郑琪
- 作品数：21 被引量：30H指数：2
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家肉羊产业技术体系建设项目安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 山羊胎儿肌肉干细胞的分离培养与成肌诱导分化被引量：2
- 2018年
- 【目的】通过体外建立安淮山羊胎儿肌肉干细胞分离培养及成肌诱导分化的方法,为进一步研究调控山羊肌肉干细胞增殖与分化的分子机制提供实验材料。【方法】本试验选取山羊胎儿背最长肌肌肉组织,用眼科剪剪成肉糜后,用0.1%的Ⅰ型胶原酶消化40 min,然后利用0.25%的胰酶消化15 min。分离得到的细胞用生长培养基(20%FBS+80%DMEM/F12+青链霉素)培养于37℃、5%CO2培养箱内。培养2h后采用差速贴壁技术对细胞进行纯化,又2h后,重复纯化一次。待细胞生长至70%左右密度时可进行传代培养。每次传代培养均采用差速贴壁30min的方法进一步纯化肌肉干细胞,共纯化至第6代。利用免疫荧光技术检测第6代细胞中肌肉干细胞标记基因Pax7、Myo D1的蛋白表达情况,从而对分离得到的细胞进行鉴定。当肌肉干细胞生长至70%左右密度时,将生长培养基更换为分化培养基(2%FBS+98%DMEM/F12+青链霉素),诱导细胞向成肌方向分化并观察细胞的形态学变化。细胞诱导分化1d后,采用免疫荧光技术检测肌肉干细胞的分化标记基因Myog的蛋白表达情况。另外,分别提取诱导0、1、3、5、7d后的细胞的总RNA,通过反转录试剂盒反转成c DNA后,利用q PCR测定Myo D1和Myog的相对表达量。【结果】分离得到的细胞呈贴壁生长,其形态趋于稳定后主要呈长梭形或纺锤形。免疫荧光技术检测的第6代细胞中Pax7和Myo D1蛋白均为阳性表达。采用分化培养基诱导细胞分化后,在显微镜下可观察到随着诱导天数的增加,细胞开始分化、相互融合成肌管且具有一定的方向性。免疫荧光检测结果表明Myog蛋白呈明显的阳性表达。另外,q PCR结果显示,标志基因Myo D1和Myog均有表达,且Myo D1的相对表达量在分化的第1天相比于0天显著升高并维持到第3天,第5、7天开始显著下降但仍显著高于增殖期。Myog在分化不同天数的细胞中的相对表达量
- 睢梦华郑琪吴昊丁建平刘勇李文雍储明星张子军凌英会
- 关键词：成肌分化
- 胎儿到羔羊七个阶段的山羊背最长肌组织学特性及mRNA和IncRNA调控网络分析
- 肌肉发育受到一系列复杂且精确的调节,mRNA和lncRNA在骨骼肌生成的调节中起着重要的作用。本研究采用石蜡切片探究安徽白山羊从胎儿到羔羊7个阶段(包括第 45 天(F45)、65 天(F65)、90 天(F90)、12...
- 郑琪
- 关键词：MRNA山羊背最长肌RNA-SEQ
- 文献传递
- 一种山地饲草收割装置
- 本发明涉及割草机领域，具体是涉及一种山地饲草收割装置。包括割草机构，割草机构包括机底部和割盘部，割盘部转动安装在机底部上，割盘部上设置有第一割刀齿，割盘部或机底部上设有与第一割刀齿相互配合的第二割刀齿。被割刀齿切割的饲草...
- 凌英会朱露陈青郑琪刘亚韩春杨
- 文献传递
- 一种山地饲草收割装置
- 本实用新型涉及割草机领域，具体是涉及一种山地饲草收割装置。包括割草机构，割草机构包括机底部和割盘部，割盘部转动安装在机底部上，割盘部上设置有第一割刀齿，割盘部或机底部上设有与第一割刀齿相互配合的第二割刀齿。被割刀齿切割的...
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- 文献传递
- 一种羊体重体尺测量装置及其使用方法
- 本发明公开一种羊体重体尺测量装置及其使用方法，包括测量围栏、电子磅秤、第一测量仗、第二测量仗和过道围栏，测量围栏包括底板、前栏杆、右侧栏板、左侧栏板和后侧栏板，底板置于电子磅秤上，右侧栏板固定在底板上，前栏杆的一侧与右侧...
- 凌英会朱露陈青章孝荣张子军睢梦华郑琪张运海
- 文献传递
- 一种自动温控流动式羔羊哺乳器
- 本发明公开一种自动温控流动式羔羊哺乳器，包括支撑装置和放置于支撑装置上的哺乳箱：哺乳箱包括箱体、箱盖、控制装置和吸奶装置，箱盖扣合在箱体上，在箱盖上设置控制装置，控制装置包括控制面板、温度感应器、加热丝、吸水泵、蓄电池、...
- 凌英会陈青朱露章孝荣张子军睢梦华郑琪张运海
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- 安淮山羊肌肉干细胞的分离培养、鉴定及成肌诱导分化
- <正>引言/目的成体肌肉干细胞即骨骼肌卫星细胞(satellite cells,SCs)是脊椎动物实体组织再生中最有前景的研究之一。在成体肌肉组织损伤后,SCs可从静止状态被激活从而具有成肌分化的能力。通过体外建立安淮山...
- 睢梦华郑琪朱露吴昊张运海凌英会
- 关键词：山羊
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- 安淮山羊肌肉干细胞的分离培养、鉴定及成肌诱导分化
- 引言/目的成体肌肉干细胞即骨骼肌卫星细胞(satellite cells,SCs)是脊椎动物实体组织再生中最有前景的研究之一。在成体肌肉组织损伤后,SCs可从静止状态被激活从而具有成肌分化的能力。通过体外建立安淮山羊SC...
- 睢梦华郑琪朱露吴昊张运海凌英会
- 一种干湿分离的羊舍清粪装置及其粪便清理方法
- 本发明公开了一种干湿分离的羊舍清粪装置及其粪便清理方法。其中羊舍清粪装置包括清粪沟和刮粪板；清粪沟为并列的2条矩形的长条坑；2个长条坑的地面设为坡度为0.2％的同向斜坡，且在并列的2个长条坑地面的最低端处设有积粪池，在2...
- 凌英会陈青朱露章孝荣吴昊睢梦华郑琪孙志辉
- 文献传递
- 骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化过程中关键信号通路的作用被引量：16
- 2017年
- 骨骼肌卫星细胞被认为是成体骨骼肌细胞成肌分化的唯一干细胞来源,一般处于静息状态。在受刺激后,骨骼肌卫星细胞可通过关键信号通路活化、增殖并分化成为肌细胞,从而参与骨骼肌的形成及损伤修复。信号通路普遍的介入了骨骼肌卫星细胞增殖与分化的过程。其中如Wnt和mTOR信号通路通过级联放大调节卫星细胞活动;Notch以及P38 MAPK信号通路被认为与卫星细胞静息状态关系密切;JAK/STAT信号通路能在不同阶段引起卫星细胞不同特异性反应。这些信号通路相互联系、共同作用,进而影响骨骼肌卫星细胞的生长发育及修复能力。本文拟从Wnt、Notch、P38 MAPK、mTOR、JAK/STAT等关键信号通路对骨骼肌卫星细胞增殖与分化作用的相关研究进展进行综述,为进一步研究骨骼肌形成及肌肉发育相关疾病分子机制奠定基础。
- 郑琪睢梦华凌英会
- 关键词：骨骼肌卫星细胞信号通路
