臧大康
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 杀虫蛋白基因cry8Fa2的克隆及在Bt无晶体突变株中的表达
- 苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis，简称Bt）是目前研究最深入的杀虫微生物，其杀虫蛋白基因也是应用最广泛和最有发展潜力的抗虫基因，因此，深入发掘Bt新菌株、分离克隆新型的杀虫基因对害虫的防治具有...
- 臧大康
- 关键词：苏云金芽孢杆菌基因克隆蛋白表达杀虫活性
- 文献传递
- 杀虫蛋白基因cry8Fa2的克隆及在Bt无晶体突变株中的表达
- 2011年
- 以本实验室分离的Bt菌株B-DLL质粒DNA为模板,利用cry8类基因特异性引物JJX5和JJX3扩增出3.5kb的片段,将该片段插入克隆载体pMD 18-T中,筛选获得一个含新基因的克隆pMD-cry8new。序列测定表明,该基因编码区为3 525 bp,编码的蛋白质由1 174个氨基酸残基组成,理论分子量为133.05 kDa,等电点为pH4.69,为弱酸性蛋白。该基因核苷酸序列已在GenBank登录(Accession number:HQ174208),编码的氨基酸序列与Cry8Fa1的同源性最高达99.8%,被国际Btδ-内毒素命名委员会正式命名为Cry8Fa2。将cry8Fa2基因插入Bt表达载体pSXY422b中,电击导入Bt无晶体突变株HD-73-中,获得重组Bt工程菌HD73-Cry8Fa2,该工程菌能形成伴孢晶体,并表达130 kDa的蛋白。生物测定结果表明,该基因表达产物对暗黑鳃金龟和华北大黑鳃金龟幼虫均不具有杀虫活性。
- 臧大康郑桂玲周洪旭张媛李国勋李长友
- 关键词：BT基因克隆蛋白表达
