒感染免疫鸭后的排毒情况。结果显示,活疫苗CS2株、灭活疫苗La Sota株、灭活疫苗A-Ⅶ株的最小免疫剂量分别为1.0 m L/只、0.5 m L/只和0.2 m L/只;3种疫苗2次免疫要高于1次免疫产生的抗体滴度,但各免疫组不同免疫次数鸭的抗体滴度均在第60天达到高峰,其中以灭活疫苗A-Ⅶ株1次或2次免疫诱发的抗体滴度最高(分别为7.5log2和8.1log2),并且抗体持续期长,在免疫后第150天抗体水平仍能达到免疫保护要求;对免疫鸭的排毒检测发现,活疫苗CS2株免疫后的鸭持续排毒,灭活疫苗La Sota株免疫后的鸭排毒量少且时间短,而灭活疫苗A-Ⅶ株免疫后的鸭未检测到排毒。试验结果表明,重组基因Ⅶ型NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)在免疫剂量、免疫次数、免疫鸭的抗体滴度和持续时间,以及抑制免疫鸭排毒方面均明显优于传统ND疫苗。 胡焱 嵇辛勤 阮涌 赵佳福 雷云 段志强 刘秀梵关键词:新城疫病毒 新城疫疫苗 免疫效果 鸭疫里默氏杆菌贵州分离株OmpA及16S rRNA基因序列分析 被引量:3 2016年 为了解鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)贵州分离株外膜蛋白A(Omp A)和16 S r RNA基因序列的相关性以及与RA血清型之间的关系,对12株RA贵州分离株通过PCR分别扩增Omp A和16 S r RNA基因,并对其构建系统进化树和分析其系统进化关系。结果显示,12株RA分离株Omp A基因分为2个群,其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为96.9%-100.0%和98.4%-100.0%;Omp A蛋白中有规律的变异位点为100(R/G)、143(S/P)、145(T/I)和268(S/P)。12株RA分离株16 S r RNA基因同属1个群,其核苷酸序列同源性为99.4%-100.0%。结果表明,12株RA贵州分离株Omp A基因和16 S r RNA基因序列所属的基因群无明显相关性,并且与RA血清型的分型也无直接关联。 雷云 嵇辛勤 段志强 阮涌 万香萍 陈强 万彪 胡焱 龙丹丹关键词:鸭疫里默氏杆菌 外膜蛋白A RRNA 鸭源新城疫病毒M蛋白核定位信号突变影响病毒的毒力和复制能力 被引量:3 2018年 【目的】研究鸭源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白核定位信号(nuclear localization signal,NLS)突变对其毒力和复制能力的影响。【方法】利用鸭源NDV SS1株P基因和F基因上的AgeⅠ和Bstz17Ⅰ酶切位点,将overlapPCR方法获得的M蛋白NLS突变的片段替换到p NDV/SS1GFP中获得全长质粒pNDV/SS1GFP-M/NLSm。通过反向遗传学技术拯救M蛋白NLS突变体病毒,并对拯救的病毒进行血凝(hemagglutination,HA)试验、荧光试验和M基因测序鉴定。另外,对突变体病毒进行M蛋白的亚细胞定位观察,以及病毒的生物学特性、空斑形成能力和体外增殖能力测定。【结果】成功构建M蛋白NLS突变的全长质粒pNDV/SS1GFP-M/NLSm。细胞转染物接种鸡胚后的第1代尿囊液无HA效价,盲传3代才能检测到拯救病毒的HA效价。进一步的荧光试验和M基因测序确定拯救的病毒是突变体病毒r SS1GFP-M/NLSm。与亲本病毒rSS1GFP相比,突变体病毒M蛋白由细胞核定位变为细胞质定位。此外,突变体病毒的毒力、在鸡胚上的复制能力以及在细胞中的空斑形成能力显著降低,并且感染细胞后产生的细胞病变轻微,M蛋白和绿色荧光蛋白的表达量均降低,说明M蛋白NLS突变使病毒的体外增殖能力受到抑制。【结论】NLS突变导致的M蛋白细胞核定位功能丧失可明显降低鸭源NDV的毒力和复制能力。 段志强 嵇辛勤 邓珊珊 胡焱 赵佳福 倪萌萌关键词:新城疫病毒 M蛋白 核定位信号 病毒复制 鸭疫里默氏杆菌贵州分离株的耐药性及致病性分析 引言鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)病是由鸭疫里默氏杆菌感染的一种急性、高度接触性传染病,易侵害2~8周龄的雏鸭、鹅等禽类。由于引起雏禽的发病率和死亡率高,造成的经济损失巨大,因此... 雷云 嵇辛勤 段志强 陈佳琪 陈强 万彪 胡焱 龙丹丹关键词:鸭疫里默氏杆菌 分离株 心包液 耐药性 鸡基质蛋白3基因的生物信息学分析 被引量:3 2017年 根据GenBank已发表的鸡基质蛋白3(matrin 3)基因序列,设计合成一对特异性引物,以鸡胚成纤维细胞提取的总RNA反转录产物为模板,通过PCR扩增鸡matrin 3基因并进行克隆与生物信息学分析。测序结果表明:鸡matrin 3基因编码区全长为2 709 bp,共编码902个氨基酸,理论pI为5.79,分子质量约为100.71 ku,分子式为C_(4362)H_(6903)N_(1267)O_(1418)S_(29)。序列分析结果显示:鸡matrin 3蛋白有丰富的二级结构,以无规则卷曲和α-螺旋为主;该蛋白中包含两个锌指结构域和两个RNA识别基序,其中人、小鼠和野猪的4个功能结构域氨基酸位点相同,而在鸡matrin 3蛋白中存在多个氨基酸位点变异。核苷酸同源性及遗传进化分析发现:鸡与火鸡的matrin 3基因核苷酸同源性最高(为98.0%),并且与火鸡的亲缘关系最近。研究结果为进一步研究鸡matrin 3蛋白的生物学功能奠定了基础。 邓珊珊 嵇辛勤 段志强 熊建民 阮涌 赵佳福 胡焱 田宇杰关键词:克隆 贵阳地区犬细小病毒VP2基因的克隆及遗传进化分析 被引量:10 2017年 为研究贵阳地区犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的流行基因型及其遗传进化情况,本试验对从贵阳市分离的10株CPV的VP2基因进行PCR扩增和克隆并进行序列分析。结果显示,分离的病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变(CPE),分离的10株病毒中,7株为CPV-2a亚型,3株为CPV-2c亚型,命名为GY-1~GY-10。10株CPV分离株与疫苗株VP2基因的同源性98.4%~99.4%,与其他国内外参考株的同源性为97.7%~99.9%。本试验首次报道贵阳市CPV的流行基因型为CPV-2a亚型并伴随CPV-2c亚型存在,对监测CPV遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义。 陈强 嵇辛勤 段志强 阮涌 雷云 龙丹丹 胡焱 万彪关键词:犬细小病毒 基因型 VP2基因 遗传进化