刘明
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 斑马鱼HLRA基因调控心脏左右不对称的发育
- 谢华平王跃群周军媚叶湘离刘明唐雄卓赵碧峰雷旻音黄婷吴秀山
- 斑马鱼HLRA基因调控心脏左右不对称的发育
- <正>在胚胎发育过程中左右不对称发育对于心脏的环化、瓣膜形成和房室分隔等都非常重要,左右不对称的缺陷会引起错位导致的各种器官功能上的异常。我们发现HLRA基因可能与左右不对称发育有关。以斑马鱼为模型,通过对HLRA的表达...
- 谢华平周军媚叶湘离刘明唐雄卓赵碧峰雷旻音黄婷吴秀山王跃群
- 文献传递
- 心脏发育候选基因PYGO1 RNAi逆转录病毒载体系统的构建与鉴定
- 2012年
- 利用RNA干扰技术构建PYGO1基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒(pSUPER-PYGO1)。首先,针对PYGO1 cDNA序列设计并化学合成一对编码短发夹RNA序列,经退火插入到由BglⅡ和XhoⅠ酶切的pSU-PER质粒上构建重组RNAi质粒pSUPER-PYGO1。通过XbaⅠ酶切鉴定及测序分析验证构建效果,将正确构建的质粒转染大鼠心肌细胞系H9c2建立产生逆转录病毒的细胞克隆。通过RT-PCR和Western blot检测pSU-PER-PYGO1对H9c2细胞中PYGO1 mRNA和PYGO1蛋白的干扰效果。pSUPER-PYGO1质粒经酶切鉴定及测序分析,发现59nt寡核苷酸成功插入到预计位点,且序列完全一致;RT-PCR和Western blot检测结果显示转染pSUPER-PYGO1的细胞中PYGO1 mRNA和PYGO1蛋白量明显降低。因此,靶向PYGO1的pSUPER RNAi载体构建成功,为进一步从分子水平探讨PYGO1在心脏发育中的功能奠定了基础。
- 刘明刘宪楚周军媚谢华平廖四芳宋文李佑锋吴秀山王跃群
- 关键词：RNA干扰PSUPERH9C2
- Smyd1干扰真核表达质粒及其稳定转染H9c2细胞系的构建
- 2011年
- 运用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)构建pSUPER.retro-Smyd1真核表达质粒,经鉴定后用脂质体法转染H9c2细胞,通过G418筛选出稳定表达pSUPER.retro-Smyd1的细胞系,最后经Western blot及RT-PCR实验鉴定其干扰效果。经鉴定,通过H9c2细胞系构建的pSUPER.retro-Smyd1干扰细胞系的干扰效果显著。因此,本实验成功构建了Smyd1干扰真核表达质粒及其稳定转染的H9c2细胞系,为进一步研究Smyd1基因在心脏发育中的作用奠定了良好的实验基础。
- 李帆廖四芳刘华友鲁建鑫刘宪楚刘明吴秀山李永青
- 关键词：RNAI技术SIRNA稳定转染
- 稳定过表达人KLHL31基因的H9c2细胞系的建立及鉴定被引量：1
- 2011年
- 人类KLHL31基因是本实验室已克隆的基因,其蛋白质含有保守的BTB和串连重复的Kelch结构域,实验表明人类KLHL31在成体骨骼肌和心肌组织中特异表达,KLHL31蛋白的过表达可以抑制了AP-1与SRE的活性。本文拟利用阳离子聚合物转染技术将重组表达质粒pCMV-tag2B-KLHL31转染H9c2细胞,通过G418筛选,RT-PCR和Western blotting验证,建立稳定过表达KLHL31基因的细胞系H9c2-KLHL31,为研究KLHL31在心脏发育及其相关功能提供有用的细胞研究模型。
- 周军媚叶湘漓廖四芳刘明吴秀山王跃群
- 关键词：MAPKH9C2稳定细胞系
- 抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体的制备和鉴定
- 2013年
- 制备抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体可用于研究果蝇mrj的生物学功能,使用IPTG诱导重组质粒pET28a-mrj在大肠杆菌Rosetta中表达,重组蛋白经过Ni-IDA凝胶柱亲和纯化后免疫BALB/c小鼠。然后取免疫好的小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经克隆和筛选获得了能分泌抗果蝇MRJ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。腹水制备后获得单克隆抗体,通过ELISA和Western Blot对所获得的抗体进行鉴定,结果表明所制备单克隆抗体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的MRJ蛋白,可用于研究mrj基因的生物学功能。
- 廖四芳刘丹宋文刘明赵阳唐超吴秀山王跃群
- 关键词：细胞融合单克隆抗体
- 染色体4q25区域rs2200733多态性与房颤相关性的Meta分析被引量：1
- 2017年
- 目的系统评价染色体4q25区域rs2200733多态性与房颤的关联。方法通过检索中英文数据库查找已发表的rs2200733与房颤易患性关系的病例对照研究,应用Rev Man5.3软件对符合要求的研究进行Meta分析。结果共纳入9篇研究文献,共计病例3 210例,对照5 070例。Meta分析结果显示:rs2200733多态性相关的T等位基因是房颤发生的风险因素[T vs C:OR=1.64,95%CI 1.32-2.05,P<0.000 1;TT vs CC:OR=2.83,95%CI 1.94-4.11,P<0.000 01;TC vs CC:OR=1.73,95%CI 1.28-2.34,P=0.000 4;TT vs TC+CC:OR=1.95,95%CI 1.33-2.86,P=0.000 6]。结论 4q25区域rs2200733多态性与房颤发病风险相关,T等位基因携带者遗传易感性较高。
- 刘明张新刘宪楚
- 关键词：房颤META分析
