阮清鸳
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 供职机构：北京林业大学环境科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：环境科学与工程更多>>
- TTC-脱氢酶还原法测定铜绿微囊藻活性被引量：17
- 2008年
- 利用氯化三苯基四氮唑（TTC）-脱氢酶还原法定量地测定了铜绿微囊藻细胞的活性,并对影响活性测定的因素进行了分析与研究.结果显示,TTC浓度大于0.6%时会抑制酶活性,最适TTC浓度为0.2%;脱氢酶还原反应在Tris-HCl缓冲液中能正常进行,而在磷酸盐缓冲液中受到抑制,最适pH值为7.5-8.0;培养时间和培养温度对TTC脱氢酶还原反应的影响较大,最适培养时间为8-16h,最适培养温度为30-35℃;反应不需加入非离子去垢剂,吐温20和曲拉通X-100对脱氢酶反应会产生较强抑制作用.TTC还原所生成的三苯基甲臢（TPF）可采用50%乙醇提取.研究显示TTC-脱氢酶还原法可以很好地进行藻细胞活性定量化测定.
- 梁文艳王珂阮清鸳王金丽
- 关键词：铜绿微囊藻细胞活性脱氢酶
- TTC-脱氢酶还原法测定藻细胞活性的优化与评价被引量：6
- 2009年
- TTC-脱氢酶还原法可用于藻细胞活性的测定,但藻细胞色素会对测定产生影响。实验结果显示,当4mL细胞密度为1.3×1010个/L的藻样,在提取剂浓度大于60%时,色素在485 nm处产生吸光度值达0.35~0.52,对测定产生较大干扰。采用正已烷进行萃取,可去除部分色素干扰,能将色素产生吸光度值降到0.14~0.32。碱性物质会破坏色素,在乙醇提取剂中加入KOH或NaOH,可将色素产生吸光度值从0.14~0.32降到0.04~0.26,所加碱性物质最佳浓度为0.001 M^0.01 M,过高浓度会破坏TTC的还原产物三苯基甲臢(TPF)。色素去除的最佳条件是:使用含0.001 M^0.01 MKOH或NaOH的50%乙醇作为提取剂,提取TPF后,用正已烷进行萃取,色素所致吸光度值可从0.45降至0.04,基本将色素干扰去除。
- 梁文艳王珂王金丽阮清鸳
- 关键词：脱氢酶活性TTC色素
