刘雨晴
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：吉林师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金吉林省教育厅科研项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 农杆菌介导的苜蓿遗传转化及PDH45转基因苜蓿耐盐性被引量：4
- 2018年
- 耐盐性基因的遗传转化能够提高植物的抗盐胁迫能力,有效解决盐胁迫抑制植物生长的问题。本研究中紫花苜蓿(Medicago sativa)被作为植物材料,利用农杆菌介导的叶盘转化法将PDH45基因转入紫花苜蓿中。影响遗传转化效率的各种条件被优化,包括农杆菌菌液浓度的优化、侵染时间的优化和选择培养基中卡那霉素浓度的优化。采用半定量(reverse transcription-PCR,RT-PCR)对PDH45转基因苜蓿进行了检测,结果表明转基因植株中PDH45基因均表达。在Na Cl浓度为50 mmol/L、100 mmol/L、150 mmol/L、200 mmol/L条件下,对PDH45转基因植株进行了耐盐性检测实验,结果表明中度盐胁迫150 mmol/L NaCl条件下,PDH45转基因植株表现出较强的耐受能力。本研究通过实验条件的优化,我们快速地获得了PDH45转基因苜蓿,为耐盐性转基因苜蓿的应用和推广提供了研究基础。
- 金太成刘雨晴许亚男孟大伟周晓梅杨丽萍
- 关键词：紫花苜蓿盐胁迫
- 烟草中RNA基因沉默抑制子HC-Pro的表达及鉴定被引量：1
- 2016年
- 农杆菌介导的遗传转化的生物技术已经被广泛应用。蚜传辅助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)是一种RNA沉默抑制子,而HC-Pro蛋白对植物基因组DNA甲基化的影响及其作用机制并不十分清楚。我们采用农杆菌介导的烟草(Nicotiana benthamiana L.)叶盘转化法将外源基因HC-Pro转化烟草。并优化了各种侵染条件,包括农杆菌重悬液的浓度,选择培养基中卡那霉素的浓度和生根培养基中活性炭的比例。此外,我们介绍了一种简单而有效的生根技术,即水培生根法,并利用这种技术快速获得了HC-Pro转基因株系。半定量RT-PCR(Reverse transcription-PCR)检测结果表明,HC-Pro在转基因烟草及转基因后代植株中稳定表达,为HC-Pro蛋白功能的研究提供了实验帮助。
- 刘雨晴许亚男孟大伟刘璐金太成周晓梅杨丽萍
- 关键词：烟草RNA沉默抑制子
- 利用根部真空侵染法在烟草中瞬时表达外源蛋白被引量：5
- 2016年
- 由于植物瞬时表达系统具有经济、安全、快速、高效的特殊优势,已经成为药用蛋白表达和生产的最理想的"分子工厂"。我们利用根部真空侵染法在烟草(Nicotiana tabatum L.)中瞬时表达了报告基因GFP,并利用半定量RT-PCR和Western Blot对外源蛋白的表达水平进行了分子水平上的检测。结果表明外源蛋白GFP在烟草(N.tabacum)中成功获得了表达。此外,我们优化了新表达体系的各种侵染条件,为利用新型生物技术生产药用蛋白提供了帮助。
- 杨丽萍许亚男刘雨晴孟大伟金太成
- 关键词：烟草绿色荧光蛋白药用蛋白
- 真菌免疫调节蛋白FIP在烟草中的瞬时表达被引量：1
- 2017年
- 当短时间内需要高水平的基因表达时,采用病毒载体介导的植物瞬时表达系统是具有一定优势的。本研究中我们构建了植物瞬时表达载体p35S-30B-FIP,并将表达载体转化农杆菌EHA105,建立了植物瞬时表达体系。利用一种瞬时表达体系的新型农杆菌侵染技术(根部真空侵染法)在烟草(Nicotiana tabatum L.)中进行真菌免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein,FIP)的瞬时表达,并采用Trizal法提取植物总RNA进行了半定量RT-PCR检测。研究结果表明:外源蛋白FIP在烟草(N.tabacum)中获得了瞬时表达。本研究为新型农杆菌侵染技术的利用以及药用蛋白的生产奠定了实验基础。
- 周波王悦许亚男刘雨晴孟大伟金太成杨丽萍
- 关键词：烟草
- 植物中外源蛋白Netrin-1的瞬时表达
- 2015年
- 植物瞬时表达系统具有安全、快速、经济和高效的特点,已经成为近些年来国内外的研究热点之一.本研究利用来源于烟草花叶病毒TMV的载体30B成功构建了植物瞬时表达载体p35S-30B-Netrin-1,并在烟草中成功地表达了神经轴突细胞导向生长因子-1(Netrin-1).利用报告基因进一步对植物瞬时表达体系进行了优化研究,确定了利用烟草瞬时表达外源蛋白Netrin-1的最适条件,为将来在植物中进行外源蛋白的瞬时表达和快速生产奠定了实验基础.
- 金太成杨丽萍刘雨晴孟大伟廖艺红张爽刘璐
- 关键词：绿色荧光蛋白
