王智鼎
- 作品数:10 被引量:35H指数:4
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 嗜酸乳杆菌高密度培养工艺条件的优化及其评价被引量:5
- 2013年
- 目的:探讨嗜酸乳杆菌培养条件,研制出一种菌活性高、密度大、操作简便、易于生产应用的发酵工艺,阐明乳酸菌直投式发酵剂的生产和应用。方法:选取嗜酸乳杆菌中国株为菌种,根据培养基成分的配比不同,分为实验组和对照组,优化培养条件以及MRS液体培养基的配方,通过紫外分光光度计检测菌液的吸光度(A650)值和活菌数量变化,筛选出最优的工艺过程。结果:通过筛选确定嗜酸乳杆菌的最佳培养条件是接种量1%,初始pH值6.2,37℃恒温厌氧培养23h;最适培养基配方为3.5%蛋白胨、0.5%酵母提取物、2%葡萄糖、0.2%柠檬酸铵、0.088%磷酸氢二钠、0.6%乙酸钠、0.025%硫酸锰、0.06%硫酸镁、1%营养因子和0.1%吐温80;由最适培养工艺培养得到的菌种数可达1.43×1011 cfu·mL-1,较传统培养方案相比菌种数增长约1×1011 cfu·mL-1,且工艺简便易行。结论:实现对嗜酸乳杆菌培养条件和培养基配方的优化,得到嗜酸乳杆菌最优培养工艺条件,菌种的高密度培养可用于乳酸菌直投式发酵剂的制备和应用。
- 宋艳李岳飞王智鼎宋帅孙德军
- 关键词:嗜酸乳杆菌
- 鼠李糖乳杆菌GG(LGG)高密度培养基优化被引量:4
- 2013年
- 鼠李糖乳杆菌GG是国家认可的第3代益生菌的一种,因其可在肠道定植并且有耐酸碱等特性而得到广泛应用。实验希望优化其培养基,使鼠李糖乳杆菌GG能用较低的成本来进行高密度培养。首先以MRS培养基为基础,根据物种特性进行碳源(麦芽糖:葡萄糖:乳糖:蔗糖)、氮源(胰蛋白胨:牛肉膏:酵母粉)和增菌物质(黄瓜汁:西红柿汁)的成分分别调整,之后进行单因素分析。在相同的条件下,经过37℃厌氧、恒温培养16 h后,测OD600来比较增菌效果。实验发现胰蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、西红柿汁这4种物质增菌明显。在以上述4种物质设计4因素3水平L9(34)的正交分析,结果为鼠李糖乳杆菌GG影响性西红柿汁>胰蛋白胨>葡萄糖>酵母粉,其中最佳配比方案为A3B1C3D2(2.5%胰蛋白胨+1.5%酵母粉+2.5%葡萄糖+20%西红柿汁)。在优化配方下鼠李糖乳杆菌GG可达9.4×109cfu/mL。
- 王智鼎刘艳秋李岳飞孙德军
- Tim-3在抗感染免疫中的作用研究进展被引量:1
- 2016年
- Tim-3是T细胞免疫球蛋白黏蛋白家族的重要成员,参与机体免疫调控。随着Tim-3研究的增多,Tim-3与抗感染免疫之间的关系逐渐受到人们的重视。该文主要阐述了近些年来Tim-3抗感染作用的研究进展。
- 王智鼎韩根成孙德军
- 关键词:TIM-3
- 一种复合果蔬发酵饮品增强免疫力功能研究被引量:9
- 2014年
- 探讨免疫康对机体的免疫调节能力。使用混合果蔬发酵饮品对小鼠进行30d灌胃,进行小鼠迟发型变态反应(DTH),ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法),血清溶血素测定,抗体生成细胞(PFC),小鼠碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。小鼠的各项指标都有所改善,证实了混合果蔬发酵饮品可以从体液免疫、细胞免疫和单核巨噬细胞系统方面改善机体免疫力。
- 王智鼎李岳飞宋艳孙德军
- 关键词:发酵免疫力饮品
- 干热法对猪凝血酶的病毒灭活效果及其对凝血酶活性影响的评价被引量:4
- 2013年
- 目的探讨干热法对猪凝血酶冻干制剂的病毒灭活效果及灭活后对凝血酶活性造成的影响。方法向猪凝血酶冻干制剂500 U、2 000 U中加入辛德毕斯病毒(Sindbis)、猪细小病毒(PPV)、脑心肌炎病毒(EMCV)和伪狂犬病病毒(PRV)4种病毒,各病毒滴度依次为6.83、6.57、6.34、6.96 Log10/0.1 mL,在98-100℃沸水中经30min干热病毒灭活后检测病毒灭活效果和对凝血酶活性影响。结果经干热法病毒灭活后,猪凝血酶冻干制剂中Sindbis、PPV、EMCV和PRV的病毒滴度分别由6.83、6.57、6.34、和6.96 Log10/0.1 mL降至1.21、1.43、0.96和1.38Log10/0.1 mL,经干热法处理后500 U的凝血酶冻干制剂活性损失≤10%,2 000 U的≤4%。结论干热法可有效降低猪凝血酶冻干制剂中指示病毒的滴度,处理后的凝血酶活性仍在国家药典规定范围,不失为1种凝血酶冻干制剂病毒灭活的安全﹑有效方法。
