张家贵
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
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- LncRNA GAS5介导miR-21调控心肌成纤维细胞活化增殖的机制研究
- 目的： 房颤（Atrial fibrillation，AF）是一种临床上常见的心律失常，与心脏瓣膜病等多种心脏疾病的发生有关。心肌纤维化（Cardiac fibrosis）是房颤发生的病理生理基础，也是心肌重构的一个重...
- 张家贵
- 关键词：心房颤动长链非编码RNA心肌成纤维细胞蛋白表达活化增殖
- 靶向沉默SIRT1对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响被引量：5
- 2017年
- 目的探究沉默信息调节因子1(SIRT1)对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响作用。方法应用转化生长因子-β1处理乳鼠原代心肌成纤维细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测SIRT1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达水平;Western blot法检测SIRT1、α-SMA的蛋白表达水平;MTT法检测心肌成纤维细胞的细胞增殖活性;使用LipofectamineTM2000 Reagent向乳鼠原代心肌成纤维细胞中转染siRNA-SIRT1。结果转染siRNA-SIRT1的心肌成纤维细胞,SIRT1蛋白和mRNA表达下降,同时α-SMA蛋白和mRNA表达下降;转染siRNA-SIRT1明显抑制心肌成纤维细胞的增殖活性。结论 siRNA-SIRT1对心肌成纤维细胞增殖活性有明显抑制作用,SIRT1可能成为心脏结构重构防治的新靶点,其调控剂的应用将为心肌纤维化的防治提供新的思路和方案。
- 施鹏陶辉张家贵曹炜钱鹏占红英石开虎
- 关键词：SIRT1心肌成纤维细胞Α-SMA
- 化学合成microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探究microRNA-21 inhibitors对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法应用LipofectamineTM2000Reagent向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染microRNA-21 inhibitors 24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测microRNA-21、I型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;Western blot法检测Col1A1和α-SMA的表达水平;MTT法检测microRNA-21 inhibitors对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。结果转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞中,microRNA-21表达下调,Col1A1和α-SMA的表达下降;转染microRNA-21 inhibitors的心肌成纤维细胞增殖活性明显减弱。结论 microRNA-21 inhibitors可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,提示microRNA-21是心肌成纤维细胞活化增殖的潜在靶向分子,有利于为干预和预防心肌纤维化的发生发展提供新思路。
- 张猛陶辉陈泽文张家贵宣海洋占红英石开虎
- 关键词：MICRORNA-21心肌成纤维细胞COL1A1Α-平滑肌
- 过表达LncRNA GAS5对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响被引量：8
- 2017年
- 目的应用长链非编码RNA GAS5(LncRNA GAS5)过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)转染SD大鼠心肌成纤维细胞,观察其对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法提取SD大鼠心肌成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激其增殖,分为pEGFP-C1-GAS5组、阴性对照组和空白对照组,应用LncRNA GAS5基因的过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)通过脂质体瞬时转染细胞,48 h后收获细胞。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测GAS5、Ⅰ型胶原前胶原(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,Western blot分析Col1A1和α-SMA蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖活力。结果 TGF-β1刺激心肌成纤维细胞后,qRT-PCR结果显示LncRNA GAS5的表达量较正常组下降(P<0.05);与阴性对照组和空白对照组比较,转染了pEG-FP-C1-GAS5的实验组,qRT-PCR结果显示实验组的GAS5表达均明显升高(P<0.05),同时α-SMA和Col1A1 mRNA表达显著降低(P<0.05);Western blot结果显示转染pEG-FP-C1-GAS5的实验组α-SMA和Col1A1蛋白表达量均明显降低(P<0.05);MTT法检测结果表明在实验组心肌成纤维细胞的增殖活力低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论过表达LncRNA GAS5可显著降低心肌成纤维细胞的增殖活力,提示GAS5有抑制心肌成纤维细胞的活化增殖的作用,为以后进一步研究提供依据。
- 张家贵陶辉施鹏陈泽文曹炜占红英石开虎
- 关键词：心肌成纤维细胞Α-平滑肌肌动蛋白
- 化学合成microRNA-29a inhibitors和mimics对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-29a(miR-29a)inhibitors和mimics对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法取SD大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养SD大鼠心肌成纤维细胞。应用Lipofectamine^(TM)2000 Reagent分别向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染miR-29a inhibitors和miR-29a mimics 24 h和48 h后,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-29a、Ⅰ型胶原前胶原A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的RNA水平的表达,MTT法检测细胞增殖活性。结果与正常对照组和阴性对照组比较,在瞬时转染miR-29a inhibitors的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平下调;而在转染miR-29a mimics的心肌成纤维细胞中,miR-29a的表达水平上调。CoilA1在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,而在miR-29a mimics组中则表达水平降低。α-SMA在miR-29a inhibitors组中表达水平升高,在miR-29a mimics组中则表达水平降低。瞬时转染miR-29a mimics 24、48 h后,与空白对照组和其阴性对照组相比较,心肌成纤维细胞活力明显下降;而瞬时转染miR-29a inhibitors 24、48 h后,心肌成纤维细胞活力则明显增强。结论 miR-29a mimics可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,而miR-29a inhibitors则显著提高心肌成纤维细胞的增殖活性,提示心肌纤维化的形成可能与miR-29a表达下调有关,其潜在的分子作用机制有待进一步研究。
- 陈泽文陶辉周晓施鹏张家贵宣海洋占红英石开虎
- 关键词：心肌成纤维细胞Α-SMA
