黄涌
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 供职机构：中山大学附属第一医院东山院区更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沉默信息调节因子1参与依达拉奉对抗异丙肾上腺素致心肌细胞损伤被引量：2
- 2014年
- 目的探讨沉默信息调节因子1(Sirt1)在依达拉奉(EDA)保护心肌细胞对抗异丙肾上腺素(ISO)诱导的损伤中的作用。方法用ISO处理培养的大鼠H9c2心肌细胞,建立β1-肾上腺素能受体(ADRB1)持续兴奋诱导心肌损伤的体外模型。在ISO处理前给予EDA预处理以观察EDA的心肌细胞保护作用。为了明确Sirt1的作用,在ISO或EDA处理前给予其选择性抑制剂Sirtinol预处理。检测细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)的释放、胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量以及Sirt1和内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78(GPR78)的表达。结果 ISO处理可降低细胞存活率,诱导细胞损伤使LDH释放增加,并抑制Sirt1的表达。20μmol/L Sirtinol预处理30 min可加重80μmol/L ISO处理48 h诱导的细胞损伤(P<0.01)。在ISO处理前给予40μmol/L EDA预处理1 h,可部分抑制ISO诱导的Sirt1表达下调(P<0.01)。EDA预处理具有明显的细胞保护作用,提高细胞存活率(P<0.01),减少细胞释放LDH(P<0.01),抑制MDA的产生(P<0.01)以及下调GRP78的表达(P<0.01)。EDA的这些保护效应可被Sirtinol预处理所削弱。结论 Sirt1参与了EDA的抗ISO心肌损伤作用。
- 黄涌董小变庄晓东龙明胡洵廖新学
- 关键词：依达拉奉Β1-肾上腺素能受体心肌保护
- 依达拉奉保护H9c2心肌细胞对抗异丙肾上腺素诱导的氧化应激及内质网应激反应被引量：12
- 2011年
- 目的探讨依达拉奉(EDA)能否保护H9c2心肌细胞对抗异丙肾上腺素(ISO)诱导的氧化应激和内质网应激(ERS)。方法用ISO处理H9c2心肌细胞,建立β1肾上腺素受体持续兴奋诱导心肌细胞毒性的体外模型。EDA在ISO处理心肌细胞前1 h加入培养基中作为预处理。CCK-8比色法检测细胞存活率;双氯荧光素(DCFH-DA)染色/荧光显微镜照相检测细胞内活性氧(ROS)的含量;罗丹明123(Rh123)染色/荧光显微镜照相检测线粒体膜电位(MMP);Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达。结果 ISO在20～100μmol.L-1浓度范围内处理H9c2心肌细胞48 h,呈剂量依赖性地降低细胞存活率;80μmol.L-1ISO处理H9c2心肌细胞可使细胞内ROS含量明显增多及MMP明显降低;80μmol.L-1 ISO处理H9c2心肌细胞0～24 h,可时间依赖性地上调内质网应激蛋白GRP78的表达,其中12 h达到高峰。分别用10、20和40μmol.L-1 EDA预处理1 h可以减弱80μmol.L-1 ISO处理H9c2心肌细胞48h引起的细胞存活率降低,500、1 000和2 000μmol.L-1氧自由基清除剂NAC分别预处理1 h也可减轻ISO诱导的心肌细胞毒性反应;40μmol.L-1的EDA预处理1 h可明显减轻ISO诱导的胞内ROS堆积及MMP降低,并明显抑制ISO引起的GRP78的表达上调。结论 EDA可保护H9c2心肌细胞对抗ISO诱导的损伤作用,其机制可能与抗氧化及抑制内质网应激反应有关。
- 黄涌阮经文杨春涛杨战利莫利球王秀玉董小变廖新学冯鉴强
- 关键词：依达拉奉异丙肾上腺素内质网应激氧化应激线粒体膜电位H9C2心肌细胞
- ERK1/2介导依达拉奉保护H9c2心肌细胞对抗异丙肾上腺素诱导的损伤作用被引量：5
- 2010年
- 目的探讨胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在依达拉奉(EDA)保护H9c2心肌细胞对抗异丙肾上腺素(ISO)损伤中的作用。方法用不同浓度的ISO处理H9c2心肌细胞,建立β1肾上腺素受体持续兴奋诱导心脏毒性的体外模型。EDA在ISO处理心肌细胞前1h加入培养基中作为预处理。PD-98059(ERK1/2抑制剂)在应用EDA前加入培养基中并作用1h,以抑制ERK1/2的磷酸化。CCK-8比色法检测细胞存活率;Western blot法检测总量及磷酸化ERK1/2蛋白的表达;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照相检测线粒体膜电位(MMP)。结果 80μmol/L ISO处理H9c2心肌细胞24h,可使磷酸化的ERK1/2及MMP的水平明显降低。EDA在10～40μmol/L浓度范围内预处理1h可以剂量依赖性地减弱80μmol/L ISO处理H9c2心肌细胞48h引起的毒性反应;40μmol/L EDA预处理1h可明显抑制ISO作用24h引起的ERK1/2磷酸化水平降低及MMP受损。ERK1/2抑制剂,PD-98059,可以取消EDA诱导的细胞保护作用,使细胞毒性及MMP受损加重。结论 EDA可保护H9c2心肌细胞对抗ISO诱导的损伤作用,其机制之一可能与拮抗ISO对ERK1/2的磷酸化抑制作用有关。
- 黄涌王秀玉傅璐杨春涛莫利球杨战利董小变廖新学冯鉴强
- 关键词：细胞外信号调节激酶1/2依达拉奉异丙肾上腺素线粒体膜电位