- 李岳飞刘艳秋王智鼎宋艳孙德军
- 关键词:病毒灭活病毒滴度凝血酶活性
- 兔心肌中次黄嘌呤纯化工艺的优化被引量:5
- 2012年
- 目的探索从兔心肌中提取次黄嘌呤的最佳工艺。方法比较三氟乙酸法、酶解法、酸碱法和醇沉法提取的次黄嘌呤的产率和纯度,得到优化制备工艺。结果利用醇沉法,向细胞充分破碎后的匀浆液中加入4倍体积的纯水,超声提取,向提取液中加入乙醇至浓度60%,置60℃水浴反应120 min,提取的次黄嘌呤产率为0.83 mg/g,纯度为82.4%。结论经过纯化工艺比较,醇沉法提取的次黄嘌呤的含量和纯度优于其他方法。
- 宋艳王智鼎李岳飞邱岚姜秀梅孙德军
- 关键词:次黄嘌呤纯化
- 一种混合乳酸菌发酵饮品调节胃肠功能研究
- 2013年
- 探讨混合乳酸菌发酵饮品的体内调节胃肠功能。利用昆明种小鼠进行小肠推进功能的比较和小鼠胃排空功能的检测,并且用大鼠建立肝胃不和动物模型后对其胃运动频率、幅度进行试验检测。结果显示,混合乳酸菌发酵饮品能有效地恢复胃正常的机械运动,其胃的收缩频率、幅度均有明显地提高,并且能显著增强胃排空及小肠的推进功能,说明混合乳酸菌发酵饮品能够有效地调节胃肠功能。
- 王智鼎李岳飞宋艳孙德军
- 关键词:胃肠功能人参发酵益生菌饮品
- 可溶性Tim-3体外增强免疫应答的作用及机制研究被引量:3
- 2017年
- 目的评价重组人(hTim-3)-Fc融合蛋白在调节免疫应答中的作用及其机制研究。方法分别将重组hTim-3-Fc融合蛋白与人巨噬细胞系U937细胞、T淋巴细胞系Jurkat细胞及正常人外周血细胞共培养,采用ELISA、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western印迹)方法检测免疫相关细胞因子水平的变化,探讨重组hTim-3-Fc融合蛋白对免疫细胞活性的影响并阐明机制。结果重组hTim-3-Fc融合蛋白可显著提高免疫细胞活性,表现为U937中IL-8分泌水平,Jurkat细胞IL-2分泌水平,以及人外周血中IL-2和IFN-γ分泌水平显著升高;在mRNA水平,发现重组hTim-3-Fc融合蛋白能显著提高上述细胞中Ⅰ型干扰素(包括IFN-α2、IFN-β1)的表达。在分子机制方面,重组hTim-3-Fc融合蛋白可增强T细胞(Jurkat)及巨噬细胞(U937)中stat-1的磷酸化水平。结论制备的重组人Tim-3-Fc融合蛋白在体外能显著增强免疫细胞活性,有望成为免疫抑制性疾病新的免疫干预药物。
- 李葛王智鼎窦帅杰侯春梅肖鹤王仁喜陈国江黎燕韩根成
- 关键词:TIM-3细胞因子类U937细胞JURKAT细胞T淋巴细胞
- 亚甲基蓝对猪凝血酶病毒灭活/去除工艺验证实验
- 2012年
- 目的验证亚甲基蓝光化学法灭活猪凝血酶中病毒的灭活效果,完善生产工艺。方法在SINV、EM-CV、PPV和PRV等4种病毒中,加入0.5 mg/L的亚甲基蓝置于病毒光照灭活仪上光照2 h和用60 kD膜超滤的灭活病毒方法来验证工艺的可行性。结果经亚甲基蓝可有效灭活病毒,经超滤法滤除可有效去除病毒。掺入到凝血酶原液中的病毒以及在原培养物中病毒都丧失了对细胞的感染性,降低的滴度TCID50高于4 Log10。结论亚甲基蓝光化学法可有效灭活猪凝血酶中病毒。
- 王智鼎宋艳孙丽孙德军
- 关键词:凝血酶亚甲基蓝病毒
- 肌氨肽苷制备工艺及其病毒去除方法的验证被引量:4
- 2008年
- 目的研究肌氨肽苷制备工艺并对超滤法去除病毒工艺进行验证。方法以家兔心脏和肌肉为原料,制得肌氨肽苷原液。并以猪细小病毒(PPV)为指示病毒,观察用截留相对分子质量为10 000的超滤器在进压0.12MPa、回流压0.05 MPa和进压0.20 MPa、回流压0.12 MPa条件下去除肌氨肽苷原液中病毒的效果,并以牛血清白蛋白为对照品,20%磺基水杨酸作为指示剂的条件下,对超滤膜的完整性进行验证。结果滤过液中未检测出PPV,经过盲传3代,也未发现特异性细胞病变;磺基水杨酸检测未变浑浊,表明膜完整性好,超滤设备可用。结论制备肌氨肽苷的方法可行,且所采用的超滤法去除PPV是1种有效去除病毒的方法。
- 孙妙囡孙德军王智鼎
- 关键词:肌氨肽苷生产工艺超滤法